甘青鐵線蓮的生物活性成分研究.pdf

1、甘青鐵線蓮(Clematistangutica)是毛茛科鐵線蓮屬(ClematisL.)植物,主要分布于我國(guó)西部地區(qū),全草入藥,在藏醫(yī)藥中用于活血通瘀和消化不良等癥的治療。該植物的全草是具有顯著治療心腦血管疾病效果的復(fù)方成藥益心康泰膠囊的主要組分。目前有關(guān)其化學(xué)成分的報(bào)道較少。
　　本課題對(duì)采自青海省黃南藏族自治州的甘青鐵線蓮全草采用反復(fù)硅膠柱色譜、凝膠(SephadexLH-20)柱色譜及HPLC制備等方法進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研

2、究。從75％乙醇提取物中獲得31個(gè)成分,并運(yùn)用理化常數(shù)測(cè)定、波譜數(shù)據(jù)分析和化學(xué)分析等手段鑒定了所有化合物的結(jié)構(gòu)。這些化合物包括6個(gè)黃酮苷:芹菜素-7-O-β-D-(-6''-p-香豆?；?-吡喃葡萄糖苷(1),槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),異葒草素(3),槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(4),木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)和芹黃春(6);24個(gè)皂苷:hederacholich

3、isideF(7),3-O-{-β-D-吡喃木糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖}-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡糖糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖

4、苷(9),3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖3β,21α,23-三羥基-齊墩果-12-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),leontoside(11),3-O-β-D-吡喃半乳糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-

5、D-吡喃葡萄糖苷(12),常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13),kizutasaponinK12(15),clematibetosideC(16),紅毛七皂苷D(17),皂苷PJ3(18),hederacholichisideE(19),3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯

6、糖-3β,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(20),3-O-β-D-吡喃木糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(21),cussonosideA(22),刺五加皂苷C3(23),3-O-β-D-吡喃核糖-齊墩果酸-28-O-α-L-

7、吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(24),續(xù)斷皂苷VI(25),3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-絲石竹皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(26),齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(27),cussonosideB(28),常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃

8、葡萄糖苷(29),HN-皂苷F(30)和CP1(31);以及1個(gè)酯類成分:鄰苯二甲酸丁酯(14)。其中,化合物8–10,13,20,21和24為未見(jiàn)報(bào)道的新化合物;化合物1,7,11,12,19,23和25–30為首次從鐵線蓮屬植物中分離;除化合物15和18外,均為首次從該植物中獲得。
　　以地爾硫?為陽(yáng)性對(duì)照藥,采用缺氧復(fù)氧模型對(duì)甘青鐵線蓮中分離獲得的皂苷類化合物7,9-11,13,15-17,20和25進(jìn)行抗心肌缺血活性測(cè)試。

9、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:化合物9,10,13,17和25顯示中等的心肌保護(hù)活性,它們對(duì)LDH和CK-MB兩種酶的ED50分別為77.31,114.26,92.44,127.22,120.33和75.77,110.51,87.39,121.92,109.48mM?；衔?,11,15,16和20無(wú)心肌保護(hù)活性。
　　首次采用腦中動(dòng)脈栓塞模型(MCAO)評(píng)價(jià)化合物1對(duì)缺血性腦損傷的保護(hù)作用,結(jié)果顯示其在25mg/kg,50mg/kg和100mg

10、/kg時(shí)均能縮小經(jīng)MCAO處理后的大鼠(小鼠)腦梗塞面積,改善神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分,并且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。
　　課題創(chuàng)新性及研究意義:
　　1.本文對(duì)甘青鐵線蓮全草的醇提物進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究,分離鑒定31個(gè)化合物,其中包括7個(gè)新化合物和12個(gè)首次從鐵線蓮屬中獲得的化合物,基本明確了該藥材的化學(xué)成分。
　　2.本課題分離鑒定的化合物10的苷元3β,21α,23-三羥基-齊墩果-12-烯-28-酸為首次從天然界中獲得的新

11、苷元;化合物20的苷元3β,23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸在天然界中比較少見(jiàn);而化合物21具有的3位糖鏈“Xyl(1→2)Ara-”在齊墩果烷型三萜皂苷中未見(jiàn)有報(bào)道。這與本屬其他植物所分離到的皂苷類化合物有明顯的區(qū)別,可能與其生長(zhǎng)在寒冷缺氧的特殊環(huán)境有關(guān)。這些研究結(jié)果對(duì)鐵線蓮屬植物的化學(xué)分類學(xué)可能具有意義。
　　3.對(duì)部分皂苷類化合物開(kāi)展了初步的抗心肌缺血活性測(cè)試,5個(gè)化合物具有心肌保護(hù)作用,并初步探討了該類成分的構(gòu)效關(guān)