Brugada綜合征臨床特點及SCN5A基因分子遺傳學(xué)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、一、目的:1、總結(jié)中國人Brugada綜合征的臨床特征;2、尋找中國人心源性猝死相關(guān)基因SCN5A新的突變位點;3.構(gòu)建包含突變體的hH1真核表達(dá)載體.二、方法:1.收集中國人Brugada綜合征患者26例的臨床和心電圖資料,結(jié)合文獻(xiàn)分析總結(jié)其臨床特征;2.利用多聚酶鏈反應(yīng)及DNA直接測序?qū)?個Brugada綜合征家系和2例特發(fā)性J波SCN5A基因的全部28個外顯子進(jìn)行PCR擴(kuò)增和直接測序工作,尋找中國人SCN5A基因中新的突變位點.測

2、序結(jié)果與Gene bank中的序列進(jìn)行對比,比較有無核苷酸的改變;3.根據(jù)完整的pRc/CMV-hH1真核載體的限制性內(nèi)切酶酶切圖譜,在N1774S突變位點的上游和下游各有一個單一的限制性內(nèi)切酶Psha I及Xba I酶切位點,根據(jù)這兩個酶切位點和突變位點設(shè)計兩對引物,將突變位點設(shè)計在引物上,通過重疊延伸PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增片段上含有所需要的突變位點,最后將擴(kuò)增片段克隆入pRc/CMV-hH1中,通過測序驗證定點誘變是否成功.三、結(jié)論:1、

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