益智組分中藥改善衰老小鼠學習記憶能力的作用與機制研究.pdf

1、目的:對益智組分中藥(YZCCM)改善衰老小鼠學習記憶能力的作用和機制進行研究。
　　方法:(1)①建立HPLC法測定組方中阿魏酸、天麻素的含量;建立比色法測定人參皂苷的含量。②采用大孔吸附樹脂法分別從黃芪和淫羊藿藥材中分離純化得到黃芪皂苷和淫羊藿黃酮;以黃芪甲苷為對照品，選用香草醛—冰醋酸發(fā)色體系，采用可見分光光度法對黃芪皂苷進行含量測定;選用淫羊藿苷作為對照品，采用比色法對淫羊藿黃酮進行含量測定。(2)皮下注射D-半乳糖以建立

2、擬衰老小鼠模型，并進行最優(yōu)配伍的YZCCM的藥效學評價:①通過Morris水迷宮實驗，以定向?qū)Ш胶涂臻g探索能力為指標考察其對衰老小鼠學習記憶能力的影響。②利用試劑盒分別測定AChE（乙酰膽堿酯酶）、ChAT（乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶），Glu（谷氨酸）的含量，以考察其對衰老小鼠神經(jīng)遞質(zhì)的影響。③采用試劑盒法分別測定SOD（超氧化物歧化酶）、MDA(丙二醛)、GSH-px(谷胱甘肽過氧化物酶)的含量以評價其對氧化應激的影響。④采用免疫組化方法分別檢

3、測小鼠海馬和大腦皮質(zhì)組織中Aβ1-40含量及細胞凋亡水平。
　　結果:(1)①組方中阿魏酸、天麻素、人參皂苷的含量分別為98.00％、97.19％、80.68％。②提取分離得到的黃芪皂苷、淫羊藿黃酮的含量分別為80.67％、83.47％。(2)①YZCCM組小鼠定向航行成績和空間探索成績縮短，學習記憶能力明顯提高，與模型組相比有顯著性差異(P＜0.05)。②YZCCM組小鼠腦組織中AChE活性明顯降低，ChAT活力明顯提高，Glu

4、表達顯著減少，與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。③YZCCM組小鼠MDA含量降低，SOD和GSH-px活力提高與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。④YZCCM組小鼠海馬和皮質(zhì)中Aβ1-40含量降低，平均灰度值升高，陽性細胞表達數(shù)減少，細胞凋亡程度減弱，與模型組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。
　　結論:YZCCM能有效地對抗D-半乳糖所致的小鼠多項衰老指標的出現(xiàn)，改善衰老小