流式熒光法、多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片和TK1在頭頸部腫瘤的臨床研究.pdf

1、腫瘤標(biāo)志物(Tumor marker TM)是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)而合成分泌的或是機(jī)體對(duì)腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素酶(同工酶)、胺類及癌基因產(chǎn)物等。TM存在于病人的血液、體液、細(xì)胞或組織中，可用免疫學(xué)、生物化學(xué)及分子生物學(xué)等方法測(cè)定，且對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、觀察療效、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)及預(yù)后評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。
　　 流式熒光法，是激光激發(fā)熒光的發(fā)光類

2、技術(shù)之一，又稱液態(tài)芯片、懸浮陣列，是一個(gè)高速度、高通量以及多功能生物技術(shù)平臺(tái)，它把激光技術(shù)、編碼微球(Code beads)和最新的高速數(shù)字信號(hào)處理器進(jìn)行了有機(jī)的整合，造就了其卓越的檢測(cè)特異性和靈敏度，廣泛應(yīng)用于免疫分析和核酸研究，得到醫(yī)學(xué)界和權(quán)威機(jī)構(gòu)的高度認(rèn)可，是臨床診斷領(lǐng)域和生命科學(xué)研究中的熱點(diǎn)。而單一的腫瘤標(biāo)志物檢查難以達(dá)到理想的靈敏度和特異性，國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究表明，運(yùn)用多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，將有助于提高靈敏度和特異性。腫瘤患者血

3、清胸苷激酶-1濃度檢測(cè)是近年來研究的熱點(diǎn)之一，已在多數(shù)惡性腫瘤的診斷、療效、預(yù)后等方面顯示其獨(dú)有的優(yōu)勢(shì)，我們?cè)噲D通過用流式熒光法、胸苷激酶-1(TK1)試劑盒與多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片(MTMPC)檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)頭頸部惡性腫瘤患者的血清進(jìn)行檢測(cè)，探討頭頸部惡性腫瘤患者中TK1及其他相關(guān)腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)情況。
　　 目的：
　　 探討流式熒光法、多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片技術(shù)和TK1在頭頸部惡性腫瘤診斷及治療中的價(jià)值。
　　 方

4、法：
　　 本課題運(yùn)用了流式熒光法檢測(cè)了4例頭頸惡性腫瘤患者血清中癌胚抗原(CEA)、細(xì)胞角質(zhì)素片段19(CY211)和癌抗原125(CA125)等多腫瘤標(biāo)志物的濃度水平，就該檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行了方法學(xué)評(píng)價(jià)，并與多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片(MTMPC)檢測(cè)系統(tǒng)中檢測(cè)出的相應(yīng)的三項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物濃度進(jìn)行了比較分析。
　　 2.本課題利用抗TK1單克隆抗體建立的免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)20例初治鼻咽癌患者治療前及治療后的血清中TK1濃度和

5、20例對(duì)照組(正常體檢健康人)的血清TK1濃度并采用免疫酶標(biāo)法檢測(cè)血清中VCA-IgA水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.CEA+CY211+CA125檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)：最低檢測(cè)限分別是0.0694ng/ml、0.7712ng/ml和0.6461U/ml，遠(yuǎn)低于極限(cutoff)值；干擾試驗(yàn)結(jié)果表明，在一份低值血清樣本中加入高濃度的血紅蛋白、甘油三酯、膽紅素三種干擾物質(zhì)，并不會(huì)影響結(jié)果的判斷；批內(nèi)變異系數(shù)和批間異系數(shù)均小于

6、10％；在測(cè)定范圍內(nèi)，流式熒光法測(cè)定CEA、CY211和CA125三種腫瘤標(biāo)志物的線性良好；流式熒光法與多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片(MTMPC)檢測(cè)系統(tǒng)中檢測(cè)的三種指標(biāo)相關(guān)性良好。
　　 2.鼻咽癌組治療前STK1濃度2.65(0.90-2.83)pmol/L明顯高于健康體檢者的STK1濃度0.62(0.23-4.38)pmol/L；鼻咽癌治療后組STK1濃度1.25(0.25-7.34)pmol/L比鼻咽癌組治療前STK1濃度2.6

7、5(0.90-2.83)pmol/L明顯下降；鼻咽癌患者中血清TK1陽性率75.7％與VCA-IgA檢出陽性率82.3％相近，鼻咽癌患者治療后TK1陽性率(32.4％)明顯低于VCA-IgA陽性率(75.7％)。
　　 結(jié)論：
　　 1.流式熒光法具有線性范圍廣、靈敏度高、重復(fù)性好、節(jié)省時(shí)間和樣品等優(yōu)點(diǎn)，具有臨床應(yīng)用潛力。
　　 2.血清TK1檢測(cè)在鼻咽癌患者的臨床診斷中具有一定臨床意義；血清TK1檢測(cè)與VCA-