轉基因棉花突變體的鑒定和生理指標分析.pdf

1、植物轉基因技術是定向改良植物性狀、高頻誘發(fā)突變體產生的一條有效途徑，對于作物品種的改良和新品種選育具有重要意義。本研究以導入轉座活化結構的不同陸地棉轉基因株系后代為材料，通過分子生物學手段對主要轉基因株系進行了初步鑒定及其誘發(fā)突變的效應，并初步分析了相關突變材料在生理生化代謝方面的差異。其主要結果如下： 1.以篩選基因NPTII基因為特異性引物時，在4105為受體的轉基因株系中的擴增陽性率為26.1％，以1107為受體的轉基因株

2、系的擴增陽性率為27.2％。兩種受體材料的轉化效率比較接近；以Bar基因為引物時，轉基因4105和1107的后代株系的擴增陽性率分別為28.1％和31.8％。通過分析可得出只含Bar基因的植株共122株，占被分析植株的比例為17.4％。說明Ds發(fā)生了轉座，并與Ac因子產生了分離，有利于得到具有穩(wěn)定遺傳效應的突變材料。 2.對T3代部分轉座活化的棉株進行SouthernBlotting分析，初步證明外源基因已整合到棉花基因組中。

3、 3.轉基因棉花株系的主要生理指標的測定結果為：4105的L3株系在葉綠素含量和光合速率上與對照呈極顯著差異，1107為受體的L9株系在蕾期與對照相比存在顯著差異，在花鈴期和吐絮期與對照的差異達到極顯著水平，間接說明轉座活化結構中的35S四聯(lián)體增強子可影響插入位點附近的基因表達。此外，以4105為受體的轉基因株系的葉綠素含量和光合速率均高于以1107為受體的轉基因株系，說明轉基因的受體不同產生的突變效應也存在差異?？傮w來看，410

4、5轉基因棉花株系中產生的晚熟類型的變異較多；而1107轉基因株系中出現的早熟類型的變異較多。 4.通過對不同轉基因株系葉片可溶性蛋白質進行SDS-PAGE，得到結果如下：轉基因棉花突變體在某些蛋白亞基的表達量上高于對照，尤其是分子量大約為50kD的亞基。此外，在相同的環(huán)境條件下，轉基因棉花突變系的SDS-PAGE圖譜中還出現了一條大約42kD的蛋白質條帶，而在對照中則不存在此條帶，說明導入轉座活化結構的棉花后代株系中可能存在由增