四種藥用植物的化學(xué)成分及活性研究.pdf

1、祖師麻為瑞香科Thymelaeaceae瑞香屬植物黃瑞香Daphne giraldii.Nitsche的根皮和莖皮,同屬植物唐古特瑞香D.tangutica Maxim、凹葉瑞香D.retusa Hemsl.、長白瑞香D.koreana Nakai.和同科結(jié)香屬植物結(jié)香Edgeworthia chrysantha Lindl.均可同等入藥。分布在陜西、甘肅、四川、寧夏、青海等地。祖師麻具有祛風(fēng)除濕、止痛散瘀之功效。民間廣泛用于治療疼痛、

2、跌打損傷、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和支氣管炎等癥。其中,凹葉瑞香(D.retusa Hemsl.),又名桂花矮陀陀,雜蘭等,為瑞香科瑞香屬植物。根及莖皮用來治療跌打損傷,浙江民間用來治療慢驚風(fēng)；長白瑞香(D.koreana Nakai.)是長白山區(qū)的特有植物,又名辣根草,為瑞香科瑞香屬植物。主要用來治關(guān)節(jié)酸痛,手足麻木、肢體癱瘓、痛經(jīng)、胸痛、冠心病,風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、血栓閉塞性脈管炎；結(jié)香(Edgeworthia chrysantha Lindl.),

3、又名打結(jié)花,為瑞香科結(jié)香屬植物,根及莖皮入藥,主要用來祛風(fēng)除濕。
　　 本文采用抗炎鎮(zhèn)痛活性跟蹤指導(dǎo)分離的方法研究了作為中藥祖師麻入藥的三種基原植物凹葉瑞香、長白瑞香和結(jié)香的化學(xué)成分,并首次報道了凹葉瑞香、結(jié)香的抗炎鎮(zhèn)痛的藥理活性,同時還測試了部分單體化合物的抗炎鎮(zhèn)痛活性。
　　 本文對凹葉瑞香、長白瑞香、結(jié)香的總提物以及各萃取極性部位進行了抗炎和鎮(zhèn)痛的活性篩選實驗。實驗表明凹葉瑞香、長白瑞香、結(jié)香的總提物對二甲苯引起的

4、小鼠的耳腫脹具有一定的抑制作用,對完全弗氏佐劑引起的大鼠足腫脹具有一定的抑制作用,同時還對RAW264.7巨噬細胞NO代謝有顯著的抑制作用。同時凹葉瑞香、長白瑞香和結(jié)香的總提物能夠顯著減少醋酸引起的小鼠扭體次數(shù),顯示了一定的鎮(zhèn)痛活性。同時,實驗還發(fā)現(xiàn)凹葉瑞香、長白瑞香和結(jié)香的氯仿部位、乙酸乙酯部位均具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛的活性。
　　 根據(jù)藥理活性實驗結(jié)果,應(yīng)用現(xiàn)代色譜分離技術(shù),我們對凹葉瑞香、長白瑞香和結(jié)香的氯仿部位和乙酸乙酯部位

5、進行了系統(tǒng)的化學(xué)分離,并分別從中分離純化得到了65個化合物,運用UV,IR,ESI-MS,1D-NMR,2D-NMR等光譜技術(shù)和物理化學(xué)方法鑒定了其中的61個,其結(jié)構(gòu)分別為DR-1:對羥基苯甲酸,DR-2:β-谷甾醇,DR-3:胡蘿卜苷,DR-4:瑞香素,DR-5:雙白瑞香素,DR-6:丁香醛,DR-7:7-羥基-8-甲氧基香豆素,DR-8:芫花素,DR-9:7-甲氧基-8-羥基香豆素,DR-10:傘形花內(nèi)酯,DR-11:結(jié)香苷A,DR

6、-12:結(jié)香苷C,DR-13:4’,5-二羥基-3’,7-二甲氧基黃酮,DR-14:瑞香新素,DR-15:5’-去甲氧基瑞香新素,DR-16:瑞香醇酮,DR-17:紫丁香苷,DR-18:左旋松脂酚,DR-19:雙白瑞香素-7-O-β-D-葡萄糖苷,DR-20:芫花苷,DR-21:傘形花內(nèi)酯-7-O-β-D-葡萄糖苷,DR-28:[8,8’-Bi-2H-1-benzopyran]-2,2'-dione,7’-(β-D-glucopyran

7、osyloxy)-7-hydroxy-3-[(2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)oxy],DK-1:β-谷甾醇,DK-2:十八烷基咖啡酸酯,DK-3:瑞香素,DK-4:傘形花內(nèi)酯,DK-5:胡蘿卜苷,DK-6:秦皮乙素,DK-7:雙白瑞香素,DK-8:山柰酚,DK-9:瑞香新素,DK-10:木犀草素,DK-11:芹菜素,DK-12:櫻花苷,DK-13:芫花素,DK-14:芫花苷,DK-16:7-甲氧基-木犀草素-5-

8、O-β-D-葡萄糖苷,DK-17:雙白瑞香素-7-O-β-D-葡萄糖苷,DK-18:異瑞香新素,DK-19:5”-去甲氧基瑞香新素,DK-20:紫丁香苷,DK-25:瑞香苷,JX-4:Edgeworin,JX-6:胡蘿卜苷,JX-7:傘形花內(nèi)酯,JX-8:雙白瑞香素,JX-9:結(jié)香苷A,JX-10:5-羥基-7-甲氧基香豆素-8-O-β-D-葡萄糖苷,JX-11:芹菜素,JX-12:結(jié)香苷C,JX-13:結(jié)香苷B,JX-14:異雙白瑞香

9、素,JX-15:2,6-二甲氧對苯醌,JX-16:傘形花內(nèi)酯-7-O-β-D-葡萄糖苷,JX-17:紫丁香苷,JX-18:雙白瑞香素-7-O-β-D-葡萄糖苷,JX-19:瑞香新素,JX-20:6-hydroxyl-odesmethoxyrutarensin,JX-21:8-(4-(1,3-benzenediol)propionic acid methyl ester)-coumarin-7-O-β-D-glucoside,JX-23:

10、Triumbellin。
　　 本文對量較大的單體化合物成分進行了抗炎鎮(zhèn)痛的活性實驗。體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn),JX-4,JX-9,DR-5,DR-16,DK-3能夠顯著抑制二甲苯引起的小鼠耳腫脹,能夠抑制完全弗氏佐劑引起的大鼠關(guān)節(jié)腫脹,顯示了一定的抗炎活性。JX-4,JX-9,JX-12,DR-5,DR-16,DK-4,DK-9還能夠顯著減少醋酸引起的小鼠扭體次數(shù),顯示了較好的鎮(zhèn)痛活性。
　　 為全面研究祖師麻三種資源藥用植物的化

11、學(xué)成分,本文對其余部位也進行了系統(tǒng)的研究,從中分離得到了21個化合物,鑒定了其中的14個。其結(jié)構(gòu)分別為:JX-1:二十碳酸單甘油酯,JX-2:對羥基苯甲酸,JX-3:β-谷甾醇,JX-5:肌醇,DR-22:瑞香黃烷A,DR-23:瑞香黃烷B,DR-24:瑞香黃烷C,DR-25:瑞香黃烷D1,DR-26:瑞香黃烷E,DR-27:瑞香黃烷F,DK-21:左旋松脂酚,DK-22:落葉松脂醇,DK-23:左旋松脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷,D

12、K-24:落葉松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷。
　　 所有得到的化合物中,JX-20,JX-21為新化合物,DR-4,5,6,7,9,8,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,28,DK-2,3,4,5,7,8,10,11,13,14,16,17,18,19,21,22,23,24,JX-5,10,11,14,15,17,18,19,16,23為首次從該植物中分離

13、得到。蓼子樸[Inula salsoloides(Turc.)Ostenf.]為菊科旋覆花屬植物。花及開花前的全草均可藥用,有解熱、利尿的功能,全草還為治療脈管炎主藥。在我國的新疆、內(nèi)蒙古、青海東北部、陜西、河北、山西、遼寧中西部均有廣泛的分布。本文運用各種色譜分離手段從中分離得到T32個化合物,運用光譜技術(shù)鑒定了其中的25個化合物,結(jié)構(gòu)如下:IS-1:β-谷甾醇,IS-2:cis-1-p-Menthene-3,6-diol,IS-3:

14、正十二烷,IS-4:對羥基苯甲酸,IS-5:對羥基苯甲酸乙酯,IS-7:3’,4’,7-三羥基-5-甲氧基黃酮,IS-8:豆甾醇,IS-9:1-Cyclodecene-2,5,6,9-tetrol,1,8-dimethyl-7-(1-methylethyl)-,[(2α,5β,6α,7α,8β,9α)],IS-10:沙地旋覆花內(nèi)酯B,IS-11:Isoalantolactone,IS-12:山柰酚,IS-13:沙地旋覆花內(nèi)酯,IS-14

15、:堆心菊內(nèi)酯,IS-15:金合歡素,IS-16:槲皮素,IS-17:大黃素甲醚,IS-18:芹菜素,IS-20:8,9,10-Trihydroxythymol,IS-21:9,10-Dihydroxythymol,IS-23:4’,7-二羥基黃酮,IS-24:木犀草素,IS-25:澤蘭內(nèi)酯,IS-26:4α,5β-Epoxyeupatolide,IS-30:3’,5’,5,7-四羥基黃酮,IS-32:4’,6,7-三羥基黃酮。
　

16、　 實驗發(fā)現(xiàn)除了IS-9,IS-20,IS-21三組僅最高劑量組(1μg/mL)有一定的抑制RAW264.7巨噬細胞NO的產(chǎn)生(P<0.01)；IS-25組除最低劑量組(0.01μg/mL)沒有抑制作用外,其余各劑量組均有一定的抑制作用(P<0.01)；其余IS-10,IS-11,IS-13,IS-15,IS-26各組各劑量組對RAW264.7巨噬細胞NO的產(chǎn)生均有一定的抑制作用(P<0.01)。但是在MTT中,各組均顯示了細胞毒性,

17、推測對RAW264.7巨噬細胞產(chǎn)生NO的抑制作用的因為可能是細胞毒性的緣故。在對NF-κB激活的抑制作用的實驗中,受試樣品各組除IS-10,IS-13,IS-14,IS-26有一定的對NF-κB激活的抑制作用外(P<0.05),其他各組均沒有表現(xiàn)對NF-κB激活的抑制作用。
　　 所得的化合物,IS-9和IS-10為新化合物,IS-1,4,5,7,8,12,14,15,17,18,20,20,23,24,26,30,32為首次從

18、該植物中分離得到。
　　 結(jié)論:本文從中藥祖師麻入藥的三種植物中共分離得到了84個化合物,其中2個新化合物,52個首次從該三種植物中分離得到。通過抗炎鎮(zhèn)痛的活性篩選實驗,發(fā)現(xiàn)三種植物的氯仿和乙酸乙酯等部位具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛活性,單體化合物JX-4,JX-9,DR-5,DR-16,DK-3具有一定的抗炎活性,JX-4,JX-9,JX-12,DR-5,DR-16,DK-4,DK-9和DK-25具有較好的鎮(zhèn)痛活性。本文從蓼子樸中共分離