冠心病患者慢性冬眠心肌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及相關(guān)分子生物學(xué)機(jī)制的研究.pdf

1、背景：最近的研究已明確冠心病患者功能異常的心肌中有存活的慢性冬眠心肌。有效的血運(yùn)重建可使慢性冬眠心肌功能部分或完全恢復(fù)正常。慢性冬眠心肌的存在使患者左心功能持續(xù)低下、發(fā)生惡性心律失常、猝死的危險大增。因此冬眠心肌已成為近年來冠心病研究領(lǐng)域的熱點之一，但冬眠心肌形成的確切機(jī)制尚不完全清楚。一系列的動物研究發(fā)現(xiàn)MAPKs(mitogen activated protein kinase絲裂素活化蛋白激酶家族)參與了心肌細(xì)胞的增殖、分化和凋亡

2、過程，冬眠心肌中存在凋亡的心肌細(xì)胞；抗腫瘤壞死因子單克隆抗體預(yù)處理能明顯減輕心肌細(xì)胞凋亡程度，冬眠心肌局部收縮功能儲備與TNF-a(tumor necrosis factor a腫瘤壞死因子a)呈負(fù)相關(guān)。研究亦發(fā)現(xiàn)缺血心肌對糖的攝取明顯增加，心肌細(xì)胞中GLUT4(glucose tranlsport type 4葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)因子4)、iNOS(inducible nitric oxide synthase誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶)表達(dá)增加。這

3、些研究均喻示了MAPKs、GLUT4、iNOS、TNF-a參與了慢性冬眠心肌的發(fā)生和發(fā)展。 目的：探討慢性冬眠心肌細(xì)胞內(nèi)MAPKs、TNF-a-mRNA、心肌細(xì)胞凋亡、GLUT4、iNOS的變化和意義；探討慢性冬眠心肌細(xì)胞內(nèi)MAPKs與TNF-a-mRNA、心肌細(xì)胞凋亡、GLUT4、iNOS的關(guān)系；探討慢性冬眠心肌細(xì)胞內(nèi)TNF-a-mRNA與心肌細(xì)胞凋亡、GLUT4、iNOS的關(guān)系；初步揭示慢性冬眠心肌形成的分子生物學(xué)機(jī)制。

4、 方法：行CABG(coronary artery bypass graft冠脈搭橋術(shù))的冠心病患者(10例)，術(shù)前一周內(nèi)用DSE(dobutamine stress echocardiography多巴酚丁胺超聲負(fù)荷試驗)結(jié)合DTI(doppler tissue image多普勒組織成像)確定冬眠心肌及正常心肌的存在部位，CABG術(shù)中根據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行取材(分別取正常心肌和冬日民心肌)，并經(jīng)電鏡證實。取材心肌用免疫組化法(Tunel

5、)檢測心肌細(xì)胞凋亡情況，用免疫印跡法(Western-blot)檢測磷酸化的ERK、C-JUN、P38及iNOS、GLUT4的表達(dá)情況，原位雜交法(ISH)測定TNF-a-mRNA的活性。并用統(tǒng)計軟件SPSSl2.0分析慢性冬眠心肌與正常心肌磷酸化ERK、C-JUN、P38及TNF-a-mRNA、心肌細(xì)胞凋亡數(shù)、iNOS、GLUT4是否存在差異；分析磷酸化的ERK、C-JUN、P38與TNF-a-mRNA、心肌細(xì)胞凋亡、iNOS、GLU

6、T4的相關(guān)性；分析TNF-a-mRNA與心肌細(xì)胞凋亡、iNOS、GLUT4的相關(guān)性。 結(jié)果： 1.慢性冬眠心肌細(xì)胞內(nèi)磷酸化ERK、C-JUN、P38水平較正常心肌高； 2.慢性冬眠心肌細(xì)胞凋亡數(shù)及TNF-a-mRNA、GLUT4、iNOS的表達(dá)較正常細(xì)胞高； 3.慢性冬眠心肌細(xì)胞內(nèi)P-ERK與GLUT4相關(guān)(P<0.05)相關(guān)系數(shù)r為0.665；P-C-JUN與TNF-Q-mRNA、慢性冬眠心肌細(xì)胞凋亡

7、數(shù)、GLUT4相關(guān)(P<0.05)相關(guān)系數(shù)r分別為0.816、0.711、0.801；P-P38與TNF-Q-mRNA、慢性冬眠心肌細(xì)胞凋亡數(shù)、GLUT4、iNOS相關(guān)(P<0.05)相關(guān)系數(shù)r分別為0.849、0.637、0.708、0.676；TNF-a-mRNA與慢性冬眠心肌細(xì)胞凋亡數(shù)、iNOS相關(guān)(P<0.05)相關(guān)系數(shù)r分別為0.816、0.657。 結(jié)論： 1.心肌缺血缺氧時，心肌細(xì)胞內(nèi)TNF-α分泌增加。