肝癌微波治療后殘留腫瘤生物學(xué)特性的變化及對(duì)機(jī)體的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究來(lái)探索肝臟腫瘤微波治療后的殘留腫瘤的生物學(xué)特性的變化規(guī)律，借此評(píng)價(jià)非完全性微波治療的效果，并為治療后的復(fù)查和再次治療時(shí)機(jī)提供科學(xué)依據(jù)。 材料和方法：選取100只昆明小鼠，并參照文獻(xiàn)方法選用H22肝癌細(xì)胞株建立原位肝腫瘤移植的小鼠動(dòng)物模型(接種10天后肝表面腫瘤大小平均為1cm左右)。對(duì)小鼠隨機(jī)編號(hào)，第一組小鼠(1～20號(hào))，再分為A、B兩組：A組(1～10號(hào))作為微波治療前小鼠自然生存時(shí)間及肺臟轉(zhuǎn)移對(duì)照組；

2、B組(11～20號(hào))作為微波治療前腫瘤內(nèi)增殖細(xì)胞核抗體(Proliferatingcellnuclearantigen，PCNA)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(Matrixmetalloproteinase9，MMP-9)的表達(dá)情況研究組。第二組(21～100號(hào))，再分為A、B、C、D四組，每組20只小鼠，前三組分別于微波治療后第5、10、15天處死，觀察腫瘤肺臟轉(zhuǎn)移情況及殘留腫瘤內(nèi)PCNA、MMP-9的表達(dá)情況，D組觀察小鼠微波治療后生存時(shí)間及

3、肺臟轉(zhuǎn)移情況研究。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(1)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，PCNA陽(yáng)性表達(dá)部位為細(xì)胞核內(nèi)，陽(yáng)性細(xì)胞的染色強(qiáng)度在不同的細(xì)胞以及不同組內(nèi)無(wú)明顯差別，但陽(yáng)性指數(shù)在各組間則有差別。對(duì)照組PCNA陽(yáng)性表達(dá)較高，PCNA在微波治療后5天時(shí)陽(yáng)性表達(dá)比對(duì)照組均明顯降低，第10天又逐漸回升，PCNA至第15天接近對(duì)照組的水平。微波治療后殘留腫瘤細(xì)胞在第5天及第10天時(shí)PCNA陽(yáng)性指數(shù)均比對(duì)照組明顯降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異顯著(P＜0.01)，

4、第15天時(shí)PCNA陽(yáng)性指數(shù)與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P＞0.05)。(2)免疫組化染色結(jié)果顯示，MMP-9陽(yáng)性表達(dá)部位主要在細(xì)胞周?chē)幕|(zhì)中，而細(xì)胞漿中的分布較少，對(duì)照組腫瘤組織MMP-9陽(yáng)性表達(dá)較多，而治療后第5、10天時(shí)殘留腫瘤組織內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)均明顯減少，第15天時(shí)陽(yáng)性表達(dá)又明顯增多。治療后第5天及第10天時(shí)殘留腫瘤組織內(nèi)的MMP-9含量均明顯低于對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異顯著(P＜0.01)；第15天時(shí)與對(duì)照組相比，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理無(wú)明顯差異

5、(P＞0.05)。(3)微波治療前后小鼠自然生存時(shí)間及臟器轉(zhuǎn)移情況：第一組小鼠接種H22肝癌細(xì)胞后，自然生存時(shí)間平均為21天，第二組D組，小鼠肝臟成功接種H22肝癌細(xì)胞株后，于第10天行微波治療后，自然生存時(shí)間平均為33天，平均延長(zhǎng)57％。與未進(jìn)行微波治療組相比有明顯差異(P＜0.01)。分時(shí)段處死實(shí)驗(yàn)小鼠后，進(jìn)行解剖，用放大鏡觀察肺臟和腹腔臟器表面的轉(zhuǎn)移癌灶，以此來(lái)了解腫瘤的轉(zhuǎn)移情況，在肝臟成功接種腫瘤后，在第15和20天時(shí)，經(jīng)微波治

6、療組和未經(jīng)微波治療組，在腹腔臟器和肺臟表面轉(zhuǎn)移率存在明顯差異(P＜0.01)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)對(duì)微波治療后殘留腫瘤細(xì)胞的增殖活性、侵襲能力的變化情況進(jìn)行研究表明：微波治療后由于微波對(duì)殘留腫瘤細(xì)胞的損傷性抑制和局部免疫力增強(qiáng)等因素，殘留腫瘤細(xì)胞的增殖活性和侵襲力短期內(nèi)可受到一定程度的抑制。腫瘤的增長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)移能力降低。此外，從病理切片中發(fā)現(xiàn)微波治療后殘留組織中有較多的纖維組織，從而提示微波治療后局部形成大量纖維組織也是限制腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移的重要

7、因素之一。從治療前后的病理切片對(duì)比觀察可見(jiàn)腫瘤細(xì)胞從數(shù)量和形態(tài)等方面表明的分化程度得到一定程度的改善。因此，微波治療即使是殘留了部分腫瘤細(xì)胞，由于以上因素也可以延長(zhǎng)機(jī)體的帶瘤生存期。但是，這種生物特性的變化只為暫時(shí)性，隨著微波治療時(shí)間的延長(zhǎng)，其增殖和轉(zhuǎn)移能力又恢復(fù)到治療前水平。鑒于此現(xiàn)象，本實(shí)驗(yàn)提示對(duì)于微波治療后的患者，應(yīng)在一周內(nèi)復(fù)查，如果發(fā)現(xiàn)有腫瘤殘留或因腫瘤太大等因素使微波治療無(wú)法一次全部固化的患者，再次治療的時(shí)間應(yīng)該在十天內(nèi)完成。