牛骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體IB基因（BMPR-IB）cDNA的克隆及序列分析.pdf

1、本研究從影響牛的繁殖性能的BMPR-IB基因出發(fā)，利用Genbank中其它物種的序列信息，通過(guò)序列比對(duì)、分析和RT-PCR方法，對(duì)尚未報(bào)道的牛BMPR-IB基因序列進(jìn)行擴(kuò)增、克隆測(cè)序、及序列分析。 方法：1、在Gerabank中查找人、小鼠和羊的BMPR-IB基因序列，運(yùn)用DNAStar軟件對(duì)這些序列進(jìn)行同源性分析。依據(jù)同源性較高區(qū)域設(shè)計(jì)引物。首先提取牛卵巢組織中的總RNA，采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增牛BMPR-IB的部分eDNA

2、序列，將此片段重組到PMD18-T載體中，雙酶切和PCR鑒定后測(cè)序，獲得長(zhǎng)為953bp的牛BMPR-IB部分cDNA序列，克隆片段編碼297個(gè)氨基酸。2、克隆后序列與Genbank公布其它物種包括綿羊、山羊、人、猴子、黑猩猩、家鼠、挪威鼠、豬、袋鼠、狗和雞的核苷酸序列同源比對(duì)，發(fā)現(xiàn)它們的同源性分別為98％、97.6％、91.9％、91.7％、92.1％、87.9％、87.3％、92.9％、86.8％、91.6％、83.9％，證實(shí)克隆的序