孕酮受體基因及骨形態(tài)發(fā)生蛋白4基因與山羊高繁殖力關(guān)系的研究.pdf

1、本論文以孕酮受體(progesterone receptor，PGR)基因及骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(bonemorphogenetic protein4，BMP4)基因為研究對象，利用PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCRSingle-Strand Conformation Polymorphism，PCR-SSCP)分析、基因克隆等技術(shù)研究這些基因在高繁殖力山羊羊品種、中等繁殖力山羊羊品種以及低繁殖力山羊羊品種遺傳變異及其對山羊繁殖性能的影響。

2、>　　 根據(jù)牛的孕酮受體基因設(shè)計15對引物覆蓋該基因全部9個外顯子，檢測PGR基因在高繁殖力山羊品種(濟(jì)寧青山羊)、中等繁殖力品種(波爾山羊)和低繁殖力品種(內(nèi)蒙古絨山羊和安哥拉山羊)單核苷酸多態(tài)性，同時研究該基因?qū)ι窖蚍敝沉Φ挠绊憽y序結(jié)果表明引物P1、P8與P9擴(kuò)增片段具有多態(tài)性。對于P1擴(kuò)增片段，在濟(jì)寧青山羊中檢測到AA、AB和BB型，在其余山羊中均檢測到山和AB型；測序表明BB與AA型相比有一處突變(31G→A)，并導(dǎo)致丙氨酸

3、改變?yōu)樘K氨酸；BB基因型濟(jì)寧青山羊產(chǎn)羔數(shù)最小二乘均值比AB基因型的多0.52只(P＜0.05)，比AA基因型的多0.98只(P＜0.001)，AB基因型濟(jì)寧青山羊產(chǎn)羔數(shù)最小二乘均值比AA基因型的多0.46只(P＜0.05)。對于P8擴(kuò)增片段，在濟(jì)寧青山羊中只檢測到CC型，在波爾山羊中檢測到CC和CD型，在其余山羊中檢測到CC、CD和DD型，；測序表明DD型和CC型相比有一處突變(2810C→G)，未導(dǎo)致氨基酸改變。對于P9擴(kuò)增片段，在濟(jì)

4、寧青山羊和波爾山羊中檢測到FF和FG型，在其余山羊中檢測到FF、FG和GG型；測序表明GG型和FF型相比有一處堿基突變(60128T→A)，也未導(dǎo)致氨基酸改變；FF基因型濟(jì)寧青山羊產(chǎn)羔數(shù)最小二乘均值比FG基因型的多0.32只(P＞0.05)。研究結(jié)果初步表明PGR基因可能是控制濟(jì)寧青山羊多羔性的一個主效基因或是與之存在緊密遺傳連鎖的一個標(biāo)記。
　　 根據(jù)山羊骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(bone morphogenetic protein4

5、，BMP4)基因外顯子2、內(nèi)含子2序列設(shè)計2對引物，檢測其在4個山羊品種中的單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果表明BMP4基因外顯子2在4個山羊品種中都沒有多態(tài)性；內(nèi)含子2，在波爾山羊中只檢測到EE型，在安哥拉山羊中檢測到EH、HH型，在其余2個山羊品種中都檢測到EE、EH、HH型；測序表明HH型與EE型相比在2203 bp處發(fā)生G→A的單堿基突變；EE、EH和EH型濟(jì)寧青山羊產(chǎn)羔數(shù)差異均不顯著(P＞0.05)。研究結(jié)果表明BMP4基因內(nèi)含子2的突變