N-cadherin、E-cadherin和p63在宮頸癌中的表達及相關(guān)性.pdf

1、研究背景:
　　宮頸癌(Cervicalcancer)是嚴重威脅女性健康的惡性腫瘤之一,其病因尚不明確,目前認為與早婚、性生活過早及混亂、早年分娩、多產(chǎn)、吸煙、經(jīng)濟情況差、地理環(huán)境、病毒感染等因素有關(guān),其中最主要的因素是高危型人乳頭瘤病毒(highrisk-humanpa pilloma virus,HR-HPV)的慢性持續(xù)性感染,但具體分子機制尚未完全闡釋清楚。近年來,由于人們健康意識的上升,針對子宮頸鱗癌癌前病變的普查較以往更

2、加普及,子宮頸鱗癌的發(fā)生率較以往有下降趨勢,但在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)越來越多的年輕女性被診斷患有子宮頸鱗癌,所以對子宮頸鱗癌的研究應(yīng)該更加受到關(guān)注。一般來說,宮頸癌出現(xiàn)典型癥狀兩到三個月后,大部分患者就己發(fā)展為癌癥晚期。對于宮頸癌來說,早期診斷,是宮頸癌的治療和預(yù)后取得良好效果的重要條件。
　　近些年來對宮頸癌的基礎(chǔ)研究進展很快,我們了解到宮頸癌的發(fā)病過程比較復(fù)雜,是關(guān)系到多種原因和多種基因共同參與的復(fù)雜過程,同時,有許多新的觀點在研究過程

3、中被提了出來。
　　上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),是指上皮細胞在特定的生理和病理情況下向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化的現(xiàn)象,目前EMT被看成導(dǎo)致腫瘤進展的病理過程,與侵襲和轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系。在EMT的過程中,細胞之間的粘附減少,上皮細胞極性喪失,與周圍基質(zhì)細胞的接觸減少,細胞遷移和運動能力增強,同時細胞表型發(fā)生改變,喪失上皮表型,如角蛋白絲,E-鈣粘蛋白(E-cadherin),

4、而獲得間質(zhì)表型,如波形蛋白(Vimentin),纖維連接蛋白,N-鈣粘蛋白(N-cadherin)等。研究發(fā)現(xiàn),在某些上皮性癌如口腔鱗狀上皮癌、泌尿上皮腫瘤、胰腺癌中有上皮性鈣粘蛋白(E-cadherin)低表達或失表達,而神經(jīng)性鈣粘蛋白(N-cadherin)異常表達,同時增強了癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力;在這些上皮癌中可能存在E-cadherin向N-cadherin轉(zhuǎn)化,并認為這是EMT的一個重要機制。此鈣粘蛋白轉(zhuǎn)化增加了癌細胞的侵襲

5、轉(zhuǎn)移性,也為腫瘤的治療提供了新的靶點和策略。
　　EMT過程中,一個重要分子事件是鈣粘蛋白表達的異常,其中E-cadherin和N-cadherin是與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的兩種鈣粘蛋白類型,但二者在腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移中的作用卻相反。E-cadherin促進細胞的粘附聚集、維持上皮形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性,對維持細胞極性和參與分化調(diào)節(jié)也至關(guān)重要。N-cadherin在上皮組織中的異位表達可以影響上皮細胞的形態(tài)和行為,誘導(dǎo)其向間質(zhì)轉(zhuǎn)化,即產(chǎn)生EMT。

6、
　　p63是近年發(fā)現(xiàn)的p53家族的成員之一,p63在各種上皮組織的發(fā)育、分化和形態(tài)的發(fā)生上都起著重要的作用,對于胚胎形成過程中外胚層的發(fā)育有著重要的意義。目前研究認為p63的功能如下:①調(diào)控組織發(fā)育:研究發(fā)現(xiàn),p63與p53基因的顯著不同之處是p53基因的突變誘導(dǎo)腫瘤形成;而p63基因的突變則導(dǎo)致先天性發(fā)育障礙疾病:四肢發(fā)育畸形、外胚層發(fā)育不良等。②抑制腫瘤轉(zhuǎn)移:一方面,p63與Smad蛋白形成復(fù)合物,抑制TGF-β誘導(dǎo)的腫瘤細

7、胞轉(zhuǎn)移作用,而另一方面,p63表達的丟失可以導(dǎo)致細胞遷移能力增強。③調(diào)控上皮細胞分化:鱗狀上皮組織是由基底細胞向表層推移、分化成其他各層細胞的,主要由基底膜、基底細胞、副基底細胞、中層細胞、表層角化細胞組成。其中,基底細胞又稱為儲備細胞、子宮頸干細胞,兼?zhèn)湎蝼[狀細胞分化、不斷增殖的潛能。而p63則是誘導(dǎo)基底細胞分化的重要調(diào)控基因之一。④其他作用:p63還在細胞凋亡、細胞周期、細胞增殖等方面起著一定的調(diào)控作用。
　　EMT的重要相關(guān)

8、基因snail、slug可以調(diào)控p63蛋白的表達,而研究也發(fā)現(xiàn),腫瘤細胞中p63的表達與E-cadherin的表達水平呈正相關(guān),E-cadherin的表達降低是腫瘤EMT的一個重要標識,所以,p63很可能參與抑制腫瘤細胞的EMT,即抑制癌變。
　　本研究通過檢測宮頸鱗狀細胞癌中N-cadherin、E-cadherin和p63三者之間的表達以及與宮頸癌臨床相關(guān)因素之間的相關(guān)性,探討EMT過程與宮頸癌發(fā)生發(fā)展以及預(yù)后之間的關(guān)系。

9、r>　　目的：闡明N-cadherin(N-鈣粘附素)、E-cadherin(E-鈣粘附素)和p63在低分化宮頸鱗狀細胞癌,中高分化宮頸鱗狀細胞癌,正常宮頸組織中的表達情況,進而分析這三種蛋白與宮頸鱗狀細胞癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系,并探討宮頸癌患者的年齡、組織分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和五年生存情況對三種蛋白在宮頸鱗狀細胞癌中的表達的影響及其臨床意義。
　　方法：采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法(SP法)對131例宮頸癌組織及3

10、0例正常宮頸組織標本做N-cadherin、E-cadherin和p63標記,采用半定量積分法判定陽性結(jié)果。E-cadherin、N-cadherin和p63表達與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系采用χ2檢驗分析;E-cadherin、N-cadherin和p63采用χ2檢驗相關(guān)性進行相關(guān)分析;采用Kaplan-Meier法評估各基因表達對生存率影響,對生存率曲線的比較采用Log-rank法進行顯著性檢驗。
　　結(jié)果：
　　(1)N-

11、cadherin在正常宮頸組織中不表達,在高分化宮頸癌中的強陽性表達率為25％(5/20),中分化宮頸癌中的強陽性表達率為9.7%(6/62),低分化宮頸癌中的強陽性表達率為38.8%(19/49)。并且N-cadherin在低分化宮頸鱗狀細胞癌中的表達明顯高于正常宮頸組織和中高分化宮頸鱗狀細胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(2)E-cadherin在正常宮頸組織中呈強陽性表達,在高分化宮頸癌中的強陽性表達率為75%(

12、15/20),中分化宮頸癌中的強陽性表達率為38.7%(24/62),低分化宮頸癌中的強陽性表達率為0(0/49),E-cadherin在高分化宮頸鱗狀細胞癌中的表達明顯高于低分化和中分化宮頸鱗狀細胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(3)p63在正常宮頸組織中呈強陽性表達,在高分化宮頸癌中的強陽性表達率100%(20/20),中分化宮頸癌中的強陽性表達率30.6%(19/62),低分化宮頸癌中的強陽性表達率2.0%(1/

13、49),p63在高分化宮頸鱗狀細胞癌中的表達明顯高于低分化和中分化宮頸鱗狀細胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(4)N-cadherin、E-cadherin和p63的陽性表達率均與宮頸癌的組織分化、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)(P<0.05),而均與年齡無關(guān)(P>0.05)。
　　(5)N-cadherin強陽性表達患者生存期明顯低于陰性表達者,E-cadherin、p63陰性表達患者生存期明顯低于強