雙氯芬酸鈉絲素蛋白-殼聚糖緩釋微球的研究.pdf

1、目的：本文利用絲素蛋白特殊孔性結(jié)構(gòu)以及殼聚糖優(yōu)良成型性的特性，選用非甾體抗炎藥雙氯芬酸鈉(Diclofenac Sodium，DS)作為模型藥物，以絲素蛋白(SilkFibroin，SF)和天然材料殼聚糖(Chitosan，CS)制備雙氯芬酸鈉絲素蛋白/殼聚糖緩釋微球(DS-SF/CS-MS)，通過兩者之間的鍵合作用形成復(fù)合體，利用微球溶脹特性，增強藥物在體內(nèi)的作用時間，減少DS對胃腸道的刺激，降低毒副作用，延長作用時間，提高其順應(yīng)性。

2、 方法：(1)建立雙氯芬酸鈉HPLC體外分析方法，同時測定藥物的平衡溶解度、解離常數(shù)、表觀油水分配系數(shù)等基本理化性質(zhì)；(2)通過比較產(chǎn)率，確定絲素蛋白的提取工藝；(3)采用乳化-化學(xué)交聯(lián)固化法制備DS-SF/CS-MS，正交試驗設(shè)計優(yōu)化處方工藝；(4)采用掃描電鏡、粉末X射線衍射、差示掃描量熱(DSC)等方法和技術(shù)，對DS-SF/CS-MS的表面特征、外觀形態(tài)、粉體學(xué)性質(zhì)進行考察，另外動態(tài)透析法研究了微球的體外釋放特性；(5)將

3、DS-SF/CS-MS作為口服制劑，通過大鼠灌胃給藥，研究藥物制劑的體內(nèi)動力學(xué)特征。 結(jié)果：(1)確定雙氯芬酸鈉體外HPLC分析條件為：ODS2-C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱；流動相為甲醇:1.5％醋酸溶液(78:22)；流速1.0ml·min-1；檢測波長276nm；柱溫30℃；進樣量10μl。藥物的平衡溶解度隨著介質(zhì)pH值的升高而有增大的趨勢，其pKa為4.2183；(2)確定Na2CO3法脫去絲膠蛋白，C

4、aCl2-H2O-C2H5OH三元溶劑法降解絲素蛋白，制得再生絲素蛋白溶液；(3)以包封率、載藥量(權(quán)重各占50％)為評價指標(biāo)，通過正交設(shè)計得到最佳的處方制備條件為：乳化劑司盤比例0.010g/ml，殼聚糖濃度為4.5％，醋酸濃度為4％，戊二醛含量為0.025g/ml。實驗證實，在此條件下得到的處方平均包封率為55.46％，載藥量為10.78％，RSD分別為1.78％，1.39％(n=5)：(4)掃描電鏡照片顯示微球近似球形、邊緣清晰，

5、微球平均粒徑為(26.54±1.39)μm，且大小在20-30μm內(nèi)的微球占總數(shù)的81.47％；DS-SF/CS-MS的X衍射、DSC圖譜中，DS、SF以及CS的特征吸收峰均發(fā)生消失或轉(zhuǎn)移；粉體學(xué)性質(zhì)考察結(jié)果符合要求，流動性較好；載藥微球體外釋放符合Higuichi方程，載藥微球釋放時間可以持續(xù)200h；(5)大鼠體內(nèi)的雙氯芬酸鈉血藥濃度經(jīng)時曲線符合一室模型，DS-SF/CS-MS的MRT與t1/2明顯延長，其相對生物利用度為溶液劑的1