IMP3在人類乳腺癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、研究背景:
　　 乳腺癌是當(dāng)今世界嚴(yán)重威脅女性健康的惡性腫瘤之一。近年來，我國婦女乳腺癌的發(fā)病率以3％的年增長速度逐年遞增，且發(fā)病年齡趨向年輕化。乳腺癌的主要死因是發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，然而其轉(zhuǎn)移潛在性通常難以預(yù)測到。研究表明乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展是多步驟、多基因作用的結(jié)果，與細(xì)胞生長周期調(diào)節(jié)失衡、信號傳導(dǎo)系統(tǒng)紊亂、癌基因和抑癌基因表達(dá)異常等共同作用有關(guān)。但是，關(guān)于乳腺癌的發(fā)病原因和機(jī)制仍未完全闡明，在對乳腺癌的診斷評估及治療方面依舊存在許

2、多問題，所以，篩選有助于乳腺癌診斷、預(yù)后判斷及治療的最佳指征尤為重要。
　　 胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor-Ⅱ mRNA-bindingprotein3，IMP3)，也稱為L523S或KOC(K-homologous domain containing proteinoverexpressed in cancer)，是一個新發(fā)現(xiàn)的癌胚mRNA結(jié)合蛋白，與胰島素樣生長

3、因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的轉(zhuǎn)錄物(IGF-Ⅱ leader3 mRNA)結(jié)合。IMP3與IMP1、IMP2同屬于IMP家族，與IGF-Ⅱ的不同轉(zhuǎn)錄物結(jié)合，在胚胎形成的早期階段中，對RNA的運(yùn)輸、穩(wěn)定、細(xì)胞增殖和遷移具有重要作用。IMP3基因定位于染色體7P11.5，高度表達(dá)于胚胎早期階段中發(fā)育的上皮、肌肉、胎盤組織，而在成體良性組織中很少表達(dá)，在許多惡性腫瘤中呈高度表達(dá)，通過促進(jìn)IGF-Ⅱ的翻譯進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增生，發(fā)揮其致癌作用。因此，I

4、MP3是多種腫瘤的一個特異性標(biāo)記物及轉(zhuǎn)移、預(yù)后等預(yù)測指標(biāo)，檢測IMP3的表達(dá)有助于腫瘤的篩查、早期診斷、轉(zhuǎn)移和預(yù)后判定及靶向治療。初步研究已發(fā)現(xiàn)IGF-Ⅱ在乳腺癌組織中呈高度表達(dá)，但是關(guān)于IGF-Ⅱ的翻譯調(diào)控子——IMP3在乳腺癌中的表達(dá)及其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系的研究甚少，所以，研究乳腺癌組織中IMP3的表達(dá)及意義有望為乳腺癌的診斷，轉(zhuǎn)移及預(yù)后判定，靶向治療提供一個新的分子生物學(xué)標(biāo)記物。
　　 目的:
　　 檢測IMP

5、3在人類乳腺癌組織中的蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)水平，并分析IMP3表達(dá)與乳腺癌臨床病理等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系及乳腺癌組織中IMP3蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平的相關(guān)性，探討IMP3表達(dá)是否可以作為乳腺癌診斷、轉(zhuǎn)移及預(yù)后預(yù)測、治療靶點(diǎn)的分子生物學(xué)指標(biāo)。
　　 方法:
　　 采用免疫組化S-P方法檢測30例人類乳腺良性病變、276例原發(fā)性乳腺癌及46例乳腺癌轉(zhuǎn)移灶的石蠟組織中IMP3蛋白的表達(dá)，并統(tǒng)計分析IMP3蛋白表達(dá)與乳腺癌臨

6、床病理等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系。
　　 用Trizol對4例乳腺良性腫瘤和16例乳腺癌患者的的新鮮腫瘤組織提取總RNA后，將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再用基于SYBR GreenⅠ的實(shí)時熒光定量PCR方法進(jìn)行IMP3 mRNA表達(dá)量和內(nèi)參18s rRNA表達(dá)量的檢測，擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性通過溶解曲線確定，采用2-△△CT法計算IMP3 mRNA的相對表達(dá)量，統(tǒng)計分析IMP3 mRNA表達(dá)水平與乳腺癌臨床病理等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系。采用免疫組化S-

7、P法檢測16例新鮮乳腺癌的石蠟包埋組織中IMP3的蛋白表達(dá)水平，并統(tǒng)計分析與相應(yīng)mRNA表達(dá)水平的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 30例乳腺良性病變組與276例原發(fā)性乳腺癌組中IMP3蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異(x2=9.07，P=0.00)。46例乳腺癌轉(zhuǎn)移灶組與276例原發(fā)性乳腺癌組中IMP3蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異(x2=4.98，P=0.03)。發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的原發(fā)性乳腺癌組與未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的原發(fā)性乳腺癌組中I

8、MP3蛋白陽性表達(dá)率無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=2.12，P=0.15)。IMP3蛋白陽性表達(dá)與乳腺癌的pTNM分期、組織學(xué)分級、腫塊大小、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性(x2=12.58，r=0.21，P=0.00；x2=11.70，r=0.20，P=0.00；x2=7.70，r=0.17，P=0.02；x2=9.62，r=.18，P=0.00)；與ER和PR表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(x2=6.95，r=0.16，P=0.03)；與患者年齡、Her-2表達(dá)、三陰

9、性乳腺癌無相關(guān)性(x2-0.18，r=0.03，P=0.91；x2=0.64，r=0.05，P=0.42；x2=0.01，r=0.01，P=0.91)。
　　 IMP3 mRNA在4例乳腺良性腫瘤組織中的相對表達(dá)量為1.20±0.32，在16例乳腺癌組織中的相對表達(dá)量為1.43±0.22，兩者無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.64)。IMP3mRNA在5例組織學(xué)分級Ⅱ級和5例Ⅲ級的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組中的相對表達(dá)量分別為1.09±0.19和1

10、.46±0.49，兩者無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.92)；IMP3 mRNA在7例腫塊大小≤2cm和3例＞2cm且≤5cm的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組中的相對表達(dá)量分別為1.15±0.28和1.57±0.61，兩者無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.43)。16例乳腺癌組織中的IMP3蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平無相關(guān)性(r=-0.15，P=0.57)。
　　 結(jié)論；
　　 1.IMP3蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)異常增高，且與乳腺癌的臨床病理指標(biāo)相

11、關(guān)，提示其在乳腺癌的生長、預(yù)后過程中可能具有重要作用。
　　 2.IMP3蛋白可能對腫瘤的轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用，有助于作出乳腺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的判斷。
　　 3.實(shí)時熒光定量RT-PCR方法是一種敏感性、特異性的檢測和定量乳腺癌組織中IMP3 mRNA表達(dá)量的方法。
　　 4.IMP3 mRNA在乳腺癌組織中的表達(dá)量可能異常增高，對乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展可能具有重要作用，有可能作為乳腺癌的一個潛在治療靶點(diǎn)。
　　 5.乳