IMP3在肺腺癌中的表達(dá)與臨床預(yù)后的相關(guān)性研究及初步機(jī)制探討.pdf

1、肺癌是全球發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，至今發(fā)病率仍在持續(xù)上漲。在衛(wèi)生部最新公布的我國第三次死因調(diào)查中，肺癌居腫瘤死因首位。根據(jù)病理組織學(xué)，肺癌主要可分為小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌兩大類，其中非小細(xì)胞肺癌又可以分為鱗癌、腺癌和大細(xì)胞癌。近年來，肺腺癌的發(fā)病率呈逐漸增高趨勢，已躍居肺癌四大類型之首，且其異質(zhì)性強(qiáng)，死亡率較高，對其發(fā)病機(jī)制的研究也顯得十分亟需。本研究首先就2011年肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學(xué)科分類中，浸潤性肺腺癌

2、的五種主要組織學(xué)亞型在臨床病理學(xué)上的意義及預(yù)后的差異進(jìn)行探討，再研究近年來備受關(guān)注的IMP3蛋白在肺腺癌中的的表達(dá)及與患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)性，并對IMP3影響肺腺癌侵襲能力的機(jī)制做初步探究。本研究共分以下三個(gè)部分:
　　第一部分肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學(xué)科分類與預(yù)后的關(guān)聯(lián)分析
　　目的:肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學(xué)科分類新標(biāo)準(zhǔn)較以往的分類有了較大的改變，其臨床病理學(xué)意義和對預(yù)后的指導(dǎo)作用有待于更多的研究證

3、實(shí)。本研究通過探討五種主要的浸潤性肺腺癌組織學(xué)亞型在臨床病理學(xué)中的意義及對患者預(yù)后的影響，旨在為組織學(xué)亞型的臨床應(yīng)用意義提供更多證據(jù)。
　　材料與方法:收集196例本院浸潤性肺腺癌手術(shù)患者的臨床病理資料，對其術(shù)后H&E切片進(jìn)行復(fù)片，使用IASLC/ATS/ERS國際多學(xué)科分類新標(biāo)準(zhǔn)對其組織學(xué)亞型進(jìn)行判別，并將組織學(xué)亞型與各臨床病理參數(shù)進(jìn)行分層分析;篩選術(shù)后隨訪滿18個(gè)月以上的共96例患者，分析肺腺癌組織學(xué)亞型與患者預(yù)后的關(guān)系。

4、r>　　結(jié)果:浸潤性肺腺癌的五種主要組織學(xué)亞型在腫瘤分化程度(P＜0.0001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.015)、原發(fā)腫瘤狀態(tài)(P=0.004)及pTNM分期(P=0.001)等臨床病理指標(biāo)中均具有總體統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。兩兩比較表明，貼壁亞型在這幾種臨床病理指標(biāo)中均與其他四種亞型存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示其主要分布在早期、腫瘤分化較好且無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺腺癌病例中。生存分析顯示，與非實(shí)體亞型相比，組織學(xué)亞型為實(shí)體亞型的患者術(shù)后無病生存期及總生存期均較短

5、，且多因素分析證實(shí)，實(shí)體亞型為患者預(yù)后差的一項(xiàng)獨(dú)立影響因素，在無病生存時(shí)間中，其風(fēng)險(xiǎn)比為1.220(95％CI，1.053-1.414; P=0.008);在總生存時(shí)間中，風(fēng)險(xiǎn)比為1.224(95％ CI，1.011-1.482; P=0.038)。
　　結(jié)論:肺腺癌IASLC/ATS/ERS國際多學(xué)科分類中的五種浸潤性腺癌亞型在多種臨床病理參數(shù)間及患者預(yù)后中均存在差異，且實(shí)體亞型可作為肺腺癌患者預(yù)后差的一項(xiàng)獨(dú)立影響因素，證實(shí)了國

6、際多學(xué)科分類在異質(zhì)性較強(qiáng)的肺腺癌中的臨床意義，且為臨床判斷肺腺癌患者的預(yù)后提供了一定的理論依據(jù)。
　　第二部分 IMP3在肺腺癌中的表達(dá)與臨床預(yù)后的相關(guān)性研究
　　目的:IMP3蛋白的過表達(dá)被認(rèn)為與惡性腫瘤的組織學(xué)高級別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后差相關(guān)，但這一研究結(jié)果尚未在肺腺癌中被深入探討。本實(shí)驗(yàn)通過檢測IMP3蛋白在肺腺癌中的表達(dá)，及其與臨床病理參數(shù)、患者預(yù)后的相關(guān)性研究，為IMP3在肺腺癌中的作用提供一定的研究思路。

7、　　材料與方法:使用第一部分的篩選的肺腺癌術(shù)后病例，利用免疫組織化學(xué)染色的方法對其進(jìn)行IMP3蛋白表達(dá)的檢測，IMP3蛋白表達(dá)的結(jié)果分為高（中度陽性/強(qiáng)陽性）、低（陰性/弱陽性）兩組，將其與各臨床病理參數(shù)進(jìn)行分層分析，并將前一部分研究的IASLC/ATS/ERS組織學(xué)亞型新分類也納入比較，同時(shí)用生存分析研究IMP3蛋白表達(dá)與患者預(yù)后間的關(guān)系。
　　結(jié)果:IMP3蛋白的表達(dá)高低在腫瘤分化程度、組織學(xué)亞型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、pTNM分期等臨

8、床病理參數(shù)間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均＜0.0001)，在年齡、性別、原發(fā)腫瘤狀態(tài)中的表達(dá)差異則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。單因素生存分析顯示，IMP3蛋白高表達(dá)與患者術(shù)后無病生存期及總生存期較短有關(guān)(P＜0.05)，但多因素分析尚不能支持其作為獨(dú)立預(yù)后因素。
　　結(jié)論:IMP3蛋白的高表達(dá)更常見于腫瘤組織分化差、實(shí)體亞型、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、pTNM分期晚的患者中，顯示其與肺腺癌的侵襲性增加有關(guān)。生存分析證實(shí)其表達(dá)高低與肺腺癌患者預(yù)后有關(guān)聯(lián)，但作為獨(dú)

9、立預(yù)后因素證據(jù)尚不足，提示IMP3蛋白或可作為預(yù)測肺腺癌侵襲性及患者預(yù)后的一項(xiàng)綜合評判指標(biāo)。
　　第三部分 IMP3促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞侵襲能力的初步機(jī)制探討
　　目的:本課題的第二部分結(jié)果提示IMP3高表達(dá)與肺腺癌的侵襲性增加相關(guān)，但其如何促進(jìn)肺腺癌侵襲的機(jī)制尚不清楚。本課題的第三部分主要研究IMP3基因?qū)Ψ蜗侔┘?xì)胞遷移能力的影響及其與上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，EMT)間的

10、關(guān)系，初步探討潛在的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　材料與方法:篩選IMP3表達(dá)水平不同的肺腺癌細(xì)胞株，利用siRNA和過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染肺腺癌細(xì)胞，改變IMP3蛋白表達(dá)的水平。利用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染后肺腺癌細(xì)胞遷移能力的變化，并用Western blot檢測IMP3蛋白與EMT相關(guān)標(biāo)記物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的變化趨勢。
　　結(jié)果:IMP3蛋白高表達(dá)的細(xì)胞株中，上皮細(xì)胞標(biāo)記物E-cadherin表

11、達(dá)較低，間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物N-cadherin、Vimentin的表達(dá)較高;而在IMP3蛋白低表達(dá)的細(xì)胞株中結(jié)果則相反。沉默IMP3基因后，E-cadherin表達(dá)明顯升高，N-cadherin、Vimentin的表達(dá)降低，肺腺癌細(xì)胞遷移能力減弱;過表達(dá)IMP3基因后，E-cadherin表達(dá)降低，N-cadhenn、Vimentin的表達(dá)升高，肺腺癌細(xì)胞遷移能力亦增加。
　　結(jié)論:IMP3表達(dá)水平的變化與間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-cadhe