水通道蛋白-5在機械通氣相關(guān)性肺損傷大鼠肺組織中的表達及相關(guān)機制的研究.pdf

1、目的：建立呼吸機相關(guān)性肺損傷(VILI)大鼠動物模型，研究不同潮氣量機械通氣對肺組織損傷的影響。
　　 方法： SPF級雄性SD大鼠60只，體重200～250g，實驗前12h禁食，自由飲水。10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后，頸部正中切開置入氣管導(dǎo)管，據(jù)潮氣量(VT)不同隨機分成三組(n=20)：正常對照組(A組)氣管切開自主呼吸4h;除對照組外均接小動物呼吸機，小潮氣量組（B組）VT7ml/kg，RR40次/min，

2、通氣4h;大潮氣量組（C組）VT40ml/kg，RR40次/min，通氣4h。4h后腹主動脈放血處死動物，鉗夾左側(cè)主支氣管，收集左側(cè)肺組織，稱濕重后置烤箱80℃干燥至48h恒重，測定肺濕/干重(W/D)。經(jīng)氣管灌入4％多聚甲醛固定右側(cè)肺組織，行HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化。結(jié)果(1)對照組肺組織無明顯病理學(xué)變化，小潮氣量組大鼠肺組織大體標(biāo)本表面無出血點，光學(xué)顯微鏡下肺泡壁完整、稍增厚，肺泡腔無出血、充血，無明顯炎細胞浸潤；大潮氣量組肺組

3、織表面充血及出血明顯，光鏡下肺組織失去正常的結(jié)構(gòu)，肺泡過度擴張，肺泡壁及肺泡腔內(nèi)大量出血及炎細胞浸潤。(2)與A組比較，B組W/D值無明顯變化，C組W/D值升高(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；與B組比較，C組W/D值升高(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論大潮氣量機械通氣導(dǎo)致大鼠肺組織嚴(yán)重損傷，肺組織水腫明顯，通過肺組織病理學(xué)變化及肺組織濕/干重測定表明本實驗設(shè)定大潮氣量機械通氣可建立呼吸機相關(guān)肺損傷大鼠動物模型(VILI)

4、。
　　 目的探討不同潮氣量對機械通氣相關(guān)性肺損傷大鼠肺組織AQP5的基因及蛋白表達的影響。
　　 方法： SPF級雄性SD大鼠60只，體重200～250g，實驗前12h禁食，自由飲水。10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后，頸部正中切開置入氣管導(dǎo)管，據(jù)潮氣量(VT)不同隨機分成三組(n=20)：正常對照組(A組)氣管切開自主呼吸4h;除對照組外均接小動物呼吸機，小潮氣量組（B組）VT7ml/kg，RR40次/mi

5、n，通氣4h;大潮氣量組（C組）VT40ml/kg，RR40次/min，通氣4h。4h后腹主動脈放血處死動物，立即剖胸，取大鼠肺組織保存。采用免疫組化、RT-PCR、Westernblot法測定肺組織中AQP5的基因及蛋白表達，同時進行肺組織病理學(xué)評分。結(jié)果(1)與A組比較，B組AQP5表達無明顯改變，C組AQP5表達降低(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；與B組比較，C組AQP5表達降低(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；(2)C