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文檔簡介
1、目的:
通過建立大潮氣量機械通氣肺損傷模型,觀察小窩蛋白-l(cav-1)及NF-кB p65、IL-8在肺組織中的變化,研究cav-1怎樣影響NF-кB信號轉導通路,進而導致對肺組織產生相應的作用。
方法:
將24只雄性SD大鼠隨機平均分為三組行機械通氣,按通氣時間分為:對照組、大潮氣量通氣0.5小時組(H-VT0.5h組)和大潮氣量通氣2小時組(H-VT2h組)。各組大鼠肺組織病理學改變可以在光學顯微鏡
2、400倍下觀察;cav-1的蛋白含量采用免疫組織化學染色法半定量檢測;NF-кB p65的mRNA表達采用實時熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測;記錄各組肺組織的濕重和干重,計算濕/干重比(W/D);白介素-8(IL-8)的含量采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定。并對cav-1及NF-кB P65進行相關性分析。
結果:
1.肺組織中cav-1的蛋白含量:H-VT2h組大鼠肺組織中cav-1比前兩組
3、明顯升高,包括對照組和H-VT0.5h組,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),H-VT0.5h組的大鼠肺組織中cav-1的蛋白表達水平高于對照組,但差值無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
2.肺組織中NF-кB p65的mRNA表達:H-VT2h組大鼠肺組織NF-кB p65的mRNA表達量明顯高于對照組和H-VT0.5h組,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),H-VT0.5h組的大鼠肺組織NF-кB p65的mRNA表達量高于
4、對照組,但差值無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
3.BALF中IL-8含量結果顯示:H-VT2h組大鼠BALF中的IL-8含量明顯高于對照組和H-VT0.5h組,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),H-VT0.5h組的大鼠BALF中的IL-8含量高于對照組,但差值無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
4.肺組織W/D比值結果顯示:H-VT2h組大鼠肺組織W/D比值明顯高于對照組和H-VT0.5h組,差異有統(tǒng)計學意義(均P
5、<0.05),H-VT0.5h組大鼠肺組織W/D比值大于對照組,差值無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。
5.cav-1與NF-кBp65:相關分析結果:r=0.820,P<0.01,由此可以看出,兩者之間為正相關。
6.肺組織病理學:對照組大鼠結構正常;H-VT0.5h組:肺泡結構相對完整,偶有破裂,肺間隔輕度增厚水腫;H-VT2h組:肺泡結構明顯破壞,肺間隔明顯水腫增厚,肺泡腔可見較多的滲出物,炎性細胞浸潤。
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