黏蛋白基因在人鼻息肉及變應性鼻炎中的表達.pdf

1、目的: 檢測5種黏蛋白基因(MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18、MUC19)在鼻息肉(Nasal Polyps)、變應性鼻炎(Allergic Rhinitis)、正常鼻黏膜患者的表達情況，探討?zhàn)さ鞍自诒窍⑷饧白儜员茄椎谋磉_情況及臨床意義。 方法: 采集35例鼻息肉、25例過敏性鼻炎下鼻甲及20例單純鼻中隔偏曲正常下鼻甲黏膜上皮。所得標本分2份，1份經(jīng)4％多聚甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片后

2、應用免疫組化Elivision染色法檢測鼻息肉和變應性鼻炎患者鼻黏膜中的黏蛋白基因的表達；1份提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以管家基因β-actin為內(nèi)標基因，進行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式擴增(RT-PCR)和實時熒光定量PCR(FQ-RT-PCR)反應，檢測各樣本中的黏蛋白基因(MUCs)的表達水平。 結果: 1.通過免疫組織化學染色，觀察黏蛋白MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18在鼻黏膜組織分布情況，結果顯示四種

3、黏蛋白在鼻息肉及變應性鼻炎患者、正常黏膜組織中均有表達，染色陽性顆粒主要集中在鼻黏膜上皮細胞的胞漿。鼻息肉及變應性鼻炎患者MUC5AC、MUC5B的表達明顯高于正常黏膜組織(P<0.05)，而鼻息肉、變應性鼻炎之間表達差別無意義(P>0.05)。MUC2、MUC18的表達與正常鼻黏膜組織差別無意義(P>0.05)。 2.應用反轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈式擴增(RT-PCR.)法分析鼻息肉及變應性鼻炎患者黏蛋白基因蛋白的表達并分析其與正常黏膜

4、組織的表達的差異。MUC5AC、MUC5B在鼻息肉組和變應性鼻炎組中的表達高于正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組與變應性鼻炎組間表達差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。MUC19在變應性鼻炎組中的表達高于鼻息肉組和正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組和正常對照組間表達差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。MUC2、MUC18在三組中的表達差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 3.成功建立了實時熒光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)

5、的檢測方法，擴增效率高(＞95％)，重復性穩(wěn)定，MUC5AC、MUC5B在鼻息肉組和變應性鼻炎組中的表達高于正常對照組(P＜0.05)，鼻息肉組與變應性鼻炎組間表達差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。MUC2、MUC18在三組中的表達差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 4.不同MUC基因在鼻息肉組、變應性鼻炎組、正常對照組中表達均有差異(P＜0.001)。結果：在鼻息肉、變應性鼻炎及對照組中的黏蛋白分泌成分中，總體趨勢是一致的，M

6、UC5AC表達量最高，MUC5B次之。 結論: 1.MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18、MUC19在鼻黏膜中均有表達，其中MUC5AC、MUC5B表達較高。 2.MUC2、MUC18在鼻息肉、變應性鼻炎和正常對照組中表達無差別。 3.免疫組化、RT-PCR及熒光PCR結果顯示MUC5AC、MUC5B在鼻息肉和變應性鼻炎組中的表達較正常對照組高，MUC5AC、MUC5B在鼻息肉和變應性鼻炎的黏液