變應(yīng)性鼻炎補體及補體調(diào)節(jié)蛋白基因表達、蛋白檢測的實驗研究.pdf

1、變態(tài)反應(yīng)性鼻炎是世界范圍內(nèi)的臨床常見病，屬IgE介導(dǎo)的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)。補體是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，補體在免疫復(fù)合物型變態(tài)反應(yīng)性疾病中所起到的作用已被廣泛所認同，近年的臨床和實驗研究表明，補體活化產(chǎn)物(過敏毒素C3a和C5a)在Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病的病理生理過程中也發(fā)揮了一定作用，其中包括蕁麻疹，過敏性哮喘及變應(yīng)性鼻炎等。正常生理條件下，補體的活化受到補體調(diào)節(jié)因子的調(diào)控。在變應(yīng)性鼻炎中補體究竟通過何種方式激活，補體及補體受體的基因表達有

2、否變化，補體調(diào)節(jié)蛋白是否參與了變應(yīng)性鼻炎的病理過程，尚未見報道。 該文通過研究補體及補體調(diào)節(jié)蛋白在變應(yīng)性鼻炎中表達的變化，探討補體及補體調(diào)節(jié)蛋白在變應(yīng)性鼻炎發(fā)病中的作用，以期進一步揭示變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機制，并為將調(diào)節(jié)補體活化或應(yīng)用補體抑制劑調(diào)控補體活性作為治療變態(tài)反應(yīng)性鼻炎奠定基礎(chǔ)。 目的 研究補體C3、C4及補體調(diào)節(jié)蛋白C1-INH、MCP(CD46)在大鼠變應(yīng)性鼻炎中mRNA表達和翻譯的變化，證實補體及補體調(diào)

3、節(jié)蛋白在變應(yīng)性鼻炎發(fā)病中的作用，以期進一步揭示變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機制。 方法 健康、無鼻疾成年SD大鼠25只，隨機分為2組，一組15只實驗組，另組為對照組10只。實驗組應(yīng)用0.1％卵清蛋白輔以氫氧化鋁佐劑建立變應(yīng)性鼻炎大鼠模型，對照組給予生理鹽水。取大鼠呼吸區(qū)鼻粘膜，采用RT-PCR方法檢測其中補體C3、C4及補體調(diào)節(jié)蛋白CD46的表達情況，并應(yīng)用Western-Blotting方法檢測組織中補體C3、C4及補體調(diào)節(jié)蛋白C

4、1-INH、CD46的蛋白含量，進行對比。 結(jié)果 實驗組及對照組中均有C3、C4表達，變應(yīng)性鼻炎組與正常對照組比較，實驗組C3的mRNA表達水平與對照組相比有有顯著差異(p＜0.05)，即實驗組鼻粘膜補體成分C3表達水平上調(diào),C4的mRNA表達水平兩組間無差異(p＞0.05)，實驗組鼻粘膜補體成分C4表達水平無上調(diào)。CD46在實驗組和對照組也都有表達，兩組表達水平差異顯著(p＜0.05)，實驗組CD46表達水平明顯高于對

5、照組。Western-Blotting結(jié)果顯示試驗組C3較對照組有差異(p＜0.05)，實驗組大鼠鼻粘膜中C3含量高于對照組，C4含量兩組則無明顯差異(p＞0.05)。補體調(diào)節(jié)因子CD46含量兩組間差異顯著(p＜0.01)，試驗組明顯高于對照組，而另一種補體調(diào)節(jié)因子C1-INH則沒有顯著差異。 結(jié)論 變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜C3含量增高，mRNA表達水平上調(diào)，提示補體C3參與變應(yīng)性鼻炎的病理生理過程。補體調(diào)節(jié)蛋白膜輔蛋白MC