水通道蛋白1、4、5在實驗性變應性鼻炎鼻粘膜中的表達和意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:1.成功建立大鼠變應性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)動物模型;2.提供變應性鼻炎模型的鼻粘膜組織形態(tài)學特征;3.確定水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)在大鼠變應性鼻炎時鼻粘膜上的表達情況;4.觀察地塞米松對水通道蛋白在變應性鼻炎時表達的影響;5.探討水通道蛋白與變應性鼻炎時水液分泌的關(guān)系. 方法:健康清潔級SD大鼠48只,體重250~300g,隨機分成空白組(C1),假處理組(C2),模型組(M

2、),干預組(D1,D2),模型組16只,其他每組8只。AR模型建立方法:以卵清蛋白(OVA)經(jīng)全身致敏,5天后強化致敏,自第14天開始以1mg/mloVA,20ul每天滴鼻,直至大鼠打噴嚏,搔鼻,鼻涕的癥狀評分達到標準;干預組則在模型成功的基礎(chǔ)上,予地塞米松(DEX)lmg/kg,肌肉注射,每天一次,分別干預一周、兩周;假處理組則以生理鹽水代替OVA,其余與模型組相同;空白組不作任何處理。用組織化學方法觀察變應性鼻炎的組織形態(tài)學特征,運

3、用免疫組織化學方法(SP法)檢測各組動物鼻粘膜AQPs的表達和變化。并與地塞米松干預后進行比較。本實驗的數(shù)據(jù)應用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理,實驗各組間的顯著性檢驗采用方差分析及重復測量,以P<0.05作為有顯著性差異意義。 結(jié)果:AR模型時鼻分泌物涂片顯示大量中性粒細胞和嗜酸性粒細胞。粘膜中嗜酸性粒細胞在M組明顯增多,經(jīng)DEX作用后減少。形態(tài)學改變:HE染色見正常鼻粘膜上皮為假復層纖毛柱狀上皮和復層扁平上皮,由纖毛

4、柱狀上皮細胞,杯狀細胞、扁平細胞等組成,粘膜下纖維結(jié)締組織很薄,血管數(shù)量很少,無炎性細胞浸潤及血管改變;模型組較C1,C2組粘膜增厚顯著,小血管增生擴張明顯,上皮分泌細胞增多,上皮下大量炎性細胞浸潤,粘膜下腺體數(shù)量明顯增加,腺體擴張;經(jīng)DEX處理后,粘膜厚度逐漸降低,血管擴張及腺體增生及炎性細胞浸潤程度減輕。免疫組化:AQP1,AQP4,AQP5在鼻粘膜中表達豐富,它們以不相互重疊的形式分布。AQPl在粘膜內(nèi)血管內(nèi)皮細胞、血竇內(nèi)皮細胞和

5、成纖維細胞中有較強的表達:AQP4表達于鼻粘膜上皮細胞和上皮內(nèi)腺上皮細胞的基側(cè)膜,且在上皮下層的部分腺上皮細胞中也有豐富的表達;AQP5在上皮下部分腺上皮細胞的腔側(cè)膜成簇表達。AR模型時,AQP1蛋白表達較C1,C2組減少,AQP4的表達較C1,C2組無明顯變化,AQP5蛋白表達增加;經(jīng)DEX干預1周后,AQPl蛋白表達較AR模型時有增加,AQP4及AQP5的表達較AR模型時均有減少;DEX干預2周與干預1周時比較,AQPl蛋白的表達有

6、增加,AQP4的表達并無明顯改變,AQP5蛋白的表達有減少。 結(jié)論:通過OVA多次致敏,局部激發(fā)能夠成功的建立大鼠變應性鼻炎的動物模型。病理形態(tài)學上的改變:變應性鼻炎時,上皮分泌細胞明顯增多,粘膜增厚,炎性細胞浸潤及嗜酸性粒細胞明顯增多,腺體擴張增多,小血管的增加,充血。經(jīng)DEX處理后,粘膜厚度逐漸降低,血管擴張及腺體增生及炎性細胞浸潤程度減輕。免疫組組織化學結(jié)果顯示了:AQP1,4,5在大鼠鼻粘膜上有不重疊表達;變應性鼻炎時,

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