水通道蛋白4、5在卵巢上皮性癌組織中的表達及其意義.pdf

1、背景和目的:
　　 卵巢癌是女性生殖器三大惡性腫瘤之一,發(fā)病率呈上升趨勢,由于卵巢位置較深,發(fā)病隱匿,早期發(fā)病癥狀和體征不明顯,且卵巢癌易于轉移和廣泛播散,75％患者出現(xiàn)癥狀就診時已屬晚期,5年生存率一直徘徊在30％左右,死亡率最高,居婦科惡性腫瘤之首。近年來卵巢癌浸潤轉移的機制已備受關注,因此深入研究卵巢癌浸潤轉移的機制,尋找能抑制轉移的方法將對臨床治療工作有很大的指導作用。
　　 水通道蛋白(Aquaporin,AQ

2、Ps)是一組主要介導水的跨膜轉運的蛋白質,主要包括AQP0～AQP12,能顯著增加細胞膜對水的通透性,主要參與調節(jié)水分子及其他小分子的分泌、吸收及細胞膜的穩(wěn)定性。AQP是一種糖蛋白,分子質量約30ku左右。根據其對水和其他溶質的通透性差異,AQPs可分為兩個亞族:其中AQP3、AOP7、AQP9、AQP10為一亞族,其余者為另一亞族。前者對水具有相對選擇的通透性,即除轉運水外還轉運尿素和(或)甘油；后者只允許水分子通過,對水的轉運具有高

3、度專一性。近年研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白在多種腫瘤組織中表達量有改變,癌細胞比正常細胞更需要水分子的快速跨膜轉運。AQPs可能促進腫瘤新生血管的形成和腫瘤細胞的遷移,參與腫瘤的增殖和浸潤轉移。另外有研究認為AQPs可能具有致癌性,水通道蛋白cDNA的異位表達可引起許多表現(xiàn)型的改變,包括細胞增殖活性的加強,非依賴生長的增殖細胞固定等,水通道蛋白與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關系研究已引起廣泛關注?，F(xiàn)有關水通道蛋白與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關系研究較少,僅見少數AQP1

4、、AQP3、AQP5等在卵巢上皮性腫瘤上表達的報道,尚未見到有關AQP4與卵巢上皮性腫瘤發(fā)生發(fā)展關系的探討研究。該實驗采用免疫組化和原位雜交法檢測了AQP4、5蛋白及mRNA在原發(fā)性卵巢上皮性腫瘤組織中的分布及表達情況,并分析兩種蛋白及mRNA與卵巢上皮性癌的臨床病理指標的關系及兩者表達的相關性,從而從蛋白及基因水平探討水通道蛋白4和水通道蛋白5在卵巢上皮性癌發(fā)生發(fā)展及浸潤轉移機制中的意義。
　　 材料和方法:
　　 1

5、、病例資料收集鄭州大學第三附屬醫(yī)院婦產科2006年1月至2009年12月手術切除標本,病例標本均經常規(guī)HE染色并經本院病理科明確診斷。90例標本中,10例正常卵巢組織、15例卵巢良性腫瘤、15例卵巢交界性腫瘤及50例卵巢上皮性癌(漿液性囊腺癌28例,粘液性囊腺癌15例,內膜樣癌7例)?；颊吣挲g最大為80歲,最小為18歲,平均47.12±6.59歲。卵巢癌中按FIGO(2000年)臨床分期,Ⅰ期8例,Ⅱ期10例,Ⅲ期23例,Ⅳ期9例；根據

6、組織學分級(WHO2003年)標準:高分化13例,中分化18例,低分化19例；有淋巴結轉移者29例,無淋巴結轉移者21例；有腹水者34例,無腹水者16例。所有患者術前均未接受任何化療、放療和免疫治療,臨床及病理資料完整。
　　 2、實驗方法采用免疫組化SP法及組織原位雜交法檢測80例卵巢原發(fā)性上皮性腫瘤組織和10例正常卵巢組織中的AQP4和AQP5蛋白及mRNA的表達情況,并分析這兩種蛋白的表達與各臨床和病理參數的關系及二者的相

7、關性。
　　 3、統(tǒng)計學分析采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行數據分析,多個樣本率比較采用行×列表x檢驗,Fisher確切概率法,兩個樣本率的比較采用四格表x2檢驗,相關性分析采用Spearman等級相關分析。以a=0.05,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1、AQP4和AQP5蛋自在卵巢上皮性腫瘤中的表達AQP4和AQP5蛋白在卵巢上皮性腫瘤組織中的陽性表達率隨著組織良性、交界性、惡性的轉

8、變依次升高,分別為良性26.7％(4／15)和33.3％(5／15),交界性60.0％(9／15)和73.3％(11／15),惡性76.0％(38／50)和84.0％(42／50)；而在正常卵巢組織中陽性表達率較低,為10.0％(1／10)和20.0％(2／10),整體比較差異有統(tǒng)計學意義(AQP4:x2=23.382；AQP5:x2=24.105,P<0.01)；AQP4、5蛋白在卵巢上皮性癌組織中的陽性表達顯著高于正常卵巢組織中的表

9、達,差異有統(tǒng)計學意義(AQP4:x2=13.187；AQP5:x2=14.335,P<0.01)。
　　 2、AQP4和AQP5mRNA在卵巢上皮性腫瘤中的表達AQP4和AQP5mRNA在卵巢上皮性腫瘤組織中的陽性表達率隨著組織良性、交界性、惡性的轉變依次升高,分別為良性無表達,交界性40.0％(6／15)和46.7％(7／15),惡性54.0％(27／50)和66.0％(33／50)；而正常卵巢組織中陽性表達率為零,整體比較差

10、異有統(tǒng)計學意義(AQP4:x2=29.104；AQP5:x2=38.822,P<0.01)；AQP4、5mRNA在卵巢上皮性癌組織中的陽性表達顯著高于正常卵巢組織中的表達,差異有統(tǒng)計學意義(AQP4:x2=13.582；AQP5:x2=17.202,P<0.01)。
　　 3、AQP4蛋白及mRNA的表達與卵巢上皮性癌臨床病理指標的關系卵巢上皮性癌組織中AQP4蛋白及mRNA表達較一致。Ⅲ、Ⅳ期癌組織中陽性表達高于Ⅰ、Ⅱ期癌組織

11、中的表達,兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(AQP4-蛋白:x2=4.813,AQP4-mRNA:x2=4.836,P<0.05)；有淋巴結轉移的癌組織中AQP4的表達高于無淋巴結轉移的癌組織,差異有統(tǒng)計學意義(AQP4-蛋白:x2=3.944,AQP4-mRNA:x2=6.226,P<0.05)；中低分化的癌組織中AQP4的表達高于高分化的癌組織,差異比較有統(tǒng)計學意義(AQP4-蛋白:x2=6.511,AQP4-mRNA:x2=6.763,P

12、<0.05)；有腹水者AQP4的表達高于無腹水者,差異有統(tǒng)計學意義(AQP4-蛋白:x2=6.750,AQP4-mRNA:x2=7.966,P<0.05)；AQP4在各病理類型癌組織中的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 4、AQP5蛋白及mRNA的表達與卵巢上皮性癌臨床病理指標的關系卵巢上皮性癌組織中AQP5蛋白及mRNA表達較一致,中、低分化的癌組織中AQP5的表達高于高分化的癌組織,比較差異有統(tǒng)計學意義(AQP5

13、-蛋白:x2=4.530,AQP4-mRNA:x2=7.711,P<0.05)；有腹水者AQP5的表達高于無腹水者,差異有統(tǒng)計學意義(AQP5-蛋白:x2=5.911,AQP5-mRNA:x2=8.517,P<0.05):AQP5在臨床分期、病理分型、有無淋巴結轉移分組中的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 5、AQP4和AQP5蛋白及mRNA在卵巢上皮性癌組織表達的相關性 AQP4蛋白和AQP5蛋白,AQP4mRNA

14、和AQP5mRNA在卵巢上皮性癌組織的表達有相關性(r=0.366,0.334,P<0.05)。
　　 結論:
　　 1、卵巢癌組織中高表達AQP4和AQP5,為卵巢癌細胞膜上提供了更多的水分子進出的通道,可能參與了卵巢上皮性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及卵巢癌的浸潤轉移過程。
　　 2、AQP4和AQP5在有腹水組卵巢癌組織中高表達,可增加卵巢癌細胞對水的通透性,促進水分外滲,參與卵巢上皮性癌腹水的形成。
　　 3、