布地奈德對大鼠變應性鼻炎最輕持續(xù)炎癥反應模型鼻粘膜IL-12表達的影響.pdf

1、背景和目的：
　　 變應性鼻炎最輕持續(xù)性炎癥反應(minimal persistent inflammation，MPI)是近年來提出的新的認識，是指致敏個體持續(xù)接觸閾值下劑量變應原時，即使不出現(xiàn)任何臨床癥狀，其鼻黏膜也可檢測到變應性炎癥反應的存在。MPI的存在提示變應性鼻炎的治療要有新概念，即維持治療和預防治療，但藥物性預防的研究并不多。IL-12在各個環(huán)節(jié)對變應性鼻炎發(fā)病起到一定的調(diào)節(jié)作用。本實驗通過免疫組化方法檢測變應性鼻

2、炎最輕持續(xù)炎癥反應大鼠模型鼻粘膜抑制性細胞因子IL-12的表達情況，旨在探討布地奈德局部預防性應用對最輕持續(xù)炎癥反應的影響，為優(yōu)化變應性鼻炎的預防治療策略提供動物實驗和分子水平上的理論依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 80只健康SD大鼠隨機分為A～D共4組，每組20只。A組為陽性對照組即變應性鼻炎組，B組為實驗組即MPI給藥組，C組為陰性對照組即MPI不給藥組，D組為空白對照組。A、B和C組大鼠于第1天分別以含OVA10

3、mg、氫氧化鋁凝膠0.5ml和PBS液0.5ml的致敏液Ⅰ多點（腹腔、腳掌、四肢內(nèi)側(cè)肌內(nèi)）注射，行基礎致敏；第8天以含OVA1mg、氫氧化鋁凝膠0.5ml和生理鹽水0.5ml的致敏液Ⅱ多點注射，行強化致敏；D組大鼠第1天和第8天分別以生理鹽水1ml多點注射。第22天起，A、B和C組大鼠分別給予1％OVA鼻腔激發(fā)，每次50μl每側(cè)鼻孔25μl，每日1次，共1周；之后改為每周3次，繼續(xù)激發(fā)1周；從第36天起，A組仍以1％OVA滴鼻，B和C組

4、以0.01％OVA滴鼻，共持續(xù)5周，D組大鼠始終以生理鹽水滴鼻。第8周激發(fā)完成后24h，每組處死半數(shù)大鼠，觀察鼻粘膜EOS浸潤、ICAM-1、IL-12的表達情況。第57天開始對B組給予布地奈德進行滴鼻治療，每次激發(fā)前30min給藥，劑量為64μg，每日一次，每次每側(cè)鼻孔一噴，雙側(cè)滴鼻，每周連續(xù)給藥5d后停止給藥2天，共2周。其余三組均于激發(fā)前半小時以生理鹽水代替。第71天起，ABC三組大鼠均予1％OVA鼻腔激發(fā)，每次50μl每側(cè)鼻孔2

5、5μl，每日1次，共1周，D組大鼠予生理鹽水代替OVA滴鼻。激發(fā)完成后24h，處死剩余全部大鼠，觀察鼻粘膜EOS浸潤、ICAM-1、IL-12的表達情況。實驗數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進行單因素方差分析并繼以最小顯著差(LSD-t)檢驗比較組間差異。
　　 結(jié)果：
　　 1大鼠噴嚏計數(shù)
　　 第5周，A、B、C三組間噴嚏癥狀無明顯差異，第6-8周，當OVA濃度從1％降低到0.01％時，B組、C組兩組與A組比較差

6、異有顯著性(P＜0.05)，與D組比較差異無顯著性(P＞0.05)，第11周，B組與A組、C組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，與D組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，A組與C組比較無明顯差異(P＞0.05)。
　　 2嗜酸性粒細胞浸潤
　　 第8周：A組大鼠鼻粘膜嗜酸性粒細胞浸潤明顯多于其它三組，B、C組有少量浸潤，A組嗜酸性粒細胞計數(shù)與B組、C組相比較有明顯的差異(P＜0.05)，D組與B、C組相比較無明顯差

7、異(P＞0.05)。
　　 第11周：B組少量浸潤，嗜酸性粒細胞計數(shù)與A組、C組相比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組相比較無明顯差異(P＞0.05)。
　　 3 ICAM-1的表達
　　 ICAM-1在鼻粘膜中主要表達于上皮細胞，嗜酸性粒細胞，嗜堿性粒細胞等炎性細胞胞漿內(nèi)，呈棕褐色。
　　 第8周：A組可見大量陽性細胞存在，B組和C組陽性細胞輕微表達，D組無表達。A組與B組、C組相比較有明顯的差異

8、(P＜0.05)，D組與B、C組相比較無明顯差異(P＞0.05)。
　　 第11周：A組和C組可見大量陽性細胞存在，B組和D組未見陽性細胞表達。B組與A組、C組相比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組相比較無明顯差異(P＞0.05)。
　　 4 IL-12的表達
　　 IL-12為胞漿著色，鼻黏膜中IL-12陽性細胞主要分布在黏膜上皮細胞和腺體上皮細胞，呈棕黃色。
　　 第8周：A組零星表達陽性細胞，

9、B組和C組可見少量陽性表達，D組陽性表達明顯。A組與B組、C組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，D組與其余三組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 第11周：A組和C組零星表達陽性細胞，B組和D組陽性表達明顯。D組、B組分別與A組、C組比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組比較無明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、MPI期應用低劑量布地奈德可顯著減輕AR大鼠模型癥狀再發(fā)，起到預防作