布地奈德對(duì)大鼠變應(yīng)性鼻炎最輕持續(xù)炎癥反應(yīng)模型鼻粘膜IL-12表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的：
　　 變應(yīng)性鼻炎最輕持續(xù)性炎癥反應(yīng)(minimal persistent inflammation，MPI)是近年來提出的新的認(rèn)識(shí)，是指致敏個(gè)體持續(xù)接觸閾值下劑量變應(yīng)原時(shí)，即使不出現(xiàn)任何臨床癥狀，其鼻黏膜也可檢測(cè)到變應(yīng)性炎癥反應(yīng)的存在。MPI的存在提示變應(yīng)性鼻炎的治療要有新概念，即維持治療和預(yù)防治療，但藥物性預(yù)防的研究并不多。IL-12在各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)變應(yīng)性鼻炎發(fā)病起到一定的調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化方法檢測(cè)變應(yīng)性鼻

2、炎最輕持續(xù)炎癥反應(yīng)大鼠模型鼻粘膜抑制性細(xì)胞因子IL-12的表達(dá)情況，旨在探討布地奈德局部預(yù)防性應(yīng)用對(duì)最輕持續(xù)炎癥反應(yīng)的影響，為優(yōu)化變應(yīng)性鼻炎的預(yù)防治療策略提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和分子水平上的理論依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 80只健康SD大鼠隨機(jī)分為A～D共4組，每組20只。A組為陽(yáng)性對(duì)照組即變應(yīng)性鼻炎組，B組為實(shí)驗(yàn)組即MPI給藥組，C組為陰性對(duì)照組即MPI不給藥組，D組為空白對(duì)照組。A、B和C組大鼠于第1天分別以含OVA10

3、mg、氫氧化鋁凝膠0.5ml和PBS液0.5ml的致敏液Ⅰ多點(diǎn)（腹腔、腳掌、四肢內(nèi)側(cè)肌內(nèi)）注射，行基礎(chǔ)致敏；第8天以含OVA1mg、氫氧化鋁凝膠0.5ml和生理鹽水0.5ml的致敏液Ⅱ多點(diǎn)注射，行強(qiáng)化致敏；D組大鼠第1天和第8天分別以生理鹽水1ml多點(diǎn)注射。第22天起，A、B和C組大鼠分別給予1％OVA鼻腔激發(fā)，每次50μl每側(cè)鼻孔25μl，每日1次，共1周；之后改為每周3次，繼續(xù)激發(fā)1周；從第36天起，A組仍以1％OVA滴鼻，B和C組

4、以0.01％OVA滴鼻，共持續(xù)5周，D組大鼠始終以生理鹽水滴鼻。第8周激發(fā)完成后24h，每組處死半數(shù)大鼠，觀察鼻粘膜EOS浸潤(rùn)、ICAM-1、IL-12的表達(dá)情況。第57天開始對(duì)B組給予布地奈德進(jìn)行滴鼻治療，每次激發(fā)前30min給藥，劑量為64μg，每日一次，每次每側(cè)鼻孔一噴，雙側(cè)滴鼻，每周連續(xù)給藥5d后停止給藥2天，共2周。其余三組均于激發(fā)前半小時(shí)以生理鹽水代替。第71天起，ABC三組大鼠均予1％OVA鼻腔激發(fā)，每次50μl每側(cè)鼻孔2

5、5μl，每日1次，共1周，D組大鼠予生理鹽水代替OVA滴鼻。激發(fā)完成后24h，處死剩余全部大鼠，觀察鼻粘膜EOS浸潤(rùn)、ICAM-1、IL-12的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進(jìn)行單因素方差分析并繼以最小顯著差(LSD-t)檢驗(yàn)比較組間差異。
　　 結(jié)果：
　　 1大鼠噴嚏計(jì)數(shù)
　　 第5周，A、B、C三組間噴嚏癥狀無(wú)明顯差異，第6-8周，當(dāng)OVA濃度從1％降低到0.01％時(shí)，B組、C組兩組與A組比較差

6、異有顯著性(P＜0.05)，與D組比較差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，第11周，B組與A組、C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，與D組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，A組與C組比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 2嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)
　　 第8周：A組大鼠鼻粘膜嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)明顯多于其它三組，B、C組有少量浸潤(rùn)，A組嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與B組、C組相比較有明顯的差異(P＜0.05)，D組與B、C組相比較無(wú)明顯差

7、異(P＞0.05)。
　　 第11周：B組少量浸潤(rùn)，嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)與A組、C組相比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組相比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 3 ICAM-1的表達(dá)
　　 ICAM-1在鼻粘膜中主要表達(dá)于上皮細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，嗜堿性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞胞漿內(nèi)，呈棕褐色。
　　 第8周：A組可見大量陽(yáng)性細(xì)胞存在，B組和C組陽(yáng)性細(xì)胞輕微表達(dá)，D組無(wú)表達(dá)。A組與B組、C組相比較有明顯的差異

8、(P＜0.05)，D組與B、C組相比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 第11周：A組和C組可見大量陽(yáng)性細(xì)胞存在，B組和D組未見陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。B組與A組、C組相比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組相比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 4 IL-12的表達(dá)
　　 IL-12為胞漿著色，鼻黏膜中IL-12陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在黏膜上皮細(xì)胞和腺體上皮細(xì)胞，呈棕黃色。
　　 第8周：A組零星表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞，

9、B組和C組可見少量陽(yáng)性表達(dá)，D組陽(yáng)性表達(dá)明顯。A組與B組、C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，D組與其余三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 第11周：A組和C組零星表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞，B組和D組陽(yáng)性表達(dá)明顯。D組、B組分別與A組、C組比較有明顯差異(P＜0.05)，D組與B組比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、MPI期應(yīng)用低劑量布地奈德可顯著減輕AR大鼠模型癥狀再發(fā)，起到預(yù)防作