VEGF-C、VEGFR-3在腎細胞癌中的表達及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關性的研究.pdf

1、目的:
　　探討血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGF-C)及其受體(VEGFR-3)在腎細胞癌中的表達水平及其與淋巴管密度(LVD)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關系。進一步闡明腎癌淋巴管生成的機制及其與腎癌生物學行為的關系,為腎癌的靶向治療提供新的靶點。
　　方法:
　　收集2012年7月至2013年9月承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院腎細胞癌(RCC)手術切除標本40例,均為單發(fā),術前常規(guī)行泌尿系統(tǒng)超聲、CT或MRI檢查,其中18例行保留腎單位手

2、術,22例行根治性腎切除術,伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者均行根治性腎切除術加區(qū)域淋巴結(jié)清掃術。患者中男25例,女15例。年齡24～65歲,平均年齡51.9歲。標本均經(jīng)病理證實為RCC,其中透明細胞癌37例,乳頭狀腺癌2例,嫌色細胞癌1例,術前均未接受放療、化療及免疫治療。選取距腫瘤邊緣5cm以上的正常腎組織10例作為對照。標本離體后分為2份,1份-80℃低溫冰箱保存;l份以4％多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,備用。腫瘤分級按1997年WHO標準:高

3、分化20例,中分化11例,低分化或未分化9例。腫瘤分期按2002年AJCC腎癌臨床分期:Ⅰ期22例,Ⅱ期6例,Ⅲ期11例,Ⅳ期1例。其中無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者29例,有腎門周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者11例。冰凍組織采用RT-PCR方法研究40例腎細胞癌和10例正常腎組織中VEGF-C mRNA表達情況及其與腎細胞癌淋巴管密度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關系。包埋蠟塊采用免疫組化方法檢測VEGF-C在腎癌及正常腎組織中的表達情況,VEGFR-3免疫組化染色研究腫瘤組織內(nèi)

4、和腫瘤周圍淋巴管的形態(tài)結(jié)構(gòu),并計數(shù)淋巴管密度(LVD);應用 SPSS-17.0統(tǒng)計軟件,組間比較采用t檢驗、卡方檢驗,等級資料采用秩和檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1.VEGF-C mRNA表達情況經(jīng)半定量RT-PCR分析,10例正常腎組織中VEGF-C mRNA均可見少量表達,相對表達水平為0.250±0.104。40例RCC組織VEGF-C mRNA相對表達水平為0.576±0.191,2組比

5、較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-C mRNA相對表達水平分別為0.693±0.174和0.532±0.181,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組明顯升高(P<0.05)。VEGF-C mRNA相對表達水平與年齡、性別、病理分級無關,與臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(P<0.05)。
　　2.VEGF-C在正常腎組織及RCC中的表達
　　腎癌組織內(nèi)VEGF-C陽性表達率(85.0%)顯著

6、高于正常腎組織(30.0%,p<0.01);高中分化組和低分化組之間差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中VEGF-C表達顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(p<0.05),且VEGF-C陽性表達與腎癌臨床分期有關(p<0.05)。
　　3.RCC組織內(nèi)與腫瘤周圍組織LVD及其與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關系
　　免疫組化結(jié)果顯示陽性 VEGFR-3蛋白染色主要位于淋巴管內(nèi)皮細胞胞質(zhì)和(或)胞膜,呈棕黃色?？梢娔[瘤內(nèi)淋巴管管腔較小,腫

7、瘤周圍淋巴管呈功能性擴張,管徑明顯擴大。同時部分微毛細血管(管腔內(nèi)可見紅細胞)、腎小管內(nèi)皮細胞可見棕黃染色,提示VEGFR-3不僅表達于淋巴管內(nèi)皮細胞,還部分表達于微毛細血管及腎小管內(nèi)皮細胞。腫瘤周圍 LVD為14.16±2.58,高于腫瘤內(nèi)的9.74±2.48和正常腎組織10.27±2.92,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。腫瘤內(nèi)LVD與正常腎組織LVD之間差異無統(tǒng)計學意義。發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的11例RCC瘤體內(nèi)、腫瘤周圍LVD分別為1

8、2.01±2.14和15.24±1.86,明顯高于29例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的8.88±2.03和13.37±2.03,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　腎癌組織中VEGF-C mRNA表達明顯高于正常腎組織,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-C mRNA表達量升高,Ⅲ、Ⅳ期腎癌較Ⅰ、Ⅱ期腎癌VEGF-C mRNA表達量升高。腎癌組織內(nèi)VEGF-C表達陽性率顯著高于正常腎組織,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中 VEGF-C