玉米小斑病菌和彎孢霉葉斑病菌生物學(xué)特性及有效藥劑和生防菌株的篩選.pdf

1、玉米是我國主要的糧食作物之一，又是重要的飼料作物和工業(yè)原料。目前其播種面積和總產(chǎn)量已超過水稻和小麥。然而病害一直是影響玉米生產(chǎn)的重要因素，其中小斑病(Bipolaris maydis Nisik&Miyake)和彎孢霉葉斑病(Curvularia lunata Boedijn)是玉米重要的葉部病害，危害逐年加重。特別是玉米彎孢霉葉斑病在我國玉米主產(chǎn)區(qū)發(fā)生面積逐年擴(kuò)大，病情逐年加重，已由過去的次要病害逐漸發(fā)展成為主要病害。本研究分離得到山

2、東玉米小斑病和彎孢霉葉斑病病菌，研究了其生物學(xué)特性，篩選到有效的化學(xué)藥劑和生防菌株，為玉米小斑病和彎孢霉葉斑病的防治提供理論依據(jù)。本論文的主要研究結(jié)果如下:
　　從棗莊、泰安、臨沂、聊城等地采集病葉，分離得到病原真菌，根據(jù)分生孢子形態(tài)學(xué)特征和ITS聚類分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，引起山東玉米小斑病和彎孢霉葉斑病的病原分別是Bipolaris maydis Nisik&Miyake和Curvularia lunata Boedijn。
　　

3、玉米小斑病菌分生孢子萌發(fā)對溫度的要求不嚴(yán)格，在5～35℃之間均可以萌發(fā)，其中25℃最適宜萌發(fā)，萌發(fā)率達(dá)到100％。RH=100且保濕時(shí)間2h以上，玉米小斑病菌分生孢子即可萌發(fā)，保濕8h時(shí)，孢子萌發(fā)率達(dá)到100％。光照對玉米小斑病菌分生孢子萌發(fā)的影響差異不大。溫度在15～35℃之間玉米小斑病菌菌絲均可生長，其中25～30℃最適合生長。
　　玉米彎孢霉葉斑病菌分生孢子在10～35℃之間均可以萌發(fā)，其中25～30℃萌發(fā)率均達(dá)到100％。

4、RH=100且保濕時(shí)間2h以上，玉米彎孢霉葉斑病菌分生孢子即可萌發(fā)，保濕10h時(shí)，孢子萌發(fā)率達(dá)到100％。光照對玉米彎孢霉葉斑病菌分生孢子萌發(fā)的影響差異不大。溫度在15～35℃之間菌絲均可生長，其中30℃最適合菌絲生長。
　　分別測定了14種和16種藥劑對玉米小斑和彎孢霉葉斑病菌的抑制效果，發(fā)現(xiàn)30％氟菌唑可濕性粉劑、30％苯甲醚菌酯懸浮劑、22.5％啶氧菌酯懸浮劑、42.8％氟菌肟菌酯懸浮劑、75％肟菌戊唑醇水分散粒劑、500g

5、/L異菌脲懸浮劑、250g/L吡唑醚菌酯乳油、500g/L氟啶胺懸浮劑能有效抑制兩種病菌菌絲的生長，其中30％氟菌唑可濕性粉劑、30％苯甲醚菌酯懸浮劑抑菌效果最好，對玉米小斑病菌和彎孢霉葉斑病菌的EC50分別為0.0277mg/L和0.058mg/L、0.1987mg/L和0.1279mg/L。
　　初步篩選到32株生防菌，通過生防菌的復(fù)篩，共篩選到5株對玉米小斑病菌和6株對玉米彎孢霉葉斑病抑制作用較好的生防菌，其中CLS4、CL

6、S11、CLS20、CLS23四株生防菌對玉米小斑病和彎孢霉葉斑病的的抑菌效果最好，通過16s rDNA序列測定鑒定，CLS23為解淀粉類芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，CLS11為洋蔥伯克霍爾德氏菌（Burkholderia cepacia），CLS20為新洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacenocepacia)，CLS4為類芽孢桿菌（Paenibacillus jamilae）。

7、　　基于玉米小斑病菌5.8SrDNA-ITS序列和玉米彎孢霉葉斑病菌Clg2p基因序列，設(shè)計(jì)了玉米小斑病菌和彎孢霉葉斑病菌的特異性引物對BMF-3、BMR-3和CLF-4、CLR-4，利用CTAB法提取玉米小斑病菌和彎孢霉葉斑病菌的DNA，以玉米彎孢霉葉斑病菌、玉米小斑病菌和玉米大斑病菌的DNA為模板對所涉及的引物進(jìn)行了特異性檢測，電泳結(jié)果顯示以引物對BMF-3、BMR-3為引物時(shí)，只有以玉米小斑病菌的DNA為模板時(shí)可擴(kuò)增產(chǎn)生目的片段。