不同水稻品系對稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、稻縱卷葉螟（Cnaphalocrocis medinalis Guenée）（Rice leaf folder, RLF）是一種世界范圍內(nèi)危害水稻、大麥、小麥、甘蔗等作物的重要害蟲。腸道微生物在宿主的食物消化、生長發(fā)育、免疫以及代謝方面起著重要的作用，近年來新一代測序技術(shù)大大推動(dòng)了腸道微生物的研究。為分析稻縱卷葉螟腸道微生物對宿主的功能，本文綜合運(yùn)用傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)技術(shù)、變性梯度凝膠電泳技術(shù)（DGGE）、16S rRNA基因測序技術(shù)以及宏

2、基因組測序技術(shù)對稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌多樣性及其功能進(jìn)行了分析，
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴采用傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法，共分離得到10種不同的細(xì)菌，其中變形菌門 Proteobacteria和厚壁菌門 Firmicutes所占比例分別為70％和30%，表明變形菌門為稻縱卷葉螟腸道可培養(yǎng)細(xì)菌中的優(yōu)勢菌群。采用 DGGE方法，分離得到的變形菌門所占比例為77%，厚壁菌門所占比例為23%，在門的水平上腸道微生物的組成與傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法一致。利

3、用16S rRNA基因測序技術(shù)分析稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌組成，結(jié)果表明，稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌主要由變形菌門（55.2%）和擬桿菌門Bacteroidetes（6.2%）組成，其中變形菌門主要由假單胞菌目Pseudomonadales（16.9%）、黃色單胞菌目Xanthomonadales（8.3%）、立克次氏體目Rickettsiales（4.9%）和腸桿菌目Enterobacteriales（4.6%）組成；擬桿菌門主要是由鞘脂桿菌目Sp

4、hingobacteriales（4.3%）和擬桿菌目Bacteroidales（1.1%）組成。利用宏基因組測序技術(shù)分析稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌多樣性，結(jié)果表明稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌豐度最高的是變形菌門（89%），其次是厚壁菌門（8%）。其中變形菌門主要是由腸桿菌目（65%）、立克次氏體目（23%）和假單胞菌目（4%）組成；厚壁菌門主要是由芽孢桿菌目 Bacillales（5%）組成。綜合上述四種方法發(fā)現(xiàn)，稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌的多樣性在門的分類水

5、平上是一致的，但是在（綱、目、科、屬）分類水平上，利用16S rRNA基因測序技術(shù)和宏基因組測序技術(shù)的分析結(jié)果存在一些差別。⑵利用16SrRNA基因測序技術(shù)分析不同品系水稻（明恢82、明恢2155、甬優(yōu)15）對稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌多樣性的影響。結(jié)果表明，取食三個(gè)品系水稻的稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌主要由黃色單胞菌目、假單胞菌目、立克次氏體目、腸桿菌目組成。假單胞菌目和腸桿菌目的相對豐度在三個(gè)品系之間均存在顯著性差異，黃色單胞菌目和立克次氏體目的相

6、對豐度在明恢82與甬優(yōu)15品系間和明恢2155與甬優(yōu)15品系間存在顯著性差異，表明食物改變了稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌的相對豐度。⑶利用16SrRNA基因測序技術(shù)分析轉(zhuǎn)crylAb基因水稻對稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌多樣性的影響，結(jié)果表明，轉(zhuǎn) crylAb基因水稻顯著影響稻縱卷葉螟腸道細(xì)菌的相對豐度。其中γ-變形菌綱、腸桿菌目、腸桿菌科、腸桿菌屬在處理組中的相對豐度均大于對照組，這可能是由于Bt毒素破壞了腸道內(nèi)環(huán)境，機(jī)體的正常代謝紊亂，而這些菌在維持機(jī)