1 肝再生增強(qiáng)因子對外原性抗原引起機(jī)體免疫應(yīng)答影響的初步研究;2 病毒性肝炎肝衰竭患者死亡原因分析;3 聚乙二醇化干擾素α-2a治療HBeAg陽性的慢性乙型肝炎及其應(yīng)用于拉米夫定耐藥的初步臨床觀察.pdf

1、第一部分 目的：應(yīng)用體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)方法，研究大鼠肝再生增強(qiáng)因子(rataugmenterofliverregeneration，rALR)對乙型肝炎表面抗原mepatitisBsurfaceantigen,HBsAg)免疫產(chǎn)生抗體、細(xì)胞因子和對脾臟細(xì)胞增殖的影響；同時觀察rALR對牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)免疫產(chǎn)生抗體的影響。 方法： 1．將pPIC9K—rALR酶切線性化后轉(zhuǎn)染入宿

2、主菌GS115中，在甲醇誘下進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。采用SDS—PAGE及Westernblot進(jìn)行表達(dá)產(chǎn)物rALR的鑒定，經(jīng)超濾純化后，以3H摻入法測定rALR對肝癌細(xì)胞的促增殖活性。 2．rALR抑制大鼠抗HBs及細(xì)胞因子的產(chǎn)生：Wistar大鼠48只，隨機(jī)分為6組，每組8只，即：生理鹽水組、HBsAg20μg/只組、HBsAg20[tg+rALRl00μg/kg組、HBsAg20gg+rALR25pg／kg組、NBsAg20pg+p

3、PIC9K表達(dá)上清組、HBsAg20rtg+CsA10mg／kg組。除生理鹽水組外，其余各組將HBsAg與相應(yīng)處理因素(rALR、空質(zhì)粒表達(dá)產(chǎn)物、CsA等)混合后作皮下注射，每周1次，共4次，然后檢測血清中抗t-IBs、IL-2和IFN-7。 3．rALR抑制大鼠產(chǎn)生白蛋白抗體：Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只，即：生理鹽水組、BSA25Ixg／只組、BSA25μg+rALR100μg/kg組、BSA25μg+pP

4、IC9K表達(dá)上清組、BSA25μg+CsA10mg／kg組。除生理鹽水組外，其余各組將BSA與相應(yīng)處理因素(rALR、空質(zhì)粒表達(dá)產(chǎn)物、CsA等)混合后作皮下注射，每周1次，共4次，然后檢測血清抗白蛋白抗體。 4．rALR抑制脾臟細(xì)胞增殖：Wistar大鼠先皮下注射HBsAg1次，2周以后脫頸椎處死，分離脾臟單核細(xì)胞，接種到96孔平板中，再加HBsAglgg／孔和／或相應(yīng)處理因素(rALR、空質(zhì)粒表達(dá)產(chǎn)物等)，48小時后加3H-T

5、dR，12小時后收集細(xì)胞，檢測cpm值。 結(jié)果：所表達(dá)的產(chǎn)物為rALR，并且有較強(qiáng)的生物學(xué)活性。通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究揭示，生理鹽水組和HBsAg20μg+CsA組均無抗HBs的抗體產(chǎn)生，rALR100pg／kg+HBsAg組的8只動物中只有2只出現(xiàn)抗HBs的抗體，空質(zhì)粒對照組和單用HBsAg組8只動物均出現(xiàn)抗HBs的抗體；rALR100pg／kg+BSA組的8只動物中只有3只出現(xiàn)抗BSA抗體，空質(zhì)粒對照組和單用BSA組8只動物均出現(xiàn)

6、抗BSA的抗體；rALR100μg/kg能明顯抑制細(xì)胞因子IL-2及IFN-7的產(chǎn)生。體內(nèi)預(yù)先用HBsAg致敏，然后分離脾細(xì)胞，再用HBsAg體外激活，rALR4pg能明顯脾細(xì)胞的增殖。 結(jié)論：rALR能抑制HBsAg和BSA誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生相應(yīng)抗體及抑制細(xì)胞因子IL-2及IFN-~的產(chǎn)生；體外能抑制經(jīng)體內(nèi)致敏的脾細(xì)胞的增殖。說明rALR有免疫抑制作用，并且可能參與了嬰幼兒對乙型肝炎病毒感染的耐受。 第二部分 目的：

7、病毒性肝炎是我國最常見的肝臟疾病死亡原因，早期發(fā)現(xiàn)、及時治療是降低死亡率的關(guān)鍵，本文目的在于分析病毒性肝炎所致肝衰竭患者的死亡原因，以期對臨床治療有一定的指導(dǎo)作用。 方法：采用回顧性分析方法，收集我科五年的病毒性肝炎肝衰竭住院死亡病例¨5例，其診斷符合2000年中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治方案》診斷標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)計(jì)病史資料登記表，根據(jù)住院登記號調(diào)取研究對象的病歷資料，摘錄每例病例的臨床和實(shí)驗(yàn)室檢

8、查數(shù)據(jù)，臨床和實(shí)驗(yàn)室檢查數(shù)據(jù)的采集選用入院的第1次檢查和死亡前的最后1次檢查作為研究資料。 結(jié)果： 1．性別：男性l03例、女性12例； 2．年齡：17～87歲，平均45．7歲，在3l～50之間的占53％。 3．分型：急性重型肝炎2例、亞急性重型肝炎4例、慢性重型肝炎89例、肝硬化20例，慢性重型肝炎大部分有肝硬化基礎(chǔ)疾病。 4．病原學(xué)特點(diǎn)：114例乙肝標(biāo)志物陽性，其中12例重疊其它嗜肝病毒感染；

9、¨0例病例中，HBeAg陽性有24例(24／110，21．8％)，HBeAb陽性有61例(6l／¨O，55．5％)；85例病例中，HBVDNA定最>1×lO5者有68例(68／85，80％)，HBVDNA定量<1×lO5者有l(wèi)7例(17／85，20％)，兩者比較有明顯差異。 5．并發(fā)癥： 5.1肝性腦?。?0例(80／115，69．6％)出現(xiàn)肝性腦病。 5.2出血：51例發(fā)生出血(51／115，44．3％)，以消

10、化道出血為主(50／115，43．4％)。 5.3肝腎綜合征：63例發(fā)生肝腎綜合征(63／115，54．8％)。 5.4電解質(zhì)紊亂：115例病例中，94例發(fā)生電解質(zhì)紊亂(94／1l5，81．7％)，以低鈉、低氯為主。 5.5感染：115例病例中，9l例出現(xiàn)感染(91／115，79．1％)，以原發(fā)性腹膜炎為主(79／115，68．7％)。 結(jié)論：病毒性肝炎肝衰竭致病人主要以慢性重型肝炎和肝硬化為主，HBVD

11、NA的活躍復(fù)制及病毒的變異對病情的發(fā)展有一定的影響，應(yīng)積極尋求早期的抗病毒治療；并發(fā)癥發(fā)生率高，應(yīng)積極控制并發(fā)癥的發(fā)生，有利于病情的轉(zhuǎn)歸。 第三部分 目的：初步觀察聚乙二醇化干擾素a-2a治療慢性乙型肝炎及其對拉米夫定耐藥的臨床療效。 方法：將病人分為2組。I組：14例患者，為單用聚乙二醇化干擾素a-2a組，每周1次皮下注射聚乙二醇化干擾素ct-2a，劑量為135[tg～180~gx6個月，每月檢查1次肝功能及血

12、常規(guī)，治療結(jié)束時檢查乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物及HBVDNA定量；H組：13例患者，該組均用了1年以上的拉米夫定(Lamivudine，LAM)，且出現(xiàn)了耐藥，此組采用拉米夫定和聚乙二醇化干擾素a-2a聯(lián)用3個月，然后停用LAM，繼續(xù)用聚乙二醇化干擾素a-2a至6個月，治療期間的檢測同I組。 結(jié)果：I組有1例、II組有2例血清UBsAg消失，且抗HBs陽性；I組和II組各有8例(57％)和4例(30．8％％)出現(xiàn)HBeAg的血清學(xué)轉(zhuǎn)