炭疽芽孢苗與吸附PA苗誘導小鼠體液免疫應答初步觀察.pdf

1、炭疽芽孢桿菌是人畜共患炭疽病的重要病原體，是公認的重要生物戰(zhàn)劑之一，目前人用疫苗有兩種：即炭疽減毒活芽孢苗和炭疽弱毒株無菌培養(yǎng)濾液佐劑吸附苗，自研制成功以來，已在人群中長期使用，為了深入了解炭疽疫苗的免疫應答機制，為疫苗的開發(fā)及評價提供理論基礎，本研究采用炭疽芽孢桿菌兩種疫苗——A16R芽孢苗與吸附PA苗，分別從三個層面上——脾、骨髓和外周血，初步觀察炭疽兩種疫苗的免疫應答機制。 本研究共分為三部分： 1、炭疽兩種疫苗的

2、制備及免疫效果測定，分兩部分 (1)兩種炭疽疫苗的制備和鑒定； (2)A16R芽孢苗及吸附PA苗免疫Balb/C小鼠血清抗體效價動態(tài)觀察及抗體亞型分析； 2、A16R芽孢苗及吸附PA苗誘導Balb/C小鼠特異性ASCs的動態(tài)觀察 (1)首先建立了ELISPOT檢測炭疽疫苗免疫Balb/C小鼠后抗原特異性抗體分泌細胞的實驗方法； (2)從三個層面上，即骨髓、脾和外周血，觀察了兩種疫苗免疫Balb/C

3、小鼠后特異性ASCs的動態(tài)變化及差異性，并結合外周血抗體效價的消長分析不同器官/部位ASCs應答與外周血抗體效價消長之間的相關性； 3、炭疽A16R芽孢苗與吸附PA苗誘導Balb/C小鼠脾、骨髓及外周血中特異性Th2細胞應答的動態(tài)變化，并結合外周血抗體效價的消長分析不同器官/部位Th2應答的產(chǎn)生與維持對穩(wěn)定血中抗芽孢/PA抗體的輔助作用。 結論： (1)通過對炭疽兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠外周血抗體效價的動態(tài)

4、觀察，發(fā)現(xiàn)隨著兩種疫苗的加強免疫，小鼠血清中均可檢測到高效價的抗體水平，并維持較長時間；吸附PA苗免疫組抗體亞型分析以IgG1和IgG2b為主，IgG2a，水平較低，與對照組差異顯著；A16R芽孢苗免疫組抗體亞型分析雖仍以IgG1和IgG2b為主，亦可檢測到較高水平的IgG2a； (2)兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓和血中均可檢測到ASCs，但ASCs出現(xiàn)時間及強度不同，脾中最先出現(xiàn)，首先達峰值，骨髓中峰值晚于脾，但骨髓

5、中應答維持時間較長，與外周血抗體效價的維持有一定的相關性；兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓及外周血中ASCs的動態(tài)變化有一定差異； (3)兩種疫苗免疫后Balb/C小鼠脾、骨髓和外周血中均可檢測到抗原特異性Th2細胞應答，但Th2應答出現(xiàn)時間及強度不同，骨髓中最先出現(xiàn)，首先達峰值，且維持時間長，外周血中可檢測到較強的Th2應答，且隨著脾、骨髓及外周血的Th2應答的升高與維持，外周血抗體滴度不斷升高，且于末次加強免疫后60天