溶菌酶-聚乳酸復(fù)合微球的制備及表征.pdf

1、聚乳酸作為優(yōu)良的生物相容性和可生物降解性的聚合物，在藥物控釋體系得到了廣泛的研究；超臨界二氧化碳流體技術(shù)在細(xì)微顆粒的制備方面也具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)用領(lǐng)域中最受研究者關(guān)注的莫過于生物和醫(yī)藥制劑以及特殊聚合物。本文主要采用超臨界流體強(qiáng)制分散溶液法(SEDS法)進(jìn)行聚乳酸藥物載體微球的制備，并以溶菌酶為模型研究其在多肽、蛋白類大分子藥物給藥體系中的應(yīng)用，為日后超臨界流體技術(shù)在制備大分子類藥物緩釋微球方面的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 首先，以三.聚

2、乳酸為模型體系，超臨界CO<,2>為抗溶劑，采用SEDS法制備聚乳酸微球?？疾炝藟毫?、溫度、溶液濃度、溶液流速、聚合物分子量等參數(shù)對(duì)制備微球的形態(tài)、粒徑及其分布的影響。結(jié)果表明：改變工藝參數(shù)，可在一定范圍內(nèi)調(diào)控微球粒徑，所制微球平均粒徑0.67μm-6.64 μm，有機(jī)溶液濃度及其流速為主要影響因素，SEDS過程的最佳操作條件是壓力為12 MPa，溫度33℃，有機(jī)溶液濃度0.5％(w/v)，流速0.5 ml.min<'-1>。在實(shí)驗(yàn)范圍

3、內(nèi)，聚乳酸微球的粒徑隨著壓力的增大先減小后增大；隨溫度升高而增大；隨濃度增大而變大，且微球的團(tuán)聚程度增大；隨著有機(jī)溶液流速變大，聚乳酸微球粒徑長(zhǎng)大；四種分子量聚乳酸同種條件下制備得微球，分子量為5萬、10萬的聚乳酸能夠形成球形度較好、粒度較均勻的微球。在優(yōu)化后的操作條件下，又研究了不同方法(超臨界CO<,2>流體抗溶劑法及SEDS法)和混合溶劑對(duì)聚乳酸微球形貌及粒徑的影響。實(shí)驗(yàn)條件一定時(shí)，采用二氯甲烷一丙酮混合溶劑及強(qiáng)制分散溶液法制備得

4、較小粒徑微球其次，利用SEDS法制備溶菌酶粉末；并對(duì)制備前后溶菌酶二級(jí)結(jié)構(gòu)及活性的變化進(jìn)行表征；紅外光譜及圓二色光譜測(cè)試結(jié)果表明，經(jīng)SEDS過程后，溶菌酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)沒有明顯變化，活性測(cè)試結(jié)果表明經(jīng)SEDS過程后溶菌酶的活性提高了51.2％。 再次，以溶菌酶作為多肽、蛋白類大分子藥物模型，制備了溶菌酶一聚乳酸復(fù)合微球。將制備所得溶菌酶粉末用于溶菌酶一聚乳酸復(fù)合微球的制備，考察聚乳酸分子量、聚乙二醇(PEG)含量、PEG分子量以及載

5、藥量等對(duì)復(fù)合微球藥物釋放性能的影響，結(jié)果表明：在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)，隨著載藥量的增大，溶菌酶一聚乳酸復(fù)合微球的粒徑逐步減小，藥物釋放速度逐步增大，載藥量為8％的微球的球形度及分散度較好；微球的大小隨著聚乳酸分子量的增大先增大后減小，藥物的釋放速度由聚乳酸分子量及復(fù)合微球粒徑大小共同決定；PEG的含量越高，分子量越大，微球的粒徑越小，藥物的釋放速度越快。 最后，對(duì)聚乳酸藥物載體微球進(jìn)行了體外降解與初步生物學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。采用pH 6.8 PB