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文檔簡介
1、研究目的:散發(fā)性胰島素瘤的分子發(fā)病機制未明。目前仍缺乏可靠的用于鑒別胰島素瘤良惡性的分子標志物。本課題第一部分的研究目的是明確胰島素瘤是否發(fā)生錯配修復基因失活,從而導致微衛(wèi)星不穩(wěn)定;錯配修復基因的異常以及微衛(wèi)星不穩(wěn)定是否可用于鑒別該類腫瘤的良惡性和判斷預后。
實驗方法:用PCR方法檢測61例胰島素瘤的微衛(wèi)星不穩(wěn)定,MLH1基因的雜合缺失和啟動子甲基化。用變性高效液相色譜分析方法測定外顯子突變并DNA測序驗證。用免疫組織化學
2、染色方法檢測MLH1和MSH2蛋白在腫瘤及瘤旁組織中的表達。分別用單因素和多因素分析方法對實驗數(shù)據(jù)與患者的臨床病理學資料進行相關性分析。
實驗結(jié)果:在58個散發(fā)性胰島素瘤中,MLH1和MSH2蛋白表達下降分別為38%和16%。散發(fā)性胰島素瘤發(fā)生MLH1基因啟動子高甲基化和基因雜合缺失分別為32%和50%。MLH1基因啟動子高甲基化或同時發(fā)生啟動子高甲基化和基因雜合缺失與蛋白的表達下降顯著相關(P值分別為0.041和0.02
3、7)。散發(fā)性胰島素瘤中未發(fā)現(xiàn)MSH2基因雜合缺失。1/3的散發(fā)性胰島素瘤發(fā)生高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定,MLH1或MSH2蛋白表達下降與高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定顯著相關(P=0.006和0.049)。MLH1和MSH2蛋白表達同時下降也與高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定顯著相關(P=0.004)。
與臨床病理相關分析顯示,高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定、MLH1蛋白表達下降或MLH1和MSH2蛋白表達同時下降與腫瘤良惡性顯著相關(P值分別為2.6×10-5、0.
4、008和0.018)。高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定、MLH1蛋白表達下降以及同時發(fā)生MLH1和MSH2蛋白表達下降均為患者未即時治愈的獨立影響因素(P值分別為0.002、0.011和0.030)。
實驗結(jié)論:在散發(fā)性胰島素瘤中MLH1基因的失活與雜合缺失和基因啟動子高甲基化有關。MLHt和MSH2基因的表達下降以及高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定可作為鑒別胰島素瘤的良惡性以及輔助判斷患者的預后的分子標志物。錯配修復基因的異??赡茉谝葝u素瘤的發(fā)生中
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