第三代二膦酸鹽(伊班膦酸鈉)對(duì)正畸源性根吸收的作用研究.pdf

1、錯(cuò)(胎)畸形與齲病、牙周病一樣，也是口腔科常見(jiàn)病、多發(fā)病，其發(fā)病率甚高。它不僅影響咀嚼、語(yǔ)言等功能，還會(huì)影響美觀，妨礙社交和個(gè)人的身心健康成長(zhǎng)。隨著社會(huì)的發(fā)展，人們生活質(zhì)量的提高，以及口腔醫(yī)學(xué)知識(shí)的推廣普及，人們對(duì)美的追求越來(lái)越高，對(duì)錯(cuò)(駘)畸形矯治的需求也就越來(lái)越大。正畸通過(guò)對(duì)錯(cuò)位牙齒和頜骨施加矯治力可以矯治絕大部分錯(cuò)(駘)畸形，改善患者面型，因此越來(lái)越受到患者青睞。但是正畸機(jī)械矯治力在移動(dòng)牙齒的同時(shí)不可避免的會(huì)誘發(fā)不同程度的牙根吸收

2、，可直接影響治療效果及牙齒的健康。近年來(lái)，二膦酸鹽(bisphosphonates，BPs)類藥物對(duì)口腔醫(yī)學(xué)特別是正畸學(xué)的影響引起了口腔醫(yī)學(xué)界的重視。二膦酸鹽是焦磷酸鹽(pyrophosphate，PPi)的同型物，因其可選擇性抑制破骨細(xì)胞的活性，過(guò)去常被用于治療過(guò)度骨吸收導(dǎo)致的骨代謝性相關(guān)疾病:如Paget疾病、骨髓瘤和骨質(zhì)疏松等。而正畸矯治力作用下牙周組織的改建也涉及到破骨細(xì)胞，因此國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者對(duì)二膦酸鹽在正畸領(lǐng)域的應(yīng)用做了大量研

3、究，但多數(shù)集中在二膦酸鹽對(duì)正畸牙移動(dòng)的研究上。伊班膦酸鈉(Ibandronate)是第三代二膦酸鹽的代表藥物，是骨吸收的強(qiáng)力抑制劑。由于破牙骨質(zhì)細(xì)胞與破骨細(xì)胞在形態(tài)和功能上極其相似，伊班膦酸鈉是否會(huì)抑制或減輕正畸源性根吸收的發(fā)生昵？本實(shí)驗(yàn)研究在建立大鼠正畸牙齒移動(dòng)動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，結(jié)合牙齒移動(dòng)距離、破牙骨質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量、破骨細(xì)胞分化因子(osteoclastdifferentiationfactor，ODF)的表達(dá)和牙根吸收程度，探討伊班

4、膦酸鈉對(duì)正畸源性根吸收的影響，從而為正畸臨床預(yù)防牙根吸收提供參考。
　　 目的:通過(guò)觀察牙齒移動(dòng)距離的差異、牙周組織中破牙骨質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量變化、ODF的表達(dá)以及牙根吸收程度的差異，研究伊班膦酸鈉對(duì)大鼠正畸源性根吸收的作用。
　　 方法:選取48只SPF級(jí)雌性Wistar大鼠，建立大鼠正畸牙齒移動(dòng)模型，設(shè)置自身對(duì)照，實(shí)驗(yàn)側(cè)為伊班膦酸鈉注射側(cè)，對(duì)照側(cè)為對(duì)側(cè)未打藥側(cè)。在大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙與上切牙之間安裝一0.012英寸鎳鈦拉簧

5、，施加力量控制在60g左右，所有大鼠均于安裝矯治器前三天在實(shí)驗(yàn)側(cè)（大鼠上頜左側(cè)）移動(dòng)牙齒近中腭側(cè)黏骨膜下局部注射50μl伊班膦酸鈉，同時(shí)對(duì)照側(cè)注射50μl0.9％生理鹽水。每三天注射一次直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)第3、7、14天時(shí)各處死16只大鼠，其中隨機(jī)選擇8只用作牙周組織的組織學(xué)切片觀察，另外8只用作牙根吸收情況的掃描電鏡（Scanningelectronmicroscopy，SEM）觀察。前者大鼠被處死后，分離大鼠頭顱骨，用游標(biāo)卡尺(精確

6、度0.02mm)測(cè)量上頜雙側(cè)第一磨牙牙齒移動(dòng)的距離，并制備大鼠第一磨牙及其周圍牙周組織切片，利用HE染色觀察兩側(cè)牙周組織形態(tài)變化及破牙骨質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量，利用免疫組化染色檢測(cè)ODF在牙周組織中的表達(dá)，并采用圖像處理軟件對(duì)兩側(cè)的牙根吸收指數(shù)進(jìn)行分析;后者大鼠被麻醉后完整拔出雙側(cè)上頜第一磨牙，進(jìn)行掃描電鏡樣本制備，電鏡觀察牙根表面吸收陷窩的情況，之后大鼠再被處死。
　　 結(jié)果:
　　 1.成功建立了大鼠正畸牙齒移動(dòng)動(dòng)物模型。

7、r>　　 2.牙齒移動(dòng)距離隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延續(xù)而逐漸增加，實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)的牙齒移動(dòng)均呈現(xiàn)先上升后平緩再上升的趨勢(shì)，即0-3天階段大鼠牙齒快速移動(dòng)，3-7天階段牙齒移動(dòng)呈現(xiàn)平穩(wěn)狀態(tài)，7-14天牙齒又發(fā)生快速移動(dòng)，并且實(shí)驗(yàn)側(cè)牙齒移動(dòng)距離增加幅度小于同期對(duì)照側(cè)。在實(shí)驗(yàn)第3天，實(shí)驗(yàn)側(cè)大鼠的牙齒移動(dòng)距離小于對(duì)照側(cè)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);實(shí)驗(yàn)第7天和14天，實(shí)驗(yàn)側(cè)的牙齒移動(dòng)距離均小于對(duì)照側(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

8、　　 3.從組織切片上可以看出，實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)大鼠第一磨牙壓力側(cè)牙周膜間隙縮窄，牙周膜纖維排列紊亂，牙槽骨和牙根表面均出現(xiàn)蠶食狀的吸收陷窩，陷窩內(nèi)可見(jiàn)多核巨細(xì)胞聚集。在實(shí)驗(yàn)第3天，牙根表面吸收陷窩內(nèi)可見(jiàn)破牙骨質(zhì)細(xì)胞，但不明顯，實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)之間沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05);實(shí)驗(yàn)第7天和14天，實(shí)驗(yàn)側(cè)的破牙骨質(zhì)細(xì)胞數(shù)量均小于對(duì)照側(cè)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≮0.05）。并且實(shí)驗(yàn)側(cè)多數(shù)破牙骨質(zhì)細(xì)胞發(fā)生了細(xì)胞核數(shù)量增多等不同于正常細(xì)胞的形態(tài)

9、變化。
　　 4.實(shí)驗(yàn)側(cè)第3天、7天和14天大鼠第一磨牙牙周組織壓力側(cè)ODF陽(yáng)性表達(dá)程度均低于對(duì)照側(cè)，其中實(shí)驗(yàn)第7天和第14天兩側(cè)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)的ODF陽(yáng)性表達(dá)主要定位于破骨細(xì)胞內(nèi)，其中細(xì)胞質(zhì)內(nèi)和細(xì)胞膜上均可見(jiàn)ODF的陽(yáng)性表達(dá)。
　　 5.實(shí)驗(yàn)側(cè)第3天、7天和14天牙根吸收指數(shù)均小于對(duì)照側(cè)，牙根吸收程度均比對(duì)照側(cè)輕。其中實(shí)驗(yàn)第3天時(shí)，兩側(cè)的牙根吸收都很輕微，吸收程度沒(méi)有顯著差異（P＞

10、0.05）;實(shí)驗(yàn)第7天和第14天兩側(cè)的吸收程度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 6.掃描電鏡示，實(shí)驗(yàn)第3天，實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)的牙根表面均較光滑，質(zhì)地均一，幾乎未見(jiàn)吸收陷窩;實(shí)驗(yàn)第7天，兩側(cè)均見(jiàn)不規(guī)則形狀的吸收陷窩，其中對(duì)照側(cè)吸收陷窩數(shù)量較多、范圍較廣，實(shí)驗(yàn)側(cè)吸收陷窩數(shù)量少，面積小;實(shí)驗(yàn)第14天，兩側(cè)的吸收陷窩數(shù)量均較實(shí)驗(yàn)第7天增多，實(shí)驗(yàn)側(cè)較之對(duì)照側(cè)吸收陷窩數(shù)量少、面積小。
　　 結(jié)論:
　　 1.局部應(yīng)用