腫瘤抑制基因PTEN蛋白、C-erbB-2、ER和PR在乳腺癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重地危害女性健康。目前，乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制仍不完全清楚。1997年發(fā)現(xiàn)的抑癌基因PTEN(phophatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)是繼P53基因之后的與各種腫瘤密切相關(guān)的新的抑癌基因，是第一個(gè)具有磷酸酯酶活性的抑癌基因。本研究目的在于運(yùn)用免疫組化方法探討PTEN在乳腺癌中的表達(dá)情況，通過比較其在乳腺原位癌、浸潤型乳腺癌和乳

2、腺纖維腺瘤中的表達(dá)是否存在差異性，來評價(jià)PTEN對乳腺癌惡性程度以及預(yù)后情況判斷的價(jià)值。同時(shí)，將其與已知的其他乳腺癌預(yù)后因子ER、PR、C-erbB-2相比較，了解其相關(guān)性。從而探討PTEN的不同表達(dá)與乳腺癌不同的臨床病理因素、分期、預(yù)后的關(guān)系和臨床意義。 材料與方法從赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院1995年1月-2000年6月期間手術(shù)切除并術(shù)后行病理學(xué)證實(shí)為浸潤型乳腺癌病436例患者中，隨機(jī)抽取30例，年齡從24歲-85歲，平均年齡47.9

3、歲，小于45歲16例，占53.3％，大于45歲14例，占46.6％；絕經(jīng)前24例，絕經(jīng)后6例；國際TNM臨床分期：II a期9例、Ⅱb期8例、Ⅲ a期8例、Ⅲ b期5例、無IV期患者。腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移14例，無腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移16例。全組病例隨訪截止到2005年10月，30例中有14例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)部位在引流區(qū)域淋巴結(jié)10例，手術(shù)局部復(fù)發(fā)4例；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有23例，其中骨轉(zhuǎn)移8例、肺轉(zhuǎn)移5例、肝轉(zhuǎn)移4例、多器官轉(zhuǎn)移6例。到目前為止，術(shù)后生存期平均63個(gè)

4、月，最長90個(gè)月，最短19個(gè)月，5年生存率64.28％。腫瘤大小最大為7.00cm，最小1.50cm，平均3.99cm。在同樣時(shí)期手術(shù)切除并術(shù)后行病理學(xué)證實(shí)為乳腺原位癌的河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院、北京大學(xué)第一醫(yī)院、赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院病例共83例患者中，隨機(jī)抽取30例。良性對照組：從門診手術(shù)病理證實(shí)為乳腺纖維腺瘤患者中隨機(jī)選擇30例。所有組織經(jīng)10％福爾馬林固定，經(jīng)病理學(xué)復(fù)查確診。本實(shí)驗(yàn)組病例手術(shù)方式均采用國內(nèi)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的乳腺癌改良根治術(shù)，本組病

5、例術(shù)前均未行任何抗腫瘤治療，術(shù)后均按照乳腺癌術(shù)后標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行放、化療治療。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測PTEN、ER、PR、以及C-erbB-2蛋白在全部標(biāo)本中的表達(dá)。PTEN結(jié)果判定(半定量法)：PTEN蛋白的陽性信號主要存在于胞漿中，極少數(shù)存在于細(xì)胞核和核膜上，呈棕黃色顆粒，細(xì)胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細(xì)胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機(jī)記數(shù)100個(gè)細(xì)胞，記錄陽性細(xì)胞數(shù)目，陽性計(jì)數(shù)在1～24個(gè)為PTEN(+)，25～49個(gè)為PTEN(+

6、+)，50-74個(gè)為PTEN(+++)，大于75個(gè)為PTEN(+++)，在分析時(shí)將+～++為低表達(dá)；+++～++++為高表達(dá)。ER、PR結(jié)果判定(半定量法)：細(xì)胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細(xì)胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機(jī)記數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)超過10個(gè)為陽性，陽性細(xì)胞數(shù)小于10個(gè)為陰性C-erbB-2結(jié)果判定(半定量法)：細(xì)胞被染成棕色并明顯高于背景染色者為細(xì)胞陽性，于高倍視野內(nèi)隨機(jī)記數(shù)100個(gè)細(xì)胞，記錄陽性細(xì)胞數(shù)，陽性細(xì)胞數(shù)小于

7、10個(gè)為C-erbB-2陰性：記錄陽性細(xì)胞數(shù)超過10個(gè)為C-erbB-2陽性。其他病理學(xué)指標(biāo)：病理組織學(xué)分化程度根據(jù)Bloom和Richardson(1957)乳腺癌組織學(xué)分級標(biāo)準(zhǔn)而定，分為Ⅰ級，Ⅱ級，Ⅲ級。臨床分期根據(jù)國際TNM分期標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期；其中T為病理學(xué)腫瘤的大小，N為腋窩淋巴結(jié)狀況，M為遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況；Ⅰ期～Ⅱ期為早期，Ⅲ期～Ⅳ期為晚期?；颊吲R床病理資料均來源于存檔病案。乳腺癌的PTEN、C-erbB-2、ER

8、、PR表達(dá)的數(shù)據(jù)處理采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包，采用x2檢驗(yàn)各表達(dá)與臨床病理資料相關(guān)性分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示。P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義。 結(jié)果：PTEN的表達(dá)情況：30例浸潤型乳腺癌中高表達(dá)有13例，高表達(dá)率43.33％；30例原位癌高表達(dá)23例，高表達(dá)率76.67％；30例乳腺纖維腺瘤中PTEN高表達(dá)25例，高表達(dá)率83.33％。浸潤型乳腺癌的PTEN高表達(dá)率與原位

9、癌和乳腺纖維腺瘤有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)。在浸潤型乳腺癌中：PTEN的表達(dá)與腫塊大小、病理分期、復(fù)發(fā)與否無相關(guān)性；而與是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、發(fā)病年齡、絕經(jīng)與否、術(shù)后5年生存期等指標(biāo)相關(guān)。 ER、PR的表達(dá)情況：本組30例浸潤型乳腺癌中ERI(+)/PR(+)表達(dá)有16例，陽性率53.33％，ER(一)/PR(一)表達(dá)有11例，陰性表達(dá)率36.67％；在30例原位癌組中ER(+)/PR(+)表達(dá)有15例，陽性率50.00

10、％，ER(一)/PR(一)表達(dá)有9例，陰性表達(dá)率30.00％。；在30例乳腺纖維腺瘤組中ER(+)/PR(+)表達(dá)有15例，陽性率50.00％ER(一)/PR(一)表達(dá)有10例，陰性表達(dá)率33.33％。在浸潤型乳腺癌中：ER、PR的陽性表達(dá)與腫瘤的大小、分期、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、年齡、絕經(jīng)情況、術(shù)后復(fù)發(fā)、有無遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移等情況均無相關(guān)性；僅與術(shù)后生存期正相關(guān)。 C-erbB-2的表達(dá)情況：在浸潤型乳腺癌、原位癌和乳腺纖維腺瘤中C-erbB-2

11、的陽性率分別為80.00％，53.33％，0。C-erbB-2在浸潤型乳腺癌與乳腺纖維腺瘤兩組中的表達(dá)進(jìn)行比較有顯著性差異(P＜0.01)，在浸潤型乳腺癌與原位癌兩組比較亦有顯著性差異(P＜0.01)，而原位癌與乳腺纖維腺瘤仍有顯著性差異。在浸潤型乳腺癌中：C-erbB-2陽性表達(dá)率隨組織學(xué)分級的增高而增加℃-erbB-2陽性表達(dá)率與分期呈正相關(guān)。但與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等無明顯相關(guān)性。 PTEN與ER、PR、C-erbB-2的

12、關(guān)系：實(shí)驗(yàn)表明，PTEN的高表達(dá)在浸潤型乳腺癌中與ER正相關(guān)，而與PR無相關(guān)性。在乳腺原位癌組正相關(guān)。PTEN與C-erbB-2在乳腺癌中的表達(dá)無相關(guān)性，同時(shí)存在PTEN失表達(dá)和C-erbB-2過表達(dá)的乳腺癌患者腫瘤具有更強(qiáng)的侵襲性，預(yù)后更差。 結(jié)論：腫瘤抑制基因PTEN蛋白在乳腺癌組織中存在表達(dá)的缺失和減弱，并與是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、發(fā)病年齡、絕經(jīng)與否、術(shù)后5年生存期等指標(biāo)相關(guān)。提示其表達(dá)異常與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有

13、關(guān)。在乳腺原位癌和浸潤型乳腺癌PTEN的表達(dá)有差異，而原位癌和乳腺纖維腺瘤的PTEN表達(dá)無明確統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。說明PTEN與乳腺癌的預(yù)后有一定的相關(guān)性。并與腫瘤的進(jìn)展相關(guān)，而與腫瘤的啟動(dòng)關(guān)系并不十分密切，與乳腺癌的侵襲性反相關(guān)。結(jié)合文獻(xiàn)我們認(rèn)為PTEN的檢測對評價(jià)乳腺癌的侵襲性，判斷預(yù)后有意義。 ER、PR、C-erbB-2是目前比較公認(rèn)乳腺癌預(yù)后因子，其測定有助于了解乳腺癌的惡性程度，評價(jià)乳腺癌的預(yù)后。同時(shí)ER、PR的檢測還可以指