熱致相分離法制備組織工程血管支架及生物學(xué)評價(jià).pdf

1、熱致相分離技術(shù)是一種制備納米纖維組織工程支架的有效手段，采用該技術(shù)制備的管狀支架可用于小口徑血管缺損的修復(fù)。但采用左旋聚乳酸(PLLA)單一材料制備的納米纖維血管支架由于缺乏柔性和彈性，力學(xué)強(qiáng)度與天然血管有很大差距，無法滿足臨床需要。為克服這一難題，本論文采用PLLA與彈性體聚（ε-己內(nèi)酯）(PCL)或左旋聚乳酸-聚ε-己內(nèi)酯共聚物(PLCL，50∶50)的混合體系來制備相分離管狀支架。并通過交聯(lián)劑將肝素與納米纖維血管支架表面共價(jià)結(jié)合，

2、提高支架的抗凝血能力。通過培養(yǎng)豬髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞(PIECs)和人血管平滑肌細(xì)胞(HVSCs)對材料的生物相容性進(jìn)行評價(jià)。主要研究分為三個(gè)部分:
　　 1.采用PLLA/PCL及PLLA/PLCL復(fù)合體系制備納米纖維管狀支架。結(jié)果顯示:當(dāng)PLLA/PCL混合體系進(jìn)行相分離時(shí)，支架具有大孔結(jié)構(gòu)，并且孔徑及孔隙率隨著PCL的比例的提高而增大。由于PLLA和PCL不相容，混合聚合物溶液在-80℃發(fā)生相分離。PLLA處于不穩(wěn)定狀態(tài)而發(fā)生旋

3、節(jié)分解相分離，形成均一的納米纖維結(jié)構(gòu);體系中PCL處于亞穩(wěn)狀態(tài)而發(fā)生成核-生長相分離，PCL形成微球并分布于PLLA的納米纖維結(jié)構(gòu)中。部分PCL微球在相分離過程中從支架中逃逸出來，使制備的納米纖維支架具有“海島”狀結(jié)構(gòu)。而在PLLA/PLCL混合體系中，由于兩者具有較好的相容性，發(fā)生相分離時(shí)，能夠形成均一的納米纖維結(jié)構(gòu)，因此制備的血管支架的拉伸力學(xué)性能得到很大提高。
　　 2.將PLLA/PLCL混合比例為40∶60的納米纖維管

4、狀支架進(jìn)行肝素化，肝素與納米纖維支架能夠通過交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合。由于支架表面接有肝素，提高了材料的親水性，降低了蛋白吸附能力。通過甲苯胺藍(lán)染色法定量分析，得出支架上肝素的含量為3.0±0.13μg/cm2，體外凝血實(shí)驗(yàn)表明，表面肝素化支架提高了抗凝血能力。
　　 3.分別采用PIECs和HVSCs細(xì)胞與支架共培養(yǎng)，評價(jià)血管支架的生物相容性。結(jié)果表明PIECs細(xì)胞能在PLLA/PLCL支架表面增殖和生長，細(xì)胞與支架結(jié)合緊密，并且細(xì)胞形