三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)與非整倍體植株再生.pdf

1、紫錐菊（Echinacea purpureaL.）是原產(chǎn)北美的多年生草本植物，因具有抗菌消炎，增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用而在西方國(guó)家受到普遍重視，在中國(guó)則已被用作獸藥原料。新近的研究表明，多倍化是提高紫錐菊藥用成分含量的有效途徑，而非整倍體由于特定染色體的附加或減少，會(huì)使該染色體上的基因劑量增加或減少，從而有可能獲得藥用成分含量較高的株系。多倍體與二倍體的雜交是獲得非整倍體的常用方法，而通過(guò)多倍體的花藥培養(yǎng)也是獲得非整倍體的一種方式。本研究的

2、主要目的，是探索提高三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)獲得非整倍植株效率的可行方法。
　　減數(shù)分裂是形成染色體數(shù)目減半的小孢子的必要過(guò)程，而花藥培養(yǎng)實(shí)質(zhì)上就是培養(yǎng)花藥中的小孢子。在對(duì)三倍體紫錐菊減數(shù)分裂過(guò)程進(jìn)行細(xì)胞學(xué)觀察時(shí)發(fā)現(xiàn)，其減數(shù)分裂中的染色體行為十分紊亂，導(dǎo)致在終變期形成包括單價(jià)體，二價(jià)體，三價(jià)體以及多價(jià)體的異常情況。染色體的平均配對(duì)構(gòu)型為9.73Ⅰ+7.54Ⅱ+2.61Ⅲ+0.07Ⅳ+0.01Ⅴ，在減數(shù)分裂Ⅰ中期大量染色體提前分離；分裂

3、過(guò)程中出現(xiàn)染色體不均等分離、染色體移動(dòng)滯后、染色體橋、核融合等異?，F(xiàn)象；四分體時(shí)期出現(xiàn)三分體以及大量微核；減數(shù)分裂Ⅱ中期赤道板平面的排列方式有相互垂直，相互平行以及同處一平面，導(dǎo)致減數(shù)分裂Ⅱ末期染色體分離方向多樣化。
　　在確定三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)取材適期的試驗(yàn)中，取位于頭狀花序由外及里2～8輪之間的小花進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)小孢子發(fā)育與花蕾外觀，管狀花瓣萼長(zhǎng)度比及雄蕊外觀之間具有密切的相關(guān)性。處于單核后期的小孢子具有較好的離體培養(yǎng)反應(yīng)，

4、此時(shí)期的花蕾外觀為舌狀花未完全展開(kāi)，管狀花瓣萼比為0.54～0.68之間，管狀花和花藥外觀呈現(xiàn)黃色。
　　對(duì)三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基激素種類和濃度進(jìn)行了比較細(xì)致的探討，確定MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L NAA+0.03mg/L TDZ+50g/L蔗糖為最合適的誘導(dǎo)花藥形成愈傷組織的培養(yǎng)基配方，并且培養(yǎng)基中添加一定濃度的TDZ對(duì)改善愈傷組織的質(zhì)量，提高后續(xù)培養(yǎng)的植株再生效率具有重要作用。
　　本研究還對(duì)其他方