辣椒花藥培養(yǎng)胚狀體誘導影響因子探究.pdf

1、辣椒（Capsicum annuum L.）因其營養(yǎng)價值較高，且烹飪方式多種多樣，因此，在我國廣泛種植，是一種重要的蔬菜作物。辣椒屬于常異花授粉作物，天然雜交率較高，所以利用傳統(tǒng)常規(guī)的育種方法培育辣椒新品種，不僅費時費力，而且選育的效率較低。而利用花藥培養(yǎng)可以在短時間內(nèi)獲得純系，進而縮短育種周期、提高育種效率，節(jié)省大量人力物力。而目前，辣椒花藥培養(yǎng)還沒有一種有效的通用的可以直接獲得胚狀體的技術(shù)體系。本實驗是在前人研究的基礎(chǔ)上，通過一系列

2、對辣椒花藥培養(yǎng)胚狀體誘導的因素以及胚狀體誘導成苗技術(shù)進行摸索和探討研究，使辣椒花藥培養(yǎng)體系進一步優(yōu)化，旨在建立簡單、高效的辣椒花藥培養(yǎng)體系。研究結(jié)果如下:
　　1.小孢子發(fā)育時期與辣椒花蕾外部形態(tài)特征之間的關(guān)系
　　以6個不同基因型辣椒為試材，研究辣椒小孢子發(fā)育時期與其花蕾外部形態(tài)特征之間的關(guān)系。結(jié)果表明:辣椒小孢子發(fā)育時期與其花蕾的外部形態(tài)特征以及花藥的顏色之間有一定的對應(yīng)關(guān)系。供試辣椒材料的小孢子處于單核靠邊期時，花瓣微

3、露，花萼與花瓣等長或者花瓣稍微長于花萼，花藥表現(xiàn)為頂端淺紫色，且紫色部分占整個花藥的1/4～1/3。
　　2.辣椒花藥培養(yǎng)影響因子研究
　　以13個不同基因型辣椒材料為試材，對影響花藥培養(yǎng)的因子外源激素、碳源（蔗糖、麥芽糖、葡萄糖）、低溫預處理、外源有機添加物、活性炭及植株開花時期進行研究。研究表明:1）所有供試材料均可誘導出胚狀體，其中有8個基因型可獲得健壯的再生植株，基因型是限制辣椒花藥培養(yǎng)誘導胚狀體的關(guān)鍵因素，不同基因

4、型間出胚率不同，其中‘G201，出胚率最高，達到31.76％。2)不同外源激素處理:NAA比IAA更適合辣椒的花藥培養(yǎng)，且NAA與KT濃度配比以0.5∶1.0效果最佳。3）不同碳源處理:30g/L的蔗糖比30g/L的麥芽糖更適合辣椒花藥培養(yǎng)。4）不同預處理:4℃低溫預處理1-3d有利于胚狀體的誘導，其中以處理2d時的出胚率最高。5）不同外源添加物處理:有利于胚狀體發(fā)生的為50μmol/L的AgNO3和活性炭為4g/L。6）處于初花期和盛

5、花期的花蕾均可誘導成胚狀體，其中初花期花蕾更適合辣椒花藥培養(yǎng)。
　　3.辣椒再生植株的誘導生根和移栽
　　以試驗所獲得的8種基因型的再生植株為試材，對辣椒再生植株生根及馴化移栽技術(shù)進行研究。研究結(jié)果表明:同一品種辣椒在不同激素濃度處理中的生根誘導率有所不同，不同基因型在相同激素濃度中生根率也有差異，且最適合辣椒生根的培養(yǎng)基為:1/2MS+0.15mg/LIBA+30g/L蔗糖+8g/l瓊脂，生根率最高可達100％。生根后的再

6、生植株移栽成活與否是辣椒應(yīng)用于生產(chǎn)的最后一個關(guān)鍵技術(shù)，本文介紹了辣椒再生植株移栽時的馴化、基質(zhì)配制、取苗、消毒以及移栽等技術(shù)。
　　4.再生植株的倍性鑒定
　　以試驗所得到的再生植株為材料，利用根尖染色體鑒定法鑒定其倍性。研究結(jié)果表明:供試材料‘G201’的5株再生植株為單倍體，3株為二倍體;‘G203’的3株再生植株中有2株是單倍體和1株為二倍體;‘G205’、‘G208’和‘G213’的各一株再生植株均單倍體;而‘G21