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1、利用原生質(zhì)體技術(shù)獲得兩個(gè)木耳栽培菌株H<,-e>-1和Ju-1的單核體H<,2>和J<,3>,H<,2>和J<,3>配對(duì)雜交形成雙核體菌株H<,2>J<,3>.H<,2>J<,3>栽培出茹后,收獲其子實(shí)體,通過(guò)單孢分離技術(shù)并結(jié)合核熒光染色技術(shù)獲得其F<,1>子代52個(gè)單核體,單核體和雙核體H<,2>J<,3>均經(jīng)核熒光染色,同工酶分析和RAPD分析予以鑒定.將F<,1>子代及F<,1>子代與雙親菌絲體兩兩配對(duì)培養(yǎng),采用核染料Hoechs
2、t33258對(duì)配對(duì)菌絲的細(xì)胞核染色,在熒光顯微鏡下觀察核相,并結(jié)合普通光學(xué)顯微鏡觀察鎖狀聯(lián)合,鑒別菌絲交配反應(yīng)是否形成雙核體菌絲,統(tǒng)計(jì)其數(shù)量,并經(jīng)卡平方檢驗(yàn),表明木耳屬單因子交配系統(tǒng),同時(shí)測(cè)定了所有F<,1>子代和雙親的交配型.結(jié)合已有的關(guān)于供試材料酯酶等位酶酶譜表型資料,對(duì)酯酶等位酶基因EST-6和交配型基因進(jìn)行綜合遺傳分析,發(fā)現(xiàn)二者獨(dú)立分離,即它們位于不同染色體上.根據(jù)交配型表型將F<,1>子代菌株分成兩群,將每群內(nèi)菌株的DNA等量
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