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文檔簡介
1、<p> 選修3易考知識點背誦</p><p> 專題1 基因工程</p><p><b> 基因工程的概念</b></p><p> ?。ㄒ唬┗蚬こ痰幕竟ぞ?lt;/p><p> 1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)</p><p> ?。?)來源:主
2、要是從原核生物中分離純化出來的。</p><p> ?。?)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有特異性。</p><p> ?。?)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。</p><p> 2.“分子縫合針”——DNA連接酶</p>&
3、lt;p> (1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:</p><p> ?、傧嗤c:都縫合磷酸二酯鍵。</p><p> ?、趨^(qū)別:E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。</p>&l
4、t;p> (2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。</p><p> 3.“分子運輸車”——載體</p><p> ?。?)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。</p><p>
5、②具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。</p><p> ?、劬哂袠?biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。</p><p> ?。?)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。</p><p> (3)其它載體: 噬菌體、動植物病毒</p><p> (二)基
6、因工程的基本操作程序</p><p> 第一步:目的基因的獲取</p><p> 1.目的基因是指:是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因</p><p> 2.獲取目的基因的方法基因文庫 、人工合成、 PCR技術(shù)</p><p> 3.原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。<
7、/p><p> 4.PCR技術(shù)擴增目的基因</p><p> ?。?)原理:DNA雙鏈復(fù)制</p><p> (2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。</p><p> 第二步:重組DNA分子</p>
8、;<p> 1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。</p><p> 2.組成:目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因+復(fù)制原點</p><p> (1)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。</p><
9、p> ?。?)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。</p><p> ?。?)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。</p><p> 第三步:轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞</p><p> 1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。&
10、lt;/p><p> 2.常用的轉(zhuǎn)化方法:</p><p> 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。</p><p> 將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是 顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是 受精卵。</p><p> 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是 繁殖
11、快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少 ,最常用的原核細(xì)胞是 大腸桿菌 ,其轉(zhuǎn)化方法是:先用 Ca2+ 處理細(xì)胞,使其成為 感受態(tài)細(xì)胞 ,再將 重組表達(dá)載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。</p><p> 3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。</p><p> 第四步:目的
12、基因的檢測和表達(dá)</p><p> 1.首先要檢測 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。</p><p> 2.其次還要檢測 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與 mRNA雜交。</p><p> 3.最后檢測 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì),用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行
13、抗原-抗體雜交。</p><p> 4.有時還需進(jìn)行 個體生物學(xué)水平的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。</p><p> (三)基因工程的應(yīng)用</p><p> 1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。</p><p> 2.動物基因工程:提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物
14、。</p><p> 3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。</p><p> (四)蛋白質(zhì)工程的概念</p><p> 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)
15、)</p><p> 轉(zhuǎn)錄 翻譯</p><p><b> 蛋白質(zhì)的改造</b></p><p> 大改:設(shè)計并制造自然界中不存在的全新蛋白質(zhì),使之具有特定的氨基酸序列、空間結(jié)構(gòu)和預(yù)期功能</p><p> 中改:在蛋白質(zhì)分子中替代某一個肽段或一個特定的結(jié)構(gòu)域</p><p&
16、gt; 小改:通過基因工程中的定點誘變技術(shù),有目的改造蛋白質(zhì)分子中某活性部位的1個或幾個氨基酸殘基,以改善蛋白質(zhì)的性質(zhì)和功能</p><p> 定點誘變技術(shù)是改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的核心之一</p><p> PCR技術(shù)是基因定點誘變的常用方法</p><p> 蛋白質(zhì)工程與基因工程的關(guān)系</p><p><b> 專題2 細(xì)胞
17、工程</b></p><p><b> 一、植物細(xì)胞工程 </b></p><p> ?。ㄒ唬┲参锝M織培養(yǎng)技術(shù)</p><p> 1、理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性</p><p> 細(xì)胞具有全能性的原因:每個細(xì)胞都含有該物種的全套遺傳物質(zhì)</p><p> 全能性表達(dá)的難易程度
18、:受精卵、生殖細(xì)胞、干細(xì)胞、體細(xì)胞;植物細(xì)胞、動物細(xì)胞,請排序受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞;植物細(xì)胞>動物細(xì)胞</p><p> 2、過程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞(又稱外植體) ―→ 愈傷組織 ―→胚狀體―→試管苗 ―→植物體 </p><p> 愈傷組織的特點:一團沒有特定結(jié)構(gòu)和功能不處于旺盛分裂狀態(tài)的薄壁細(xì)胞<
19、/p><p> 脫分化:已經(jīng)分化的植物細(xì)胞形成愈傷組織的過程</p><p> 再分化:愈傷組織生長一段時間后,再移植到新的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),從新誘導(dǎo)分化形成根和芽等器官的過程。</p><p> 3、用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。</p><p><b> A植物繁殖</b&g
20、t;</p><p> 微型繁殖:可以高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖</p><p> 作物脫毒:采用莖尖組織培養(yǎng)來除去病毒(因為植物分生區(qū)附近的病毒極少或沒有)</p><p> 人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。優(yōu)點:完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,不受季節(jié)的限制;方便儲藏和運輸</p>&
21、lt;p> 人工種子的結(jié)構(gòu)包括:人工種皮、胚狀體和人工胚乳。</p><p><b> B作物新品種培育</b></p><p><b> 單倍體育種:</b></p><p> a過程:植株(AaBb)通過減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對花粉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)(技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到
22、單倍體植株;對其幼苗時期進(jìn)行秋水仙素處理;得到了正常的純合二倍體植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。</p><p> b 優(yōu)點:明顯縮短育種年限</p><p> ?。ǘ┲参锛?xì)胞培養(yǎng):通過能夠產(chǎn)生對人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的次級代謝產(chǎn)物。</p><p> 注意:1、原理:細(xì)胞增殖</p>&
23、lt;p> 2、大規(guī)模獲得細(xì)胞產(chǎn)品應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)到愈傷組織階段</p><p> ?。ㄈ┲参矬w細(xì)胞雜交技術(shù)</p><p><b> 1、過程:</b></p><p> 2、植物誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激等?;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。</p><p> ?。?)注意:a生理
24、基礎(chǔ):細(xì)胞膜流動性,植物細(xì)胞全能性</p><p> b植物細(xì)胞融合前需用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁</p><p> ?。?)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。</p><p><b> 二、動物細(xì)胞工程</b></p><p> 一般包括動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、體細(xì)胞克隆、細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備等技
25、術(shù)</p><p><b> ?。ㄒ唬﹦游锛?xì)胞培養(yǎng)</b></p><p> ?。?)概念:動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和繁殖。</p><p> ?。?)動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:</p><p> 取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪
26、碎→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。</p><p> (3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。</p><p> ?。?)動物細(xì)胞培養(yǎng)需要
27、滿足以下條件</p><p> ?、贌o菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。</p><p> ②營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。</p><p> ?、蹨囟龋哼m宜溫度:哺乳動物多
28、是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。</p><p> ?、軞怏w環(huán)境:95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。</p><p> (5)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。</p><p> (6)動物細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)的主要區(qū)別動物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰
29、蛋白酶等是組織塊中的細(xì)胞分散</p><p> ?。ǘ﹦游矬w細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物</p><p> 1、哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。</p><p> 2、選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營養(yǎng)豐富。</p><p> 3、體細(xì)胞核移植的大
30、致過程是:(右圖)</p><p> 注意:(1)細(xì)胞核移植胚胎移植(2)原理:細(xì)胞核全能性 克隆羊性別:白面綿羊</p><p> 3、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:</p><p> ①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; ②保護瀕危物種,增大存活數(shù)量;</p><p> ?、凵a(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白; ④作為異種
31、移植的供體;⑤用于組織器官的移植等。</p><p> 4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題:</p><p> 克隆動物存在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。</p><p><b> (三)動物細(xì)胞融合</b></p><p> 1、動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)
32、體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。</p><p> 2、動物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。</p><p> 3、動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:(重點記憶)</p><p><b> 4.單克隆抗體</b></p>
33、<p> ?。?)a.抗體:一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。</p><p> b.B淋巴細(xì)胞特點:可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖;</p><p> 骨髓瘤細(xì)胞特點:能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體。</p><p> (2)單克隆抗體的制備過程:</p><p> ?。?)雜交瘤
34、細(xì)胞的特點:既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的特異性抗體。</p><p> ?。?)單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,并能大量制備。</p><p> (5)單克隆抗體的作用:</p><p> ?、?作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。</p><p> ?、?用于治
35、療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”(連接上抗癌藥物的單克隆抗體),也有少量用于治療其它疾病。</p><p><b> 補充:</b></p><p> 淋巴因子中的干擾素是治療病毒的特效藥,通常只能從體內(nèi)獲得,且數(shù)量非常的少,為了在體外獲得大量的干擾素,我們可以用鼠的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞與其骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,進(jìn)而從小鼠的腹水中或從培養(yǎng)液中提取
36、。</p><p> 干擾素是由效應(yīng)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,所以在進(jìn)行細(xì)胞融合時,選用的是效應(yīng)T淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞。</p><p><b> 專題3 胚胎工程</b></p><p> ?。ㄒ唬┥臣?xì)胞的發(fā)生和受精作用</p><p> 1.精子與卵細(xì)胞的發(fā)生過程</p><p> ?。?)
37、精子的發(fā)生:精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過程中,細(xì)胞核為精子頭的主要部分,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)榫拥奈?,線粒體在尾基部形成線粒體鞘膜,其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。[線粒體為精子運動提供能量]</p><p> ?。?)卵子的發(fā)生:卵原細(xì)胞演變成初級卵母細(xì)胞[被卵泡細(xì)胞包圍],減一分裂在排卵前后完成,形成次級卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精;減二分裂是在受精過程中完成的。</
38、p><p> ?。?)精子與卵細(xì)胞發(fā)生過程比較</p><p><b> 2.受精作用:</b></p><p> (1)受精場所:是母體的輸卵管上段</p><p><b> ?。?)受精前的準(zhǔn)備</b></p><p> a.精子獲能(在雌性動物生殖道內(nèi));</p
39、><p> b.卵子的準(zhǔn)備(排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減數(shù)第二次分裂中期才具備受精能力);</p><p> ?。?)受精過程[卵子周圍的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi):放射冠、透明帶、卵黃膜],</p><p> a頂體反應(yīng):精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。</p><p> b透明帶反應(yīng):頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精
40、子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障];</p><p> c卵黃膜的封閉作用:精子外膜和卵黃膜融合,精子入卵后,卵黃膜會拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障];精子尾部脫落,原有核膜破裂形成雄原核,同時卵子完成減二分裂,形成雌原核</p><p> [注意:受精標(biāo)志是第二極體的形成;受精完成標(biāo)志是雌雄原核融
41、合成合子](二)動物胚胎發(fā)育的基本過程</p><p> 1.胚胎發(fā)育是指受精卵發(fā)育成_______________的過程</p><p> 2.胚胎發(fā)育的各個階段的特點:</p><p> ?。?)卵裂期:特點:細(xì)胞有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體體積并不增加。 </p><p> ?。?)桑椹胚:特點:胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32
42、個左右時,胚胎形成致密的細(xì)胞團,形似桑椹。是全能細(xì)胞。</p><p> ?。?)囊 胚:特點:細(xì)胞開始出現(xiàn)分化(該時期細(xì)胞的全能性仍比較高)。聚集在胚胎一端個體較大的細(xì)胞群稱為內(nèi)細(xì)胞團,將來發(fā)育成胎兒的各種組織。而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注:囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出來,這一過程叫孵化]</p><p> ?。?)原腸胚:特點:有了三胚層的
43、分化,具有原腸腔。</p><p> (三) 胚胎工程的應(yīng)用</p><p> 胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),由體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)、胚胎冷凍保存技術(shù)和性別控制技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。</p><p> 1.體外受精和胚胎的早期培養(yǎng)</p><p> (1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):&
44、lt;/p><p> 主要方法:用促性腺激素處理,使其排出更多的卵子,然后,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞;第三種方法是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精。</p><p> (2) 精子的采集和獲能:在體外受精前,要對精子進(jìn)行獲能處理。
45、</p><p> (3) 受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。</p><p> (4)胚胎的早期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機鹽和有機鹽外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可將其取出向受體
46、移植或冷凍保存。不同動物胚胎移植的時間不同。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚階段才能進(jìn)行移植,小鼠、家兔等實驗動物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在8~16個細(xì)胞階段移植。)</p><p><b> 2.胚胎移植</b></p><p> (1)胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物
47、的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體稱為“供體”,接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種,作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種。)</p><p> 地位:如轉(zhuǎn)基因、核移植,或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎,都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。</p><p> (2) 胚胎移植的意義:大大縮短了供體本身的繁殖周期,
48、充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。</p><p> (3) 生理學(xué)基礎(chǔ):①動物發(fā)情排卵后,同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。</p><p> ?、谠缙谂咛ピ谝欢〞r間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。</p><p> ③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體的存活提供了可能
49、。</p><p> ?、芄w胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。</p><p> (4) 基本程序主要包括:</p><p> ①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體,有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。&l
50、t;/p><p><b> ?、谂浞N或人工授精。</b></p><p> ③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。</p><p><b> ④對胚胎進(jìn)行移植
51、。</b></p><p> ?、菀浦埠蟮臋z查。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。</p><p><b> 3.胚胎分割</b></p><p> (1)概念:是指采用機械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。</p><p> (2)意義:來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物
52、質(zhì),屬于無性繁殖。</p><p> (3)材料:發(fā)育良好,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。(桑椹胚至囊胚的發(fā)育過程中,細(xì)胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割。)</p><p> (4)操作過程:對囊胚階段的胚胎分割時,要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。</p><p> (四)胚胎干細(xì)胞及其應(yīng)用</p><
53、p><b> 1.干細(xì)胞分類</b></p><p> (1).按照分化潛能的大小分______________(例 ______________ _____________)、______________(例________________)、______________(例_____________)。</p><p> (2).按來源分_______
54、____________、_____________________。</p><p><b> 2.胚胎干細(xì)胞</b></p><p> (1)、哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。</p><p> (2)、具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能
55、性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化,可進(jìn)行冷凍保存,也可進(jìn)行遺傳改造。</p><p> (3)、胚胎干細(xì)胞的主要用途是:(了解)
56、 </p><p> ①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律;</p><p> ②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料,在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子,如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時,就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化,這為揭示細(xì)
57、胞分化和細(xì)胞凋亡的機理提供了有效的手段;</p><p> ?、劭梢杂糜谥委熑祟惖哪承╊B疾,如帕金森綜合癥、少年糖尿病等;</p><p> ?、芾每梢员徽T導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能;</p><p> ⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,通過ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,定向培育出人造組織器官,用于器官移植,解決供體器官
58、不足和器官移植后免疫排斥的問題。</p><p><b> 專題四 生態(tài)工程</b></p><p><b> 一、生態(tài)工程的概念</b></p><p> 生態(tài)工程是指應(yīng)用生態(tài)系統(tǒng)中物種共生與物質(zhì)循環(huán)再生原理、結(jié)構(gòu)與功能相協(xié)調(diào)原則,結(jié)合系統(tǒng)分析的最優(yōu)化方法而設(shè)計的促進(jìn)物質(zhì)被分層多級利用的生產(chǎn)工藝系統(tǒng)。</p
59、><p> 二、生態(tài)工程的基本原理</p><p> 生態(tài)工程的設(shè)計所依據(jù)的是生態(tài)學(xué)和工程學(xué)原理</p><p><b> 1、生態(tài)學(xué)原理</b></p><p> ?。?)物種共生原理:自然界任何一種生物都不能離開其他生物而單獨生存和繁衍,存在著共生、競爭等關(guān)系,這構(gòu)成了生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)和反饋機制。</p&g
60、t;<p> ?。?)生態(tài)位原理:生態(tài)系統(tǒng)中各種生物都占有一定的生態(tài)位,依據(jù)此原理,可構(gòu)建一個具有多層次、多種群的穩(wěn)定而高效的生態(tài)系統(tǒng)。</p><p> (3)食物鏈原理:食物鏈/食物網(wǎng)是實現(xiàn)生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)、能量流動和信息傳遞的基礎(chǔ),物種間的食物關(guān)系是生態(tài)工程設(shè)計的重要因素。</p><p> (4)物種多樣性原理:生態(tài)系統(tǒng)中生物多樣性越高,抵抗力穩(wěn)定性越陷越高 ,
61、生態(tài)系統(tǒng)就越穩(wěn)定 。(如“三北防護林”蟲害、珊瑚礁區(qū)的生機)</p><p><b> 2、工程學(xué)原理</b></p><p> ?。?)物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù),分層分級利用。我國古代的“無廢棄物農(nóng)業(yè)”——利用收集到的一切可能的有機物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C肥料,改善了土壤結(jié)構(gòu),培育了土壤微生物,實現(xiàn)了N、P、K等元素的循環(huán)利用。</p>&
62、lt;p> ?。?)協(xié)調(diào)與平衡原理:要處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,生態(tài)系統(tǒng)中的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力(環(huán)境容納量)的限度。太湖等水體富營養(yǎng)化,導(dǎo)致水葫蘆和藻類瘋長現(xiàn)象;西北衰敗的楊樹和繁茂的當(dāng)?shù)貥浞N間的大反差。</p><p> ?。?)整體性原理:生態(tài)工程建設(shè),不但要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,還要考慮到社會和經(jīng)濟等系統(tǒng)的影響力。只有應(yīng)用整體性原理,才能統(tǒng)一協(xié)調(diào)當(dāng)前與長遠(yuǎn)、局部與整體、開發(fā)與環(huán)境建設(shè)之間
63、的關(guān)系,保障生態(tài)系統(tǒng)的平衡與穩(wěn)定。</p><p> 三、生態(tài)工程建設(shè)的基本過程</p><p> 1.生態(tài)工程建設(shè)的核心環(huán)節(jié)是技術(shù)設(shè)計.</p><p> 2.生態(tài)工程設(shè)計的方法及實例</p><p> ?。?)食物鏈(網(wǎng))的“相接”,如稻田養(yǎng)魚農(nóng)業(yè)生態(tài)工程。</p><p> (2)食物鏈(網(wǎng))的“加環(huán)”,
64、如玉米芯的充分利用。</p><p> 3.生態(tài)工程在設(shè)計時要考慮到有利于人和自然兩方面,突出低消耗、多效益、可持續(xù)的特征。</p><p> 二、我國生態(tài)工程建設(shè)的實例</p><p><b> 1.治污生態(tài)工程</b></p><p> (1)內(nèi)容:主要涉及固體、液體、有機廢物的處理,生態(tài)肥料的研制與試用,湖
65、區(qū)污染的生態(tài)治理,塑料的再生利用。</p><p> ?。?)實例——“人工濕地”生態(tài)工程:</p><p> ?。?)濕地的重要特點之一是生物多樣性豐富,濕地生態(tài)系統(tǒng)具有較強的 功能,被譽為“地球之腎”。</p><p> ?。?)“人工濕地”的凈化作用是通過濕地環(huán)境中所發(fā)生的物理、化學(xué)和生物作用的綜合效應(yīng)實現(xiàn)的,由不同類型的水生植物和微生物的共同作用來
66、完成。</p><p> (3)水生植物可吸收、轉(zhuǎn)化污水中的N、P等物質(zhì),還能促進(jìn)細(xì)菌等微生物對污水的處理和凈化。</p><p> 【拓展】人工濕地是一個綜合的生態(tài)系統(tǒng),它應(yīng)用生態(tài)系統(tǒng)中物種共生、物質(zhì)循環(huán)再生原理,結(jié)構(gòu)與功能協(xié)調(diào)原則,在促進(jìn)廢水中污染物質(zhì)良性循環(huán)的前提下,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境的再污染,獲得污水處理與資源化的最佳效益。</p><p>
67、;<b> 2.生態(tài)恢復(fù)工程</b></p><p> (1)生態(tài)恢復(fù)工程的第一步是恢復(fù)植被.</p><p><b> (2)實例</b></p><p> a.礦山廢棄地生態(tài)恢復(fù)工程:</p><p> 在礦區(qū)廢棄地的生態(tài)修復(fù)中,植被要注意選擇生長快和抗逆性強的樹種,優(yōu)先選擇負(fù)擔(dān)樹種,
68、盡量選擇適應(yīng)性強的鄉(xiāng)土樹種和先鋒樹種,注意樹種的多功能效益。</p><p><b> b.西部的生態(tài)治理</b></p><p> 水土流失是西部生態(tài)問題中最本質(zhì)、最突出的矛盾。</p><p><b> 3.生態(tài)農(nóng)業(yè)工程</b></p><p> 生態(tài)農(nóng)業(yè)以保持生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)平衡為主導(dǎo)思
69、想,促進(jìn)物質(zhì)在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)和重復(fù)使用,以最少的投入獲取最大的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益。</p><p><b> 填空</b></p><p> 選修3易考知識點背誦</p><p> 專題1 基因工程</p><p><b> 基因工程的概念P9</b></p><
70、;p> ?。ㄒ唬┗蚬こ痰幕竟ぞ?lt;/p><p> 1.“分子手術(shù)刀”——--_____________________________</p><p> (1)來源:主要是從___________________中分離純化出來的。</p><p> (2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的_
71、__________斷開,因此具有___________________。</p><p> (3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:___________和__________________。</p><p> 2.“分子縫合針”——____________________</p><p> (1)兩種DNA連接酶(E·col
72、iDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:</p><p> ?、傧嗤c:都縫合____________________________。</p><p> ②區(qū)別:E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。</p><p>
73、(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。</p><p> 3.“分子運輸車”——______________________</p><p> (1)載體具備的條件:①___________________________
74、____________。</p><p> ?、赺_______________________________________</p><p> ③________________________________________</p><p> ?。?)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DN
75、A分子。</p><p> ?。?)其它常見載體________________________________________</p><p> (二)基因工程的基本操作程序</p><p> 第一步:____________________________________</p><p> 1.目的基因是指:____________
76、_______________________。</p><p> 2.獲取目的基因的方法____________ _________________ _____________</p><p> 3.原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。</p><p> 4.PCR技術(shù)擴增目的基因</p&
77、gt;<p> (1)原理:DNA雙鏈復(fù)制</p><p> ?。?)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。</p><p> 第二步:____________________________________</p><p&g
78、t; 1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。</p><p> 2.組成:_____________________________________</p><p> ?。?)啟動子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。</p>
79、<p> (2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。</p><p> (3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中_______________,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是___________________。</p><p> 第三步____________________________________</p>
80、;<p> 1.轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。</p><p> 2.常用的轉(zhuǎn)化方法:</p><p> 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是_____________,其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。</p><p> 將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是_______________
81、。此方法的受體細(xì)胞多為</p><p> _________________________</p><p> 2.目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少 ,最常用的原核細(xì)胞是 _______________ ,其轉(zhuǎn)化方法是:先用 Ca2+ 處理細(xì)胞,使其成為 感受態(tài)細(xì)胞 ,再將 重組表達(dá)載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混
82、合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。</p><p> 3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。</p><p> 第四步:目的基因的檢測和表達(dá)</p><p> 1.首先要檢測 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)。</p><p&
83、gt; 2.其次還要檢測 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采用 用標(biāo)記的目的基因作探針與 mRNA雜交。</p><p> 3.最后檢測 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì),用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。</p><p> 4.有時還需進(jìn)行 個體生物學(xué)水平的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。</p><p> ?。ㄈ┗?/p>
84、因工程的應(yīng)用</p><p> 1.植物基因工程:_______________________________________________________________________________________________________________</p><p> 2.動物基因工程:_______________________________________
85、______________________________________________________________</p><p> 3.基因治療:概念________________________________________________</p><p> 基因檢測原理__________________________________________</p&
86、gt;<p> 作用____________________________________________________________</p><p> ?。ㄋ模┑鞍踪|(zhì)工程的概念</p><p> 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工
87、程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))</p><p> 轉(zhuǎn)錄 翻譯</p><p><b> 蛋白質(zhì)的改造</b></p><p> _____:設(shè)計并制造自然界中不存在的全新蛋白質(zhì),使之具有特定的氨基酸序列、空間結(jié)構(gòu)和預(yù)期功能</p><p> _____:在蛋白質(zhì)分子中替代某一個肽段或一
88、個特定的結(jié)構(gòu)域</p><p> _____:通過基因工程中的定點誘變技術(shù),有目的改造蛋白質(zhì)分子中某活性部位的1個或幾個氨基酸殘基,以改善蛋白質(zhì)的性質(zhì)和功能</p><p> _______________是改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的核心之一</p><p> __________是基因定點誘變的常用方法</p><p> 蛋白質(zhì)工程與基因工程
89、的關(guān)系</p><p><b> 專題2 細(xì)胞工程</b></p><p><b> 一、植物細(xì)胞工程 </b></p><p> ?。ㄒ唬┲参锝M織培養(yǎng)技術(shù)</p><p> 1、理論基礎(chǔ)(原理):_____________</p><p> 細(xì)胞具有全能性的原因:
90、_______________________________________</p><p> 全能性表達(dá)的難易程度:受精卵、生殖細(xì)胞、干細(xì)胞、體細(xì)胞;植物細(xì)胞、動物細(xì)胞,請排序_________________________________;___________________</p><p> 2、過程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞(又稱_______) ―→ 愈傷組織 ―→胚
91、狀體―→試管苗 ―→植物體 </p><p> 愈傷組織的特點:____________________________________________________</p><p> 脫分化:___________________________________________</p><p> 再
92、分化_________________________________________________________________________</p><p> 3、用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。</p><p><b> A植物繁殖</b></p><p> 微型繁殖:可以高效快速地實
93、現(xiàn)種苗的大量繁殖</p><p> 作物脫毒:采用莖尖組織培養(yǎng)來除去病毒(因為植物分生區(qū)附近的病毒極少或沒有)</p><p> 人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。優(yōu)點:完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,不受季節(jié)的限制;方便儲藏和運輸</p><p> 人工種子的結(jié)構(gòu)包括:________、_______和_
94、_______。</p><p><b> B作物新品種培育</b></p><p><b> 單倍體育種:</b></p><p> a過程:植株(AaBb)通過減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對花粉進(jìn)行__________(技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到單倍體植株;對其幼苗時期進(jìn)行________
95、__處理;得到了正常的_________植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。</p><p> b 優(yōu)點:_______________</p><p> (二)植物細(xì)胞培養(yǎng):通過能夠產(chǎn)生對人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的__________產(chǎn)物。</p><p> 注意:1、原理:__________</p
96、><p> 2、大規(guī)模獲得細(xì)胞產(chǎn)品應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)到____________階段</p><p> (三)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)</p><p><b> 1、過程:</b></p><p> 2、植物誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激等。化學(xué)法一般是用_____________作為誘導(dǎo)劑。</p&g
97、t;<p> (3)注意:a生理基礎(chǔ):_______________,_______________</p><p> b植物細(xì)胞融合前需用___________和___________除去細(xì)胞壁</p><p> (3)意義:__________________ ____</p><p><b> 二、動物細(xì)胞工程</b&g
98、t;</p><p> 一般包括__________________________________________________________________等技術(shù)</p><p><b> (一)動物細(xì)胞培養(yǎng)</b></p><p> ?。?)概念:動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基
99、中,讓這些細(xì)胞生長和繁殖。</p><p> ?。?)動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:</p><p> 取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用__________處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行_______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)_________培養(yǎng)。</p><p> ?。?)細(xì)胞貼壁和接
100、觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為_________________ 。</p><p> ?。?)動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件</p><p> ①無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止
101、代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。</p><p> ②營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。</p><p> ③溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。</p><p> ?、軞怏w環(huán)境:95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
102、</p><p> (5)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。</p><p> (6)動物細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)的主要區(qū)________________________________________________</p><p> (二)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物</p><p&
103、gt; 1、哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。</p><p> 2、選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營養(yǎng)豐富。</p><p> 3、體細(xì)胞核移植的大致過程是:(右圖)</p><p> 注意:(1)__________________ (2)原理:_________
104、全能性克隆羊性別:________</p><p> 3、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:</p><p> ?、偌铀偌倚筮z傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; ②保護瀕危物種,增大存活數(shù)量;</p><p> ③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白; ④作為異種移植的供體;</p><p> ?、萦糜诮M織器官的移植等。</p><p>
105、 4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題:</p><p> 克隆動物存在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。</p><p><b> (三)動物細(xì)胞融合</b></p><p> 1、動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素________ _______________
106、等。</p><p> 2、動物細(xì)胞融合的意義:克服了__________________,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。</p><p> 3、動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:(重點記憶)</p><p><b> 4.單克隆抗體</b></p><p> (1)a.抗體:一個
107、B淋巴細(xì)胞只分泌一種_____________。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。</p><p> b.B淋巴細(xì)胞特點:可以產(chǎn)生________,但不能無限增殖;</p><p> 骨髓瘤細(xì)胞特點:能__________,但不能產(chǎn)生抗體。</p><p> (2)單克隆抗體的制備過程:</p><p> ?。?)雜交瘤細(xì)胞
108、的特點:既能大量______,又能產(chǎn)生_________________。</p><p> ?。?)單克隆抗體的優(yōu)點:_______________________________________________。</p><p> ?。?)單克隆抗體的作用:</p><p> ① 作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)
109、確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。</p><p> ?、?用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”(_____________________________),也有少量用于治療其它疾病。</p><p><b> 補充:</b></p><p> 淋巴因子中的干擾素是治療病毒的特效藥,通常只能從體內(nèi)獲得,且數(shù)量非常的少
110、,為了在體外獲得大量的干擾素,我們可以用鼠的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞與其骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,進(jìn)而從小鼠的腹水中或從培養(yǎng)液中提取。</p><p> 干擾素是由效應(yīng)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,所以在進(jìn)行細(xì)胞融合時,選用的是效應(yīng)T淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞。</p><p><b> 專題3 胚胎工程</b></p><p> ?。ㄒ唬┥臣?xì)胞的發(fā)生和受精作用<
111、/p><p> 1.精子與卵細(xì)胞的發(fā)生過程</p><p> ?。?)精子的發(fā)生:精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過程中,細(xì)胞核為精子頭的主要部分,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)榫拥奈玻€粒體在尾基部形成線粒體鞘膜,其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。[線粒體為精子運動提供能量]</p><p> ?。?)卵子的發(fā)生:卵原細(xì)胞演變成初級卵母細(xì)胞[被卵泡細(xì)胞包
112、圍],減一分裂在_______________,形成次級卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精;減二分裂是在_________過程中完成的。</p><p> ?。?)精子與卵細(xì)胞發(fā)生過程比較</p><p><b> 2.受精作用:</b></p><p> (1)受精場所:是母體的______________</p><
113、;p><b> (2)受精前的準(zhǔn)備</b></p><p> a.精子獲能(在雌性動物生殖道內(nèi));</p><p> b.卵子的準(zhǔn)備(排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到_______________才具備受精能力);</p><p> ?。?)受精過程[卵子周圍的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi):放射冠、透明帶、卵黃膜],</p><
114、;p> a頂體反應(yīng):精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。</p><p> B_________:頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障];</p><p> C__________________:精子外膜和卵黃膜融合,精子入卵后,卵黃膜會拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程[它是防
115、止多精子入卵受精的第二道屏障];精子尾部脫落,原有核膜破裂形成雄原核,同時卵子完成減二分裂,形成雌原核</p><p> [注意:受精標(biāo)志是___________的形成;受精完成標(biāo)志____________________</p><p> ?。ǘ﹦游锱咛グl(fā)育的基本過程</p><p> 1.胚胎發(fā)育是指受精卵發(fā)育成_______________的過程<
116、/p><p> 2.胚胎發(fā)育的各個階段的特點:</p><p> (1)卵裂期:特點:細(xì)胞進(jìn)行______分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體體積并不增加。 </p><p> (2)桑椹胚:特點:胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個左右時,胚胎形成致密的細(xì)胞團,形似桑椹,是______細(xì)胞。</p><p> ?。?)囊胚:特點:細(xì)胞開始出現(xiàn)分化(
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