肉雞呼吸道菌群分子生物學(xué)分析及芽孢桿菌Pab02噴霧劑的初步應(yīng)用研究.pdf

1、本文采用三種分子生物學(xué)方法(ERIC-PCR-AGE、ERIC-PCR-DGGE和V3-PCR-DGGE)聯(lián)合活菌計(jì)數(shù)法分析肉雞呼吸道菌群結(jié)構(gòu)的多樣性，枯草芽孢桿菌Pab02噴霧劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和呼吸道菌群的影響以及Pab02預(yù)防和治療金黃色葡萄球菌感染的效果，結(jié)果如下：
　　 1.選取48只7日齡健康肉公雞，隨機(jī)分為2組，每組24只，CK組為對(duì)照組，P組為噴霧芽孢桿菌Pab02組。P組動(dòng)物房?jī)?nèi)每日8時(shí)噴霧1ml/m3的Pab0

2、2制劑(10°cfu/ml)，28日齡時(shí)對(duì)肉雞稱重。結(jié)果與CK組相比，P組凈增重提高了9.40g，平均日增重提高了2.68g，全期耗料降低125g，平均日耗料降低5.59g，料肉比降低0.02，但差異性均不顯著(P＞0.05)。結(jié)果表明通過噴霧枯草芽孢桿菌Pab02對(duì)肉雞的采食量、日增重、料肉比等生長(zhǎng)性能有所提高，但無明顯作用。
　　 2.采用活菌計(jì)數(shù)法和三種分子生物學(xué)分析法對(duì)28和49日齡肉雞呼吸道細(xì)菌結(jié)構(gòu)及多樣性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)

3、果，49日齡時(shí)呼吸道細(xì)菌總數(shù)略高于28日齡時(shí)；喉部的細(xì)菌總數(shù)比氣管高一個(gè)數(shù)量級(jí)，喉部細(xì)菌總數(shù)為106cfu/g，氣管細(xì)菌總數(shù)為105cfu/g;噴霧Pab02后，喉部細(xì)菌數(shù)顯著增高(P＜0.05)，氣管細(xì)菌數(shù)量略有增多(P＞0.05)：49日齡時(shí)呼吸道各段的條帶數(shù)量顯著多于28日齡(P＜0.05)，兩個(gè)日齡段之間呼吸道各段菌群相似性為59％～84％；喉部的條帶數(shù)量顯著多于氣管(P＜0.05)，喉與氣管的菌群相似性為60％～84％。說明，

4、肉雞在49日齡時(shí)，呼吸道菌群多樣性均顯著高于28日齡時(shí)，但兩日齡之間呼吸道菌群相似性仍然很高；喉部的菌群多樣性顯著高于氣管，但兩者之間的菌群相似性仍然很高。噴霧Pab02后，喉部的條帶數(shù)顯著增多(P＜0.05)，相似性提高了6～16個(gè)百分點(diǎn)；氣管的條帶數(shù)量變化不顯著(P＞0.05)，相似性提高了11～16個(gè)百分點(diǎn)。說明噴霧Pab02能增加呼吸道細(xì)菌數(shù)量和多樣性，并能提高菌群的相似性，但是對(duì)不同部位的調(diào)節(jié)能力不同，對(duì)肉雞喉部的調(diào)節(jié)作用較大

5、，對(duì)氣管的調(diào)節(jié)作用較弱。
　　 3.利用金色葡萄球菌G1分別通過滴鼻感染兩組肉雞，然后采用活菌計(jì)數(shù)和分子生物學(xué)方法檢測(cè)菌群結(jié)構(gòu)，結(jié)果，在感染G1前和后均噴霧Pab02不能顯著改變喉部的細(xì)菌總數(shù)(P＞0.05)，但能顯著減少氣管中的細(xì)菌總數(shù)和整個(gè)呼吸道(喉部和氣管)中的葡萄球菌數(shù)(P＜0.05)；在感染前噴霧Pab02或在感染后噴霧Pab02均不能顯著改變呼吸道中的細(xì)菌總數(shù)(P＞0.05)，但能顯著減少呼吸道中的葡萄球菌數(shù)(P＜0

6、.05)；在感染G1前和后均噴霧Pab02或者僅在感染G1前噴霧Pab02能夠恢復(fù)呼吸道菌群多樣性和相似性，而在感染G1后再噴霧Pab02不能恢復(fù)呼吸道菌群多樣性和相似性。
　　 4.通過組織學(xué)方法觀察噴霧枯草芽孢桿菌Pab02以及滴鼻感染金色葡萄球菌G1后對(duì)肉雞肺組織的影響。結(jié)果，Pab02噴霧組肺泡正常，未見破裂和融合，未見肺間質(zhì)增生，未見炎性滲出物，但淋巴小結(jié)增多；感染G1后，可見肺泡破裂融合，出血嚴(yán)重，炎性細(xì)胞大量增多，