河南省某些地區(qū)家兔球蟲感染情況調(diào)查及黃艾美耳球蟲內(nèi)生發(fā)育史研究.pdf

1、兔球蟲病是養(yǎng)兔業(yè)的大敵，各種月齡的家兔均能感染發(fā)病，尤其是對3月齡以下幼兔危害嚴(yán)重。一般發(fā)病率為50％-90％，死亡率20％-30％。家兔在各個季節(jié)都可能感染發(fā)病，溫暖、潮濕季節(jié)或環(huán)境，球蟲病發(fā)病率可高達90％以上，死亡率達30％-100％。
　　 為掌握目前河南省家兔球蟲病的流行動態(tài)及種類分布，筆者2007年10月到2008年6月對河南省部分種兔養(yǎng)殖場球蟲感染情況及其種類進行了調(diào)查。結(jié)果顯示：各地區(qū)球蟲感染率均很高，養(yǎng)殖場感染

2、率為100％(8/8)，總感染率達到64.59％(693/1073)，作者按斷奶前，1-3個月齡，4-6個月齡，7-12個月齡，1年以上6個年齡段進行劃分以統(tǒng)計不同年齡的球蟲感染率，其結(jié)果分別為67.12％(49/73)，76.03％(184/242)，59.87％(282/471)，65.22％(150/230)，49.12％(28/57)。從家兔的品種來看，獺兔的感染率為62.79％(297/473)，肉兔的感染率為85.90％(3

3、29/383)，長毛兔的感染率為30.88％(67/217)。本次調(diào)查共鑒定出艾美耳球蟲11種，即微型艾美耳球蟲(Eimeria.exigua)，盲腸艾美耳球蟲(E. coecicola)，斯氏艾美耳球蟲(E. stiedai)，腸型艾美耳球蟲(E.intestinalis)，梨形艾美耳球蟲(E.piriformis)，新兔艾美耳球蟲(E. neoleporis)，黃艾美耳球蟲(E.flavescens)，穿孔艾美耳球蟲(E. perf

4、orans)，無殘艾美耳球蟲(E. irresidua)，中型艾美耳球蟲(E.media)，大型艾美耳球蟲(E.magna)。
　　 為了解黃艾美耳球蟲的內(nèi)生發(fā)育史，首先培育無球蟲兔，然后應(yīng)用單卵囊分離技術(shù)獲取E. flavescens，感染無球蟲兔擴增卵囊數(shù)量，以獲得足夠數(shù)量的純種 E.flavescens卵囊。
　　 將23只無球蟲兔編號為1-23號，1-8號每只經(jīng)口接種 E.flavescens卵囊440×104，

5、9-14號每只經(jīng)口接種劑量為50×104，15-22號每只經(jīng)口接種劑量為20×104，23號為空白對照。1號在感染后6小時剖殺，2號在感染后12小時剖殺，此后每間隔12個小時按編號順序剖殺一只試驗兔，取各個腸段樣品，制作粘膜涂片和石蠟組織切片進行觀察。研究黃艾美耳球蟲的內(nèi)生發(fā)育史，黃艾美耳球蟲(E.flavescens)共進行4代裂殖生殖和1代配子生殖，從成熟裂殖子的形狀和裂殖體中所含的裂殖子的數(shù)量多少分析，每一代裂殖生殖階段均可能出現(xiàn)

6、兩種類型的裂殖體。
　　 感染后6-24小時，在十二指腸固有層的組織切片中，十二指腸粘膜涂片中均觀察到少量的子孢子，形狀不規(guī)則，在粘膜涂片中呈香蕉形，子孢子平均大小為17.3×4.7μm。
　　 感染后60—72小時為第一代裂殖生殖，寄生部位在空腸的絨毛上皮細(xì)胞和腸腺上皮細(xì)胞中，裂殖體可分為粗型和細(xì)型兩種，粗型裂殖體含2-4個裂殖子，且裂殖子形態(tài)較粗短，平均大小4.7μm×2.1μm，細(xì)型裂殖體含8-18個裂殖子，且裂殖

7、子形態(tài)呈細(xì)長狀，平均大小11.1μm×1.5μm，感染后84小時進入第二代裂殖生殖時期，主要寄生于盲腸和結(jié)腸的腸腺上皮細(xì)胞中，第二代粗型裂殖子大小平均為5.3μm×1.8μm，細(xì)型裂殖子為10.3×1.7μm，第三代裂殖生殖發(fā)生于感染后96-120小時，主要在盲腸和結(jié)腸的絨毛上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)育，第三代粗型裂殖子大小平均為5.1μm×1.6μm，細(xì)型裂殖子為10μm×1.4μm，感染后144-153小時是第四代裂殖生殖時期，裂殖體主要集中于盲

8、腸和結(jié)腸的腸腺上皮細(xì)胞中，第四代粗型裂殖子大小平均為4.2μm×1.4μm，細(xì)型裂殖子為7.5μm×1.2μm。
　　 感染后117小時，黃艾美耳球蟲第四代裂殖子侵入新的宿主細(xì)胞或在原寄生細(xì)胞內(nèi)開始有性生殖。第四代裂殖子中一部分在細(xì)胞中發(fā)育成小配子體，另一部分則發(fā)育成大配子體。隨著進一步的發(fā)育，大配子體細(xì)胞逐漸增大，其胞漿顏色也隨之逐漸變淡，同時出現(xiàn)愈來愈多的界限清晰的嗜酸性脂滴樣顆粒(囊壁形成體即成囊顆粒的前體)，這些顆粒先是

9、分散于細(xì)胞質(zhì)中，隨后逐漸向細(xì)胞限制膜移動，至成熟時，紅色的顆?；径家呀?jīng)聚集到了限制膜的內(nèi)層，細(xì)胞內(nèi)只剩有淡紅色的顆粒。在發(fā)育過程中，大配子體中有一個紫紅色的核位于細(xì)胞的中央，核的中央還有一個暗色的核仁。成熟的大配子體23.4μm×24μm。早期的小配子體細(xì)胞質(zhì)呈紫紅色，隨著進一步的發(fā)育，小配子體開始增大，逐漸出現(xiàn)越來越多的界限清晰的紫色核，早期小配子體不易與裂殖體區(qū)別，當(dāng)發(fā)育成多核體后，核仁變得不明顯，易于區(qū)別。在多數(shù)的小配子體中，這

10、些核逐漸向限制膜移動，細(xì)胞中央只有少量的核及紫紅色的絮狀殘體。大配子體與小配子體的主要區(qū)別是前者核大，核仁明顯，后者核仁不明顯，核小。隨著發(fā)育的進程，成熟的小配子從小配子體中游離出來，成熟小配子呈香蕉形，游離于帶蟲空泡內(nèi)，頭端為頂體，其下為基粒，兩根鞭毛附著于基粒上。
　　 成熟的帶鞭毛的小配子從小配子體中游離出來后，開始主動尋找成熟的大配子體，兩者結(jié)合在一起，形成合子。原來聚集與大配子體限制膜內(nèi)層的成囊顆粒開始聚合形成卵囊壁。