紫外線減毒柔嫩艾美耳球蟲YL株蟲苗的制備及預(yù)防效果研究.pdf

1、雞球蟲病是一種呈全球性分布的原蟲病，其發(fā)病率可高達(dá)50％～70％，死亡率為20％～30％，嚴(yán)重者高達(dá)80％，每年全世界因球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失超過30億美元。雖然使用抗球蟲藥這種傳統(tǒng)方法在球蟲防治中發(fā)揮了積極的作用，但是球蟲耐藥株的不斷出現(xiàn)、公眾對(duì)藥物殘留的恐懼以及新藥研究的缺乏，使得活疫苗接種在不久的將來會(huì)成為控制球蟲病的主要措施。因此，我們開展了本項(xiàng)研究，并取得如下結(jié)果： (1)對(duì)E tenella YL株進(jìn)行以紫外線照射為主

2、的6種方法進(jìn)行致弱，然后將這6種方法致弱的和未照射的E tenellaYL株孢子化卵囊，分別經(jīng)口接種8日齡無球蟲感染的健康尼克紅小公雛，劑量為1×105個(gè)/羽，對(duì)腸道病變記分、每克糞便卵囊數(shù)(OPG)、平均增重、死亡率、血便排放情況等幾項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測定，研究其致病性。結(jié)果顯示：未照射的球蟲卵囊對(duì)雞體的影響較大，癥狀和病理變化嚴(yán)重，且有死亡現(xiàn)象，死亡率在5％以上。而照射后的球蟲卵囊對(duì)雞體的影響顯著減輕，試驗(yàn)組雞未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，但鏡檢時(shí)查出大

3、量卵囊，其中方法5致弱的卵囊對(duì)雞的致病性最弱，其相對(duì)增重率和盲腸病變記分等都較其他照射方法有明顯減輕。 (2)用6個(gè)不同方法照射致弱的E.tenella YL株蟲苗免疫雛雞，篩選免疫保護(hù)效果最好的致弱方法。結(jié)果顯示：用方法5致弱的雞E.tenella YL株的孢子化卵囊免疫雞，雞的日平均體重曲線呈穩(wěn)定上升趨勢，產(chǎn)生的卵囊總量少于其它試驗(yàn)組和陽性對(duì)照組，OPG值曲線也較其它組低且穩(wěn)定，且該組雞的組織病理變化也較其它試驗(yàn)組和陽性對(duì)照

4、組輕。 (3)用最佳致弱方法制得的紫外線致弱蟲苗免疫雛雞，篩選免疫保護(hù)效果最好的免疫劑量。結(jié)果顯示：免疫劑量為8 000個(gè)/羽時(shí)，相對(duì)增重率較其它組高，而OPG值、組織病理學(xué)變化比其它組輕。 (4)用最佳致弱方法制得的紫外線致弱蟲苗免疫雛雞，篩選免疫保護(hù)效果最好的免疫日齡。結(jié)果顯示：9日齡首免時(shí)，相對(duì)增重率和成活率較其它組高，而OPG值和盲腸病變記分較其它組輕。 (5)用最佳致弱方法制得的紫外線致弱蟲苗免疫雛雞，

5、利用非特異性酯酶(ANAE)染色法，顯示該蟲苗免疫后雞體內(nèi)淋巴器官T細(xì)胞的數(shù)量變化，為雞球蟲疫苗的免疫機(jī)制提供組織學(xué)基礎(chǔ)。結(jié)果顯示：免疫組的胸腺、脾、盲腸扁桃體等器官的T細(xì)胞數(shù)量均高于對(duì)照組，但各器官T細(xì)胞數(shù)量增加高峰期和峰值是有差別的。其中胸腺的高峰期最早，出現(xiàn)在2免后第7天，峰值為118個(gè)/100μm2；其次為盲腸扁桃體，出現(xiàn)在2免后第10天，峰值為64個(gè)/100μm2；脾臟的高峰期出現(xiàn)最晚，在2免后第14天，峰值為83個(gè)/100μ