麥稈提取物的體外抑瘤活性研究.pdf

1、我國麥稈資源十分豐富，除用作畜牧飼料、還田肥料和工業(yè)原料外，大都直接大量焚燒，既造成能源的浪費，又引起嚴重的環(huán)境污染。綜合利用農(nóng)作物秸稈成為當前國內(nèi)外科學家競相開展的研究課題。據(jù)資料和研究推測麥稈中可能存在抗癌活性成分。本研究旨在以麥稈為原料，提取其中的抗癌活性成分或能提高機體免疫力的低聚糖等高附加值成分，為有效利用麥稈資源，杜絕其對環(huán)境的污染做出積獻。
　　 本文先用超臨界提取技術(shù)對麥稈可能存在的弱極性抗癌活性成分進行粗提取，

2、研究其最佳工藝和粗提物的體外抑瘤活性;用超臨界提取后的麥稈，再提取其中可能存在的極性活性成分，研究其最佳工藝和粗提物的體外抑瘤活性。將活性較高的超臨界粗提物進行進一步分離，用乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和正己烷等有機溶劑復(fù)溶并做體外抑瘤活性測定后，選擇活性較好的復(fù)溶物用透析、活性炭吸附和冷析的方法分離，得到數(shù)種分離組分并對其作體外抑瘤活性測定;選擇活性最好的分離組分通過硅膠柱層析進一步分離，得到數(shù)種柱層析分離組分并對其作體外抑瘤活性測定;選擇

3、活性最高的柱層析分離組分進行GC-MS分析，并做了其抗腫瘤效果評價。
　　 結(jié)果如下:
　　 1.超臨界工藝及粗提物的體外抑瘤活性:
　　 超臨界提取最佳工藝為:萃取壓力25MPa、萃取溫度50℃、二氧化碳流量35kg/h以及萃取時間2h;超臨界粗提物得率達到3.6％，對小鼠S180細胞增殖顯示體外抑制作用，有一定的劑量—效應(yīng)關(guān)系(r=0.983)，IC50為200.6μg/mL。
　　 2.麥稈極性活性

4、成分的提取及粗提物的體外抑瘤活性:
　　 水溶性多糖提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提1h，粗提物得率為8.4％，無體外抑瘤活性;堿溶性多糖提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提3h，粗提物得率為22.7％，無體外抑瘤活性;有機酸提取最佳工藝為料液比為1∶150(W∶V)，pH=4.5，50℃提取2h，粗提物得率為1.02‰無體外抑瘤活性;生物堿提取最佳工藝為料液比1∶150(W∶V)，75℃浸提

5、1h，粗提物得率為1.5％,無體外抑瘤活性。
　　 3.超臨界粗提物的初步分離及分離組分的體外抑瘤活性:
　　 乙醇復(fù)溶物體外抑瘤活性較超臨界粗提物高，對小鼠S180細胞作用的IC50為163.6μg/mL;然后用冷析得到的分離組分Ⅱ抑瘤作用較組分Ⅰ好，對小鼠S180細胞作用的IC50為103.4μg/mL;透析分離組分Ⅰ的抑瘤作用較組分Ⅱ好，對小鼠S180細胞作用的IC50為135.5μg/mL;用活性炭吸附得到的分離

6、組分Ⅰ和Ⅱ的抑瘤作用較差;所以選取抑瘤活性最高的冷析分離組分Ⅱ進一步分離。
　　 4.冷析分離組分Ⅱ的硅膠柱層析分離及體外抑瘤活性和GC-MS分析結(jié)果:
　　 冷析分離組分Ⅱ經(jīng)硅析柱膠層得到4種分離組分，其中層析組分1體外抑瘤效果最好，在5μg/mL～160μg/mL的范圍內(nèi)對S180細胞的增殖均有抑制作用，呈現(xiàn)出良好的劑量—效應(yīng)關(guān)系，IC50為68.0μg/mL;層析分離組分GC-MS測定結(jié)果表明，麥稈中可能存在的體外

7、抑瘤活性成分為亞麻酸，也可能有β-蒎烯和4，8，12，16-四甲基十七碳烷-4-交酯的作用。
　　 5.層析組分1的抗腫瘤效果評價:
　　 MTT測定結(jié)果表明層析組分Ⅰ對人肝癌HepG2細胞增殖具有體外抑制作用，IC50為77.1μg/mL，顯示出明顯的劑量—效應(yīng)關(guān)系(r=0.992);流式細胞儀測定結(jié)果表明層析組分1對人肝癌HepG2細胞具有誘導凋亡作用;層析組分1對正常體細胞毒性較小，在68.0μg/mL劑量下處理小