石榴果皮提取物對食品腐敗菌的抑菌活性及機理研究.pdf

1、據(jù)統(tǒng)計，全世界每年有20％左右的肉制品損失于各種腐敗變質(zhì)。這不僅導(dǎo)致經(jīng)濟上的損失，更危及消費者的健康和生命。其中微生物污染是導(dǎo)致食品腐敗變質(zhì)的主要原因之一。本論文以石榴加工中的副產(chǎn)物—石榴果皮為材料，以食品中的常見腐敗菌為供試菌，以抑菌圈直徑和MTT清除率為活性追蹤指標，對石榴果皮中抑菌活性物質(zhì)的抑菌特性、成分分析、提取的工藝條件及抑菌機理進行了系統(tǒng)的研究，研究結(jié)果為石榴果皮工業(yè)化開發(fā)利用和研制新型食品防腐劑提供了理論和技術(shù)依據(jù)。本論文

2、主要研究結(jié)果如下:
　　(1)對石榴果皮提取物抑菌活性初步研究結(jié)果表明，石榴果皮乙醇提取物對九種食品腐敗菌均有抑制作用，其中對溶酪大球菌、藤黃微球菌和變形桿菌的抑制作用最為顯著。對各供試菌的抑制效果依次為:溶酪大球菌(Macrococcuscaseolyticus)＞藤黃微球菌(Micrococcus luteus)＞變形桿菌(Proteusbacillusvulgaris)＞腐生葡萄球菌(Staphylococcus sapro

3、phyticus)＞枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis、大腸桿菌(Escherichia coli＞熒光假單胞桿菌(Pseudomonas fluorescens)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)＞白色鏈球菌(Monilia albican)。
　　(2)采用藥物平板稀釋法研究了石榴果皮乙醇提取物對九種食品腐敗菌的最低抑制濃度(MIC)（以生藥量計），實驗結(jié)果表明:石榴果皮乙醇提取物對溶酪大球

4、菌和藤黃微球菌的抑制作用最強，其MIC值為12.5mg/mL;對腐生葡萄球菌、變形桿菌、大腸桿菌的MIC值為25.0mg/mL;對枯草芽孢桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、熒光假單胞桿菌的MIC值為50.0mg/mL;對白色鏈球菌的MIC值為100.0mg/mL。
　　(3)采用藥物平板稀釋法研究了石榴果皮乙醇提取物各萃取相對溶酪大球菌和藤黃微球菌的抑菌活性。結(jié)果表明正丁醇萃取物具有顯著的抑菌效果，對溶酪大球菌和藤黃微球菌的MIC值（以生藥量計）

5、均為12.5mg/mL，較之未經(jīng)萃取的石榴果皮乙醇提取物對這兩種菌MIC值沒有變化，乙酸乙酯萃取物抑菌活性較弱，對溶酪大球菌的MIC值為50.0mg/mL，對藤黃微球菌的MIC值為25.0mg/mL，剩余水層物質(zhì)幾乎沒有抑菌活性。以上實驗表明石榴果皮乙醇提取物主要抑菌活性物質(zhì)集中于正丁醇萃取物中。
　　(4)以溶酪大球菌為指示菌，研究了熱處理和紫外照射處理對石榴果皮正丁醇萃取物抑菌活性的影響。結(jié)果表明高溫處理和紫外照射對石榴果皮正

6、丁醇萃取物的抑菌活性幾乎沒有影響。
　　(5)綜合運用現(xiàn)代色譜學(xué)技術(shù)（大孔樹脂柱層析色譜、硅膠柱層析色譜、Sephadex LH-20色譜、高效液相色譜）從石榴果皮正丁醇萃取物中分離得到1種單體化合物。對化合物的鑒定和分析，得出此化合物為異槲皮苷。
　　(6)以異槲皮苷的含量為指標，采用乙醇回流提取法對石榴果皮中異槲皮苷的提取工藝參數(shù)進行單因素試驗，通過正交法得出對石榴果皮抑菌活性物質(zhì)提取效果影響的大小順序為:乙醇濃度、提取

7、溫度、提取時間、料液比;其最佳提取條件為:乙醇濃度90％，提取溫度80℃，提取時間2.5h，料液比1∶15。在此優(yōu)化條件下，得到的異槲皮苷的含量為2.36％。
　　(7)正常組和加藥組溶酪大球菌生長曲線對比結(jié)果表明，石榴果皮正丁醇萃取物能夠抑制溶酪大球菌對數(shù)生長期的菌體分裂;呼吸抑制試驗結(jié)果表明，石榴果皮正丁醇萃取物主要是抑制HMP途徑，導(dǎo)致還原力NADPH缺乏，引起代謝功能障礙，從而達到抑菌的目的;通過測定堿性磷酸酶AKP結(jié)果表