內(nèi)蒙古亞洲小車蝗種群遺傳多樣性的研究.pdf

1、亞洲小車蝗Oedaleus asiaticus Bei-Bienko是我國北方草原和農(nóng)牧交錯(cuò)區(qū)主要的害蟲之一。為了從分子水平評(píng)價(jià)內(nèi)蒙古地區(qū)亞洲小車蝗種群的遺傳多樣性和種群間遺傳分化，本文首先對(duì)其樣本保存方法進(jìn)行了研究，對(duì)液氮速凍處理后冷凍保存、直接冷凍保存、100％乙醇保存和干制的亞洲小車蝗樣本進(jìn)行基因組DNA提取，對(duì)比四種不同樣本保存方法對(duì)獲得的DNA的影響;然后分別采用8對(duì)SSR引物、288bp的核糖體DNA部分序列和7條ISSR引

2、物對(duì)內(nèi)蒙古15個(gè)地點(diǎn)的亞洲小車蝗種群進(jìn)行遺傳多樣性進(jìn)行了分析。結(jié)果表明:
　　1.蝗蟲樣本保存方法的比較
　　在低溫脅迫下，蝗蟲細(xì)胞死亡過程中伴隨著DNA降解的情況發(fā)生。為了能夠在蝗蟲分子系統(tǒng)學(xué)研究當(dāng)中獲得高質(zhì)量的基因組DNA用于實(shí)驗(yàn)研究，選用了一種方便、快捷、安全、有效的蝗蟲樣本保存方法——液氮速凍樣本處理法。為進(jìn)一步進(jìn)行蝗蟲分子生物學(xué)的研究提供了必要的基礎(chǔ)保障。
　　2.內(nèi)蒙古亞洲小車蝗不同地理種群遺傳多樣性的SS

3、R和ISSR分析
　　(1)從前人對(duì)蝗蟲的SSR研究報(bào)道中，篩選出8對(duì)多態(tài)性好，能對(duì)亞洲小車蝗種群遺傳多樣性的SSR研究提供良好信息的SSR引物(Ata35、Ata52、LmIOZc67、MwGTD9、MwGTG12、MwGTC12、Ata68、Phr2T)，結(jié)果表明，8對(duì)SSR引物對(duì)15個(gè)地里亞洲小車蝗種群擴(kuò)增出的平均等位基因數(shù)為8.8750、平均有效等位基因數(shù)為7.3312、多態(tài)性含量均值為0.5601。說明8個(gè)位點(diǎn)均為高度多

4、態(tài)性位點(diǎn)，都能為遺傳多樣性的分析提供充足信息。
　　(2)從加拿大哥倫比亞大學(xué)設(shè)計(jì)并公布的100條通用ISSR引物中篩選出適用于亞洲小車蝗種群，擴(kuò)增條帶色彩明亮、清晰可辨且可重復(fù)性好的7條ISSR引物(807、810、811、812、823、880、899)，7條ISSR引物共擴(kuò)增出85個(gè)色彩明亮、清晰可辨的條帶，每條引物擴(kuò)增出的條帶數(shù)為9～15，平均為12.1429，所有條帶均為多態(tài)性條帶，7條ISSR引物的平均多態(tài)信息含量為0

5、.8466，且均大于0.5。結(jié)果說明，7條ISSR引物都能為本研究提供充足的數(shù)據(jù)信息。
　　(3)15個(gè)亞洲小車蝗種群之間存在中等程度的基因交流(1＜Nm＜4)，且有較大的遺傳多樣性和遺傳分化。15個(gè)種群的mantel檢測(cè)結(jié)果表明，種群間遺傳距離與地理距離呈極顯著的相關(guān)關(guān)系。我們認(rèn)為地理距離、地形的差異等地理障礙是限制其種群間基因交流，導(dǎo)致遺傳分化較高的主要原因。
　　3.亞洲小車蝗rDNA部分序列分析
　　1)本研究

6、測(cè)定的亞洲小車蝗rDNA的288bp序列中G+C含量高于A+T含量，與前人研究結(jié)果對(duì)比得出，不同物種之間的rDNA序列堿基組成存在差異且同一物種不同基因的堿基組成同樣存在差異。
　　2) rDNA序列由于所涵蓋的信息量小，難以實(shí)際的反應(yīng)遺傳多樣性的全部規(guī)律，所以我們認(rèn)為rDNA序列不適合用于蝗蟲種下遺傳分化的研究，這與前人的研究結(jié)果也是一致的。
　　研究結(jié)果從分子水平探索了不同地區(qū)亞洲小車蝗種群間的內(nèi)在聯(lián)系，為制定亞洲小車蝗