不結(jié)球白菜再生體系、遺傳轉(zhuǎn)化及耐熱性調(diào)控研究.pdf

1、不結(jié)球白菜（Brassica campetris ssp.Chinensis Makino）原產(chǎn)于中國(guó)，在蔬菜的周年供應(yīng)中占有重要地位。由于不結(jié)球白菜喜冷涼，因此高溫脅迫對(duì)其夏季的產(chǎn)量和品質(zhì)影響很大。有關(guān)不結(jié)球白菜耐熱性研究及其常規(guī)育種已有進(jìn)展，但仍不能滿足生產(chǎn)及消費(fèi)需要。利用植物基因工程技術(shù)進(jìn)行遺傳改良，以增強(qiáng)不結(jié)球白菜的抗逆境能力，是不結(jié)球白菜遺傳改良的重要目標(biāo)。但由于不結(jié)球白菜的再生能力因基因型的不同而存在著較大的差異，需對(duì)每個(gè)特

2、定的對(duì)象建立一套高效再生系統(tǒng)。
　　 本文以薹菜子葉-子葉柄、子葉柄和下胚軸為試材，進(jìn)行離體培養(yǎng)再生體系研究。結(jié)果表明，最適于薹菜不定芽分化的條件是:5d苗齡的子葉-子葉柄為最佳外植體材料，最佳培養(yǎng)基為MN+BAP5 mg·L-1+ZT2 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1+AgNO37.5 mg·L-1，子葉-子葉柄再生頻率達(dá)67.8％。
　　 對(duì)影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素進(jìn)行了研究:Km的適宜濃度為10

3、mg·L-1;外植體預(yù)培養(yǎng)2天有利于轉(zhuǎn)化率的提高;農(nóng)桿菌菌液濃度對(duì)轉(zhuǎn)化效率也有影響，隨著菌液濃度的增大，轉(zhuǎn)化效率有提高的趨勢(shì)，在OD600=0.5時(shí)，轉(zhuǎn)化效率最高;侵染時(shí)間以5min最佳;共培養(yǎng)時(shí)間為2天時(shí)獲得了最高的轉(zhuǎn)化效率。成功將LFY基因?qū)氩唤Y(jié)球白菜，獲得3株GUS陽(yáng)性苗。
　　 用5-氮胞苷（5-azaC）溶液處理不結(jié)球白菜種子，研究了高溫脅迫下5-azaC處理對(duì)不結(jié)球白菜幼苗與耐熱性有關(guān)的部分生理指標(biāo)的影響。結(jié)果表明