《生理學》實驗指導教程

1、<p>　　實驗一 生理學實驗常用儀器使用方法，手術器械的識別及急性動物實驗手術操作 </p><p>　　實驗二 低溫對蟾蜍坐骨神經(jīng)干動作電位傳導速度及不應期的影響 </p><p>　　實驗三 出血、凝血時間的測定，影響兔血液凝固的因素 </p><p>　　實驗四 兔減壓神經(jīng)放電、動脈血壓調節(jié)及心血管受體分析 </p><

2、p>　　實驗五 生理因素對兔呼吸運動及膈神經(jīng)放電的影響</p><p>　　實驗六 影響家兔循環(huán)、泌尿、呼吸的綜合實驗</p><p><b>　　實驗總論</b></p><p><b>　　一、實驗目標與要求</b></p><p>　　通過實驗使學生初步掌握生理學實驗的一些基本操作技

3、能，學會檢查人體功能活動的一些測試方法，驗證和鞏固某些基本理論知識，培養(yǎng)認真、負責、嚴謹求實的態(tài)度和團結協(xié)作的良好作風，增強對事物進行觀察、比較、分析和綜合的能力。為此要求：</p><p>　　1.實驗前應仔細閱讀實驗指導，了解本次實驗的目標、原理、步驟等，并復習有關理論知識。</p><p>　　2.實驗時要按照實驗指導及教師的指示進行操作和觀察，客觀、及時地記錄實驗現(xiàn)象或結果，并聯(lián)系

4、講授內容進行思考。</p><p>　　3.實驗后須及時整理實驗記錄，分析實驗結果，按照規(guī)定格式書寫實驗報告，按時交負責教師評閱。</p><p>　　二、實驗報告書寫要求</p><p>　　因實驗內容不同，可以填表、敘述等形式寫出報告。書寫要整潔，文字應簡練、通順。首先注明班級、組別、姓名、實驗日期，寫出實驗題目、實驗目標等項目，然后著重書寫實驗結果以及分析和討

5、論。并要求：</p><p>　　1.實驗結果必須憑自己觀察，隨時記錄，如實填寫。有曲線記錄的，經(jīng)必要注明后，剪貼在實驗報告上。</p><p>　　2.分析和結論實驗結果的分析，是根據(jù)學過的理論知識對結果進行解釋。如果出現(xiàn)非預期的結果時，應分析其可能的原因。實驗結論，是從實驗結果中歸納出概括性的判斷，即本次實驗所驗證的理論概要。</p><p><b>

6、　　三、生理實驗室規(guī)則</b></p><p>　　1.須攜帶實驗指導、記錄本等文具準時進實驗室，并穿戴實驗衣帽。</p><p>　　2.遵守學習紀律，保持實驗室安靜；嚴肅、認真、安全地進行實驗，不做與本實驗無關的事情。</p><p>　　3.實驗室的一切物品，未經(jīng)教師許可，不得擅自取用或帶出。</p><p>　　4.各組應

7、用的實驗器材、物品，在使用前應查點清楚，不得隨意與別組調換；如遇機件不靈或損壞時，應報告教師，以便及時修理或更換。</p><p>　　5.節(jié)約水電及一切消耗性物品，愛護儀器和用具。損壞物品應賠償。</p><p>　　6.保持實驗室整潔。公共器材和藥品用畢后立即歸還原處，動物尸體和廢棄物應放到指定地點。</p><p>　　7.實驗完畢，應將實驗器材、用品和實驗臺

8、收拾干凈，查點清楚，放還原處。各小組輪流搞好實驗室的清潔衛(wèi)生，關好窗戶、水電，經(jīng)教師檢查無誤后，方可離開。</p><p><b>　　實驗一</b></p><p>　?。ㄒ唬┥韺W實驗常用儀器使用方法，手術器械的識用</p><p>　　[目的和原理]：熟悉RM6240生物機能系統(tǒng)的組成、結構；掌握RM6240系統(tǒng)的功能；哺乳類動物手術器材

9、識別、使用。</p><p><b>　　[實驗對象]：無</b></p><p>　　[實驗器材和藥品]：蛙類手術器材一套，哺乳類動物手術器材一套，RM6240生理信號采集處理系統(tǒng)。</p><p>　　[實驗步驟和項目]：</p><p>　　一、RM6240生理信號采集處理系統(tǒng)基礎知識 </p>&l

10、t;p>　　1．采用windows中文圖形界面，操作簡便易學，可使用鼠標，可將圖形或實驗數(shù)據(jù)導入Word、Excel中；</p><p>　　2． 系統(tǒng)功能更強大與靈活，可處理多種生理信號，具有實時顯示、記錄、分析、處理、打印等多種功能。</p><p><b>　　3．運行軟件</b></p><p>　　應先開外置儀器，然后再進入“實

11、驗系統(tǒng)”，否則系統(tǒng)無法進行“示波”或“記錄”，只能對以前記錄的波形進行分析。</p><p>　　4．系統(tǒng)工作的三個環(huán)境</p><p>　　⑴ 示波環(huán)境：可以調節(jié)各種實驗參數(shù)，不進行存盤；</p><p>　　⑵ 記錄環(huán)境：以臨時文件形式將信號實時存儲到硬盤；</p><p>　　⑶ 分析環(huán)境：可對記錄的波形進行測量、分析、編輯、打印。&l

12、t;/p><p>　　5．包括菜單欄、工具欄、監(jiān)視參數(shù)區(qū)、信號顯示區(qū)、控制參數(shù)區(qū)。</p><p><b>　　6．菜單說明</b></p><p>　?、?文件：新建、打開、保存、打印模式設置</p><p><b>　?、?編輯</b></p><p>　?、?示波：開始示波

13、、開始記錄、暫停記錄、停止記錄</p><p>　?、?分析：標記查詢、開始反演、鼠標捕捉、區(qū)域測量、取消標志線</p><p>　?、?實驗：系統(tǒng)預設了許多實驗項目的參數(shù)，實驗時只要選擇相應的項目即可進行實驗，或根據(jù)實際情況對參數(shù)稍加調整。</p><p>　　⑹ 工具：縱向縮放、橫向縮放、瀏覽視圖、網(wǎng)格切換、選項</p><p><

14、b>　?、?查看</b></p><p><b>　?、?幫助</b></p><p><b>　　7．標記框</b></p><p>　　標記方式選擇、增加標記、刪除標記、標記詞組選擇、打標記</p><p>　　二、蛙類手術器材的識別、使用</p><p&g

15、t;　　1．剪刀：粗剪刀用于剪骨骼和皮膚等粗硬組織；手術剪用于剪肌肉、腱膜等一般軟組織；眼科剪刀用于剪神經(jīng)、血管、心包膜等細軟組織。</p><p>　　2．鑷子：手術鑷用于牽提皮膚夾捏肌肉等組織；眼科鑷用于夾捏細軟組織。</p><p>　　3．探針：用于破壞腦和脊髓。</p><p>　　4．玻璃分針：用于分離神經(jīng)、血管。</p><p>

16、;　　5．鋅銅弓：用于對神經(jīng)—肌肉標本施加刺激，以檢查其興奮性。</p><p>　　6．蛙心夾：用于夾住心尖，另一端借縛線連于杠桿，以描記心臟舒縮。</p><p>　　7．蛙板和蛙釘：用蛙釘將蛙腿固定于一約20cm×15cm的木板上。制備神經(jīng)肌肉標本，應在清潔的玻璃板上操作，為此可在板中央嵌一玻璃板。</p><p>　　三、哺乳類動物手術器材的識別、

17、使用</p><p>　　1．手術刀：用于切開皮膚和器官。</p><p>　　2．剪刀：剪毛用粗剪刀；剪線及一般軟組織用手術剪刀；剪破血管、輸尿管以便插管時使用眼科剪刀。</p><p>　　3．鑷子：圓頭鑷子用于夾捏組織和牽提切口處的皮膚；眼科鑷子用于夾捏細軟組織。</p><p>　　4．止血鉗：用于提起皮膚切口、分離皮下組織和夾鉗血管

18、止血。蚊式止血鉗適用于分離小血管及神經(jīng)周圍的結締組織。</p><p>　　5．動脈夾：用于阻斷動脈血流。</p><p>　　6．氣管插管：急性動物實驗時插入氣管，以保證呼吸道通暢。</p><p>　　7．動脈插管：急性動物實驗時插入動脈，另一端接水銀檢壓計或血壓換能器。</p><p>　　8．解剖臺：固定動物，以便實驗操作。有兔解剖臺

19、、狗解剖臺。</p><p>　　9．注射器：用于注射各種藥物和溶液。</p><p><b>　　四、觀看實驗錄象</b></p><p>　　（二）急性動物實驗手術操作</p><p><b>　　一、靜脈注入法麻醉</b></p><p>　　選定注射的部位，拔去被毛，

20、用手拍彈擊注部位，用紗布浸溫水或凡是林檫拭使靜脈充盈。隨后以左手向選端輕拉以固定皮膚及靜脈。右手持注射器，以針與皮膚約呈30—45度角方向進針，并順血管平行方向深入約1㎝。若針入血管，可見回血。此時放松靜脈近心端的壓迫，左手拇指和食指移至針頭處以夾持固定靜脈內的針頭，右手推藥應無阻力，也無漏出，即成功。注射完畢，用棉球壓迫針孔，以免出血。兔耳緣靜脈注射常無回血，但若針已進入血管內，可見針尖斜面進入血管，少量推進藥物后，可觀察到藥物迅速順

21、血管流動，靜脈由紫紅色變成白色。</p><p>　　動物麻醉適中的表現(xiàn)為：呼吸由不規(guī)則轉變?yōu)橐?guī)律性平穩(wěn)地呼吸；角膜反射不明顯，反應遲鈍；肌肉松弛；皮膚夾捏反應消失。</p><p>　　麻醉過淺或實驗過程中動物逐漸醒來，出現(xiàn)掙扎，呼吸急促及鳴叫等反應時，應補注麻醉藥，但一次不宜超過原劑量的1/5。</p><p><b>　　二、切口與止血</b&

22、gt;</p><p>　　用哺乳動物進行實驗時，在做皮膚切口之前，先預定切口部位并將其周圍的被毛剪去，暴露手術視野皮膚。然后選好確切的切口部位和范圍，必要時做出標志。切口的大小要適當，既要便于手術操作，又不過多地損傷組織器官。如切口過大容易使體溫散失，污染的機會增加。切口時，手術者左手拇指外展，另外四指并攏將預定切口兩側的皮膚繃緊固定，右手持手術刀，以適當?shù)牧α?，一刀全線切開皮膚和皮下組織，直至肌層表面。此時必

23、須注意解剖學特點，以少切斷神經(jīng)血管為準則。若肌纖維行走方向與切口方向一致，可剪開肌膜，用手術刀柄、止血鉗或手指將肌纖維鈍性分離至所需長度，否則便需將肌肉橫行切斷或剪斷。切口由外向內，應外大內小，以便于觀察和止血。 在手術過程中必須注意及時止血。否則動物出血過多會造成手術視野模糊，影響操作。出血的處理視破裂血管的大小而定。微血管滲血，可用溫熱鹽水紗布輕輕按壓止血（干紗布只用于吸血，不可用以揩擦組織，以防損傷組織和使血凝塊脫落）；較

24、大血管出血，需先用止血鉗將出血點及其周圍的小部分組織一并夾住，然后用線結扎；更大血管出血，或血管雖不很大，但出血點較多且比較集中（如肌肉的橫斷面），最好用針線縫過局部組織，</p><p><b>　　實驗二</b></p><p>　　（一）坐骨神經(jīng)干標本制備 </p><p>　　[目的和原理]：掌握坐骨神經(jīng)干標本的制備方法。 &l

25、t;/p><p>　　[實驗對象]：蟾蜍或蛙</p><p>　　[實驗器材和藥品]： 蛙手術器械、任氏液、標本盒</p><p>　　[實驗方法與步驟]：</p><p>　　1．破壞腦脊髓 取蛙一只，用自來水沖洗干凈。左手握住蛙，用食指壓住其頭部前端使頭前俯(圖l一1)，右手持探針從相當于枕骨大孔處垂直刺入，將探針向前刺入顱腔。左右攪動搗毀

26、腦組織。然后將探針抽回原處，再向后刺入脊椎管搗毀脊髓。腦脊髓完全破壞的標志是蛙的四肢松軟，呼吸消失,否則要依上法再行搗毀。</p><p>　　2．剪除軀干上部及內臟 在骶髂關節(jié)水平以上O.5—1.Ocm處橫斷脊柱，然后左手握蛙后肢，用拇指壓住骶骨．使其頭與前肢自然下垂，右手持粗剪刀，沿脊往兩側剪除蛙的一切內臟及頭部，注意不要傷及坐骨神經(jīng)干。(圖1—2)</p><p>　　圖l一1破

27、壞蟾蜍腦脊髓的方法 　　　　　　圖1—2剪除軀干上部及內臟</p><p>　　3．剝皮 先剪去肛門周圍皮膚，然后用左手持圓頭鑷夾住脊柱斷端（注意金屬的圓頭鑷不要接觸到坐骨神經(jīng)），右手捏住其上的皮膚邊緣，向下剝掉全部后肢的皮膚。然后將標本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中：注意用力要均勻，手不可接觸標本。 </p><p>　　4．將手及用過的手術器械洗凈。 </p>

28、;<p>　　5．分離兩腿 用鑷子從背部夾住脊柱將標本提起，避開坐骨神經(jīng)剪去向上突起的骶骨，然后沿正中線用粗剪刀將脊柱剪為兩半，并從恥骨聯(lián)合正中處剪開兩腿，導致兩腿完全分離。將分離的兩腿置于盛有任氏液的小燒杯中。</p><p>　　6．游離坐骨神經(jīng) 將一腿放于蛙板的玻璃板上。用彎眼棵鑷于坐骨神經(jīng)干下穿線，盡量靠近脊柱結扎。注意此處為腰骶叢，不可遺漏分支。于結扎線的脊柱側剪下神經(jīng)。將扎線剪段但殘端

29、保留一定長度。用玻璃分針沿神經(jīng)走行，經(jīng)脊柱、肌肉及其附近的結締組織、坐骨神經(jīng)溝，游離神經(jīng)至月國窩，用支持線輕輕提起神經(jīng)，用眼科剪順其走行方向剪去分支。</p><p>　　7．游離脛、腓神經(jīng) 剪開月國窩處深筋膜，再游離神經(jīng)直到足部。</p><p>　　8．清理標本 將標本標置于大腿肌肉上，用棉花沾任氏液，輕輕擦去神經(jīng)干上的殘余組織。然后將制備好的標本浸入任氏液中數(shù)分鐘，使其興奮性穩(wěn)定

30、后開始實驗。 </p><p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　1．剪斷脊柱的位置要正確，不可用力牽拉神經(jīng)。神經(jīng)一旦暴露，除玻璃分針外，任何器械及手均不能接觸?！　?．要經(jīng)常保持神經(jīng)標本濕潤。</p><p>　?。ǘ┥窠?jīng)干動作電位的傳導速度測定</p><p>　　[目的和原理]：神經(jīng)纖

31、維興奮的標志是產(chǎn)生了動作電位。它可以不衰減的形式傳播，動作電位依局部電流或跳躍傳導的方式沿神經(jīng)纖維傳導。影響其傳導速度的因素有神經(jīng)纖維的直徑、內阻、有無髓鞘、溫度、種類等。坐骨神經(jīng)干為混合神經(jīng)，其動作電位由一群興奮閾、傳導速度、峰電位均不相同的動作電位總合而成，為復合動作電位。測定復合動作電位經(jīng)過的距離時間，即可計算出神經(jīng)干興奮傳導的速度。本實驗的目的在于了解測定神經(jīng)興奮傳導速度的基本原理和方法。</p><p>

32、;　　[實驗對象]：蟾蜍或蛙 </p><p>　　[實驗器材和藥品]：蛙手術器械、任氏液、 電刺激器、標本盒、RM6240生物機能系統(tǒng) 　</p><p>　　[實驗方法與步驟]：</p><p>　　1．制作坐骨神經(jīng)干標本，置于神經(jīng)標本屏蔽盒內，神經(jīng)干需要與兩對電極RA和RB都接觸。</p><p>　　2．記錄電極連接到1通

33、道和2通道，刺激電極連接刺激輸出。</p><p>　　圖2--1 RA．RB為A．B兩組記錄裝置 　　　　圖2—2雙電極記錄的動作電位</p><p>　　3．觸發(fā)采樣，程序發(fā)出刺激信號，同時進行一次掃描。調節(jié)刺激參數(shù)，可在熒光屏1道和2道上觀察到刺激偽跡后數(shù)毫秒后出現(xiàn)一神經(jīng)干雙相復合動作電位圖形。</p><p>　　按空格鍵退出觸發(fā)掃描。按測量鍵進入

34、測量狀態(tài)，用光標測出兩組記錄電極所記波形的對應波峰的時間差,用兩組電極之間的距離除以時間差即可計算出傳導速度。</p><p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　1．神經(jīng)干標本越長越好。</p><p>　　2．測量時間差，一定要測量兩組波形的對應點，如波形的峰值點、起點等，避免測量誤差。</p><p

35、><b>　　[討論題]：</b></p><p>　　1．本實驗可否只用一組記錄電極來測量傳導速度？</p><p>　　2．試分析各組同學實驗數(shù)據(jù)不同的原因有哪些？</p><p>　?。ㄈ┑蜏貙ζ鋭幼麟娢粋鲗俣燃安粦诘挠绊?lt;/p><p>　　[目的和原理]：觀察分析低溫對蟾蜍坐骨神經(jīng)干動作電位、傳導速

36、度及不應期的影響。</p><p><b>　　[實驗對象]：蟾蜍</b></p><p>　　[實驗器材和藥品]：蛙手術器械、滴管、線、培養(yǎng)皿、任氏液、室溫及低溫任氏液。</p><p>　　[實驗方法與步驟]：</p><p>　　1．坐骨神經(jīng)干標本制備（見前）。</p><p>　　2．準備

37、好神經(jīng)標本屏蔽盒，盒內注入少量任氏液，將神經(jīng)搭載于盒內電極上，神經(jīng)中樞端置于刺激電極一側，外周端置于引導電極一側，神經(jīng)干應成每個電極密切接觸，神經(jīng)和電極上不能有液滴。然后蓋好盒蓋，使神經(jīng)封閉，防止神經(jīng)干燥。</p><p>　　3．儀器連接，電極接于相應的接口。</p><p>　　4．測量指標，閾刺激強度、動作電位潛伏期、時程、峰-峰值、不應期</p><p>　

38、　5．動作電位的誘發(fā)、記錄及參數(shù)測量方法</p><p>　?。?）引導、記錄及觀察坐骨神經(jīng)干復合動作電位：</p><p>　?、賹?通道的輸入線連接神經(jīng)標本盒的r1、r2及接地接線柱，進入RM6240界面，按以下提示操作：</p><p>　　用實驗模塊時：實驗項目→肌肉神經(jīng)實驗→神經(jīng)干動作電位引導。</p><p>　　不用實驗模塊時：

39、輸入信號→1通道→動作電位。</p><p>　　刺激參數(shù)（參考值）：刺激波寬0.05ms；刺激時間間隔1s；起始刺激強度0.00mV；刺激強度增量50mV。</p><p>　?、谟涗洀秃蟿幼麟娢徊ㄐ?。</p><p>　?、蹖嶒灲Y果存盤后反演，測量動作電位潛伏期、時程及正、負雙相波幅和峰-峰值（每一參數(shù)值取10個以計算平均值）。</p><p

40、>　?。?）測量神經(jīng)干動作電位的傳導速度：</p><p>　　①用身長約15cm的蟾蜍制備坐骨神經(jīng)干標本。</p><p>　?、谠诓襟E1基礎上，添加一對引導電極（r3、r4），r3、r4與S1、S2刺激電極間距離盡量遠一些。輸入信號→1通道→動作電位；輸入信號→2通道→動作電位。</p><p>　?、墼赗M6240界面上，按以下提示操作：</p&g

41、t;<p>　　用實驗模塊時：實驗項目→肌肉神經(jīng)實驗→神經(jīng)興奮傳導速度測定。</p><p>　　不用實驗模塊時：根據(jù)實驗原理，分別測定電極r1-r3之間的距離（S）和興奮從r1傳導到r3需要的時間（T），求得傳導速度v=S/T。</p><p>　　④增快顯速，仔細觀察是否能出現(xiàn)相繼多個動作電位。</p><p>　?。?）測量坐骨神經(jīng)干興奮性恢復周

42、期，按以下提示操作：</p><p>　　在記錄電極r1、r2之間用組織鑷夾傷神經(jīng)干。</p><p>　　用實驗模塊時，實驗項目→肌肉神經(jīng)實驗→神經(jīng)興奮不應期測定。不用模塊時，刺激參數(shù)設置（參考值）：刺激方式為連續(xù)程控雙刺激；刺激時間間隔2s；起始波間隔7ms；波間隔遞減量0.05ms.</p><p>　　②分別測量不同波間隔時，AP1與AP2幅值，測出不應期。

43、</p><p><b>　　[實驗結果]：</b></p><p>　　1．剪輯、打印記錄曲線</p><p>　　2．繪三線表填入刺激器、放大器、顯速等參數(shù)及低溫、局麻前后閾刺激、最適刺激、動作電位幅度、時程、傳導速度、不應期等數(shù)據(jù)。</p><p><b>　　[注意事項]：</b></

44、p><p>　　1．制作標本過程中，盡量減少對神經(jīng)的牽拉，以免損傷神經(jīng)。</p><p>　　2．實驗過程中，要保持標本濕潤，不時向神經(jīng)干上滴任氏液，但要用任氏液棉球吸掉過多的水珠，以防電極短路。</p><p>　　3．始終保持神經(jīng)干與電極密切接觸。神經(jīng)干不可打折。</p><p>　　4．實驗有干擾時，應注意使用RM6240系統(tǒng)提供的50Hz

45、濾波功能。</p><p>　　5．實驗結束后，應清洗、擦干標本盒及電極，防止電極腐蝕。</p><p><b>　　實驗三</b></p><p>　?。ㄒ唬┏鲅獣r和凝血時測定</p><p>　　[目的和原理]：學會測定出血時、凝血時的方法和記錄測定結果并判定是否正常。</p><p>　　出

46、血時是指從傷口出血起至自行停止出血所需時間，實際是測量微小血管傷口封閉所需時間。出血時的長短與小血管的收縮，血小板的粘著、聚集、釋放以及血小板血栓形成等有關。出血時測定，可檢查止血過程是否正常。凝血時是指血液流出血管到出現(xiàn)纖維蛋白細絲所需時間，它反映有無凝血因子缺乏或減少。</p><p>　　[實驗對象]：人（自愿）</p><p>　　[實驗器材和藥品]：采血針、75%酒精棉球、干棉球

47、、秒表、濾紙條、玻片及大頭針等。</p><p>　　[實驗步驟和觀察項目]：</p><p>　　1.出血時測定  以75%酒精棉球消毒耳垂或指端后，用消毒后的采血針刺入皮膚2～3mm深，讓血自然流出，記下時間，每隔30秒鐘用濾紙條輕觸血液，吸干流出的血液，使濾紙上的血點依次排列，直到無血液流出為止，記下開始出血至停止出血的時間，或以濾紙條上血點數(shù)除以2即為出血時。正常人1～4

48、min。</p><p>　　2.凝血時測定  操作同上，刺破耳垂或指端，用玻片接下自然流出的第一滴血，記下時間，然后每隔30秒鐘用針尖挑血一次，直至挑起細纖維血絲止。從開始流血到挑起細纖維血絲的時間為凝血時。此法正常人為2～8min。</p><p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　1．各種用具應嚴格消毒，采

49、血針要做到一人一針，不能混用。</p><p>　　2．如出血時間超過15min，應停止實驗，進行止血。</p><p>　　3．針刺耳垂或手指時，不宜太淺。如針刺深度不夠，流血量太少，切勿擠壓，應重新針刺。</p><p>　　4．測定止血時間時，注意濾紙勿觸及傷口，以免影響結果的準確性。</p><p>　　5．測定凝血時間時，應嚴格每隔

50、30s用大頭針挑血一次，不可太頻繁。同時，每次挑動血液時，應沿同一方向，橫過血滴，勿多方向挑動，以免破壞血液凝固的纖維蛋白網(wǎng)狀結構造成不凝的假象。</p><p>　　[思考題]： 1．出血時間和凝血時間測定有什么臨床意義? 2. 出血時間長的患者凝血時間是否一定延長?</p><p>　?。ǘ┯绊懲醚耗痰囊蛩?lt;/p><p>　　[目的和原理]：本實驗以發(fā)生

51、血液凝固的時間為指標，向血液中加入或去掉某些因素或改變某些條件（如果溫度等），以觀察對血液凝固的影響。</p><p>　　血液凝固是在一系列凝血因子的參與下，使溶解狀態(tài)下的纖維蛋白原水解成不溶解的纖維蛋白的過程。</p><p>　　[實驗對象]：家兔血</p><p>　　[實驗器材和藥品]：兔手術器械一套、動脈插管、小燒杯、小號試管刷、清潔小試管8支、計時表（

52、學生自備）、水浴裝置一套、冰塊、棉花、石蠟油、肝素、草酸鉀。</p><p>　　[實驗步驟和觀察項目]：</p><p>　　家兔麻醉后，仰臥固定于兔手術臺上，分離一側勁總動脈，做動及插管，備取血用。</p><p>　　1、觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用 取兔動脈血約10ml，注入兩個燒杯內，一杯靜置，另一杯用小號試管刷輕輕攪拌，數(shù)分鐘后，試管刷上結成紅色血

53、團。用水沖洗，觀察纖維蛋白的形狀。然后比較兩杯的凝血情況。</p><p>　　2、血液凝固的加速或延緩 取8支干凈試管，按下表準備各種不同的實驗條件。放血進入試管，每只試管里放約1ml，同時計時。每30s傾斜試管一次，觀察血液是否發(fā)生凝固，直至血液不再流動為止，記錄血液凝固的時間。</p><p><b>　　影響血液凝固的因素</b></p>&l

54、t;p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　加強分工和作，記時須及時，準確。</p><p>　　[討論題]：分析上述各因素影響血液凝固時間的機理。</p><p>　　實驗四 兔減壓神經(jīng)放電、動脈血壓調節(jié)及心血管受體分析</p><p>　　[目的和原理]：本實驗的目的學習用微機生物信號采

55、集處理系統(tǒng)引導減壓神經(jīng)放電的方法。觀察血壓升降時神經(jīng)沖動的變化，以加深對減壓反射的理解；通過學習哺乳動物動脈血壓直接測量方法，主要以動脈血壓為指標，探討在整體情況下一些神經(jīng)體液因素對心血管活動是如何進行調節(jié)的。減壓反射具有穩(wěn)定動脈血壓的作用。心臟受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)的支配。心交感神經(jīng)末稍釋放的遞質為去甲腎上腺素，與心肌細胞上的β1受體結合，能產(chǎn)生正性變時、變力、變傳導作用，從而使心輸出量增加；心迷走神經(jīng)末稍釋放的遞質是乙酰膽堿，與心肌細

56、胞上的M受體結合，產(chǎn)生負性變時、變力、變傳導作用，從而導致心輸出量減少。大多數(shù)血管只受交咸縮血管神經(jīng)支配，它興奮時末稍釋放去甲腎上腺素與血管平滑肌上的α受體結合，使血管平滑肌收縮，外周阻力增加。心血管活動受多種體液因素的調節(jié)，其中最重要的有腎上腺素和去甲腎上腺素。腎上腺素主要作用為增加心輸出里，也就是強心作用。去甲腎上腺素的作用主要表現(xiàn)為升高血壓作用。</p><p><b>　　[實驗對象]：家兔&l

57、t;/b></p><p>　　[實驗器材和藥品]：哺乳動物手術器械一套、兔手術臺、Rm6240生物信號記錄分析系統(tǒng)、血壓換能器、保護電極、動脈插管、三通管、動脈夾、鐵支架、細塑料插管、注射器（1ml、2ml、20ml）絲線、紗布、棉球、25%氨基甲酸乙酯（烏拉坦）、0.5%肝素、5%檸檬酸鈉、0.01%乙酰膽堿、0.01%去甲腎上腺素、1：100000腎上腺素、1：100000去甲腎上腺素、生理鹽水、石蠟

58、油。</p><p>　　[實驗步驟及觀察項目]：</p><p><b>　　一、裝置儀器</b></p><p>　　1．血壓換能器：換能器頭端主管接動脈插管，側管接三通，打開三通使換能器與大氣相通，用注射器將5%檸檬酸鈉能過三通緩慢注入換能器和動脈插管內，排盡空氣后關閉三通。然后將換能器輸出端接到RM6240生物信號采集處理系統(tǒng)的通道1。

59、</p><p>　　2．引導電極：神經(jīng)引導電極輸入RM6240生物信號采集處理系統(tǒng)的通道2。</p><p>　　3．刺激電極：電極接到Rm6240生物信號采集處理系統(tǒng)的刺激輸出端口。相應的參數(shù)在Rm6240B系統(tǒng)窗口菜單“刺激設置”中設置，刺激減壓神經(jīng)用5~10V、100~200Hz、刺激迷走神經(jīng)用10~15V、20~100Hz。</p><p>　　4．Rm6

60、240B系統(tǒng)的所有參數(shù)設置可選擇自動調零，然后根據(jù)實驗需要調整，通道1選擇“壓力”信號。</p><p><b>　　二、手術</b></p><p>　　1．麻醉及固定：動物稱重，用25%氨基甲酸乙酯按4ml/Kg，由兔耳緣靜脈緩慢注入（或由腹腔給藥），麻醉后仰臥位固定于兔臺上。頭部固定。</p><p>　　2．分離頸部神經(jīng)并行頸動脈插管：

61、剪去頸部毛——沿正中線切開皮膚5~7cm切口——止血鉗鈍性分離皮下組織及肌肉——暴露氣管——暴露右頸動脈鞘——分辯鞘內的頸總動脈、迷走神經(jīng)（最粗）、頸交感神經(jīng)（較細）、減壓神經(jīng)（最細）——用玻璃分針分離出2~3cm長迷走神經(jīng)，穿線以備辯認——分離雙側頸部動脈，各長約2-3cm，穿線備用——將左側頸部動脈近心端用動脈夾夾閉，遠心端用線扎牢，用手術刀柄或手術者的小指墊在動脈下方固定動脈。用眼科剪刀在結扎處的近端剪一斜口，向心臟方向插入已充滿

62、抗凝劑的動脈插管（注意管內不應有氣泡），用線將插管與動脈扎緊。緩慢放開動脈夾，記錄動脈血壓。用止血鉗夾住頸部部切口皮膚，向外上牽拉固定，使之形成一皮兜，將減壓神經(jīng)用玻璃分針鉤起放到固定在三維調節(jié)器的引導電極上。調節(jié)三維調節(jié)器，使記錄電極懸空，避免觸及周圍組織。注意神經(jīng)不可牽拉過緊，在皮兜內靠近減壓神經(jīng)處滴入38-40攝氏度的液體石蠟保溫，防止神經(jīng)干燥。</p><p><b>　　觀察項目</b&

63、gt;</p><p>　　1．觀察減壓神經(jīng)放電的頻率、幅度。</p><p>　　2．觀察觀察動脈血壓（曲線、收縮壓、舒張壓、平均壓）</p><p>　　3．靜脈注射去甲腎上腺素：耳緣靜脈注射1：100000去甲腎上腺素0.2-0.3ml,觀察上述指標的變化。</p><p>　　4．靜脈注射乙酰膽堿：耳緣靜脈注射1：100000乙酰膽堿

64、0.20~0.3ml，觀察上述指標的變化。</p><p>　　5．用動脈夾夾閉右側頸總動脈15-20S，觀察上述指標的變化。</p><p>　　6．牽拉左側頸總動脈遠心端的結扎線，觀察上述指標的變化。</p><p>　　7．插股動脈套管進行放血，使動脈血壓迅速降至50mmHg左右，觀察上述指標的變化。然后通過股靜脈迅速輸血和補液，觀察上述指標的變化。</

65、p><p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　1．麻醉劑量要適量，注射時一定要緩慢推注。</p><p>　　2．每次實驗后，應等血壓和心率穩(wěn)定后再進行下一項實驗。</p><p>　　3．每次注射藥后應立即用一注射器注射生理鹽水0.5ml左右，以防止藥液殘留在針頭內及局部靜脈中而影響下一種藥物的效應。

66、</p><p>　　4．本次實驗需多次靜脈給藥，為避免多次靜脈穿刺，可選用小兒頭皮注射針，將針頭用膠布或動脈固定于耳緣靜脈內，其后套上注射器。注射的部位應盡可能的從末稍開始，然后逐次向內遞進。</p><p><b>　　[討論題]：</b></p><p><b>　　分析各項實驗結果</b></p>&

67、lt;p>　　實驗五 生理因素對兔呼吸運動和膈神經(jīng)放電的影響</p><p>　　[目的和原理]：學習用計算機生物信號系統(tǒng)記錄呼吸及隔神經(jīng)放電的方法；觀察血液化學成份改變對呼吸運動及膈神經(jīng)放電的影響；觀察牽張反射以及迷走神經(jīng)在此反射中的作用。呼吸運動能夠有節(jié)律地進行，并能適應機體代謝的需要，有賴于呼吸中樞的調節(jié)作用。體內外各種刺激可以直接作用于呼吸中樞或通過不同的感受器反射性地影響呼吸運動，由此調節(jié)呼吸運

68、動的頻率和深度，使肺通氣能適應機體代謝的需要。</p><p><b>　　[實驗對象]：家兔</b></p><p>　　[實驗器材和藥品]：哺乳動物手術器械一套、免手術臺、氣管套管、注射器、橡皮管、紗布、線、引導電極、玻璃分針、壓力換能器、RM6240多功能生物信號采集處理系統(tǒng)、20%氨基甲酸乙酯溶液、3%乳酸溶液、生理鹽水、10%尼可剎米注射液、CO2。<

69、/p><p>　　[實驗步驟和觀察項目]：</p><p><b>　　一、動物手術:</b></p><p>　　1.麻醉與固定:25%氨基甲酸乙酯耳緣靜脈緩慢注射(0.75-1.0g/kg體重)，麻醉完成后背位交叉固定于免手術臺上。</p><p>　　2．氣管插管術：見實驗一。</p><p>

70、　　3．分離隔神經(jīng)：在勁外靜脈與胸鎖乳突肌之間向縱深處分離直至脊柱肌，透過脊柱肌表面淺筋膜可見到頸椎發(fā)出的第3、4、5頸神經(jīng)叢。由3、4、5頸神經(jīng)發(fā)出的腹支匯合成的神經(jīng)分支，緊帖前斜方肌的腹緣并與肌纖維平行走向胸腔,此即為膈神經(jīng)。用玻璃分針將其分離1.5-2cm引線備用。用止血鉗夾住切口皮膚及組織，向上方牽引固定，使之形成皮兜，在皮兜內分離神經(jīng)處滴加40℃液體石蠟保溫防燥。然后用玻璃分針將膈神經(jīng)輕輕挑入引導電極上，通過三維調節(jié)器調節(jié)緊張

71、度，神經(jīng)不可牽拉過緊，記錄電極應懸空，避免接觸周圍組織。在頸部皮膚切口處用導線使動物接地。</p><p>　　4．膈肌放電記錄：將二根記錄電極從劍突下插入使其接觸膈肌以記錄膈肌放電。</p><p>　　5．儀器連接及調試：引導電極接入RM6240多功能生物信號采集處理系統(tǒng)1通道。Y形氣管插管的一側管與大氣相通，另一側管用硅膠管與壓力換能器相連，壓力換能器接入RM6240多功能生物信號采

72、集處理系統(tǒng)2通道。膈肌放電引導電極接入RM6240多功能生物信號采集處理系統(tǒng)3通道。在桌面雙擊RM6240多功能生物信號采集處理系統(tǒng)進入界面，用鼠標左鍵單擊菜單條的“實驗項目”菜單項，彈出下拉式菜單，移動鼠標至“呼吸實驗”，選擇“膈神經(jīng)放電”，用鼠標左鍵單擊該項，系統(tǒng)自動進入該實驗記錄存盤狀態(tài)。實驗參數(shù)根據(jù)需要調整。</p><p><b>　　二、實驗觀察項目：</b></p>

73、<p>　　1．同步記錄呼吸及膈神經(jīng)放電、膈肌放電曲線。觀察呼吸的頻率和幅度，膈神經(jīng)放電和膈肌放電的頻率和幅度。</p><p>　　2．增大無效腔：將氣管插管的一側夾閉，把30cm長的橡皮管連在氣管插管的另一側上，動物通過此橡皮管進行呼吸。觀察對膈神經(jīng)放電或膈肌放電及呼吸運動的影響。</p><p>　　3．由耳緣靜脈注入10%的尼可剎米（50mg/kg體重），觀察膈神經(jīng)放

74、電及膈肌放電和呼吸運動的變化。</p><p>　　4．增加血液酸堿度：自兔耳緣靜脈注入3%乳酸1-2ml，觀察膈神經(jīng)放電及膈肌放電和呼吸運動的變化。</p><p>　　5．頸迷走神經(jīng)的作用：記錄一段對照呼吸曲線后，先切斷一側迷走神經(jīng)，觀察呼吸運動、膈神經(jīng)和膈肌放電的變化。再切斷另一側迷走神經(jīng)，觀察其變化（從曲線上識別呼氣相與吸氣相變化有何不同）。然后，以電刺激（刺激參數(shù)：連續(xù)刺激、強度

75、3V左右、波寬1-2ms），刺激一側迷走神經(jīng)的中樞端10s左右，觀察刺激期間呼吸運動的變化。</p><p>　　6．肺擴張反射現(xiàn)象觀察：在兔自主呼吸末用注射器經(jīng)氣管插管快速推入10-20ml空氣，使肺過度擴張，觀察呼吸運動變化（此項實驗呼吸的記錄最好用膈肌運動法或胸膜腔內壓記錄法）。</p><p><b>　　[實驗注意事項]：</b></p>&l

76、t;p>　　1．實驗中始終保持氣管插管暢通。</p><p>　　2．分離神經(jīng)時，要細心、動作要輕、避免牽拉。</p><p>　　3．每項處理反應曲線前，均應有對照曲線。</p><p>　　[討論題]：分析各項實驗結果</p><p>　　實驗六 影響家免循環(huán)、泌尿、呼吸的綜合實驗</p><p>　　[目

77、的和原理]：人體是一個有機的整體。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調控下，各系統(tǒng)之間相互聯(lián)系和相互影響，和種功能互相協(xié)調，使機體成為一個完整的整體。本實驗的目的通過學習哺乳動物動脈血壓直接測量方法、呼吸運動描記方法、觀察在整體情況下一些因素對心血管、呼吸運動、尿液生成的影響，并分析其作用機理。</p><p><b>　　[實驗對象]：家兔</b></p><p>　　[實驗器材和藥

78、品]：哺乳動物手術器械一套、兔手術臺、Rm6240生物信號采集處理系統(tǒng)、血壓換能器、動脈插管、動脈夾、氣管套管、50cm長橡皮管一條、壓力換能器、細塑料插管、注射器（1ml、2ml、20ml、絲線、紗布、棉球、25%氨基甲酸乙酯（烏拉坦）、0.5%肝素、5%檸檬酸鈉、0.01%乙酰膽堿、0.01%去甲腎上腺素、1：100000腎上腺素、1：100000去甲腎上腺素、生理鹽水、石蠟油、3%乳酸、20%葡萄糖溶液、垂體后葉素、速尿、0.6%

79、酚紅注射液、10%NaOH溶液、班氏試劑。</p><p>　　[實驗步驟及觀察項目]：</p><p><b>　　一、裝置儀器</b></p><p>　　1．血壓換能器：換能器頭端主管接動脈插管，側管接三通，打開三通使換能器與大氣相通，用注射器將5%檸檬酸鈉能過三通緩慢注入換能器和動脈插管內，排盡空氣后關閉三通。然后將換能器輸出端接到Rm

80、6240生物信號采集處理系統(tǒng)的通道1。</p><p>　　2．呼吸換能器：壓力換能器的主管通過橡皮管接Y形插管，側管封閉。輸出端接到Rm6240B生物信號采集處理系統(tǒng)的通道2。</p><p>　　3．刺激電極：電極接到Rm6240生物信號采集處理系統(tǒng)的刺激輸出端口。相應的參數(shù)在Rm6240B系統(tǒng)窗口菜單“刺激設置”中設置，刺激減壓神經(jīng)用5~10V、100~200Hz、刺激迷走神經(jīng)用10

81、~15V、20~100Hz。</p><p>　　4．Rm6240B系統(tǒng)的所有參數(shù)設置可選擇自動調零，然后根據(jù)實驗需要調整，通道1選擇“壓力”信號，通道2選擇呼吸或者壓力信號。</p><p><b>　　二、手術</b></p><p>　　1．麻醉及固定：動物稱重，用25%氨基甲酸乙酯按4ml/Kg，由兔耳緣靜脈緩慢注入（或由腹腔給藥），麻

82、醉后仰臥位固定于兔臺上。頸部拉直。</p><p>　　2．分離頸部神經(jīng)并行頸動脈插管：剪去頸部毛——沿正中線切開皮膚5~7cm切口——止血鉗鈍性分離皮下組織及肌肉——暴露氣管——暴露右頸動脈鞘——分辯鞘內的頸總動脈、迷走神經(jīng)（最粗）、頸交感神經(jīng)（較細）、減壓神經(jīng)（最細）——用玻璃分針分離出2~3cm長迷走神經(jīng)，穿線以備辯認——分離雙側頸部動脈，各長約2~3cm，穿線備用——將左側頸部動脈近心端用動脈夾夾閉，遠心

83、端用線扎牢，用手術刀柄或手術者的小指墊在動脈下方固定動脈。用眼科剪刀在結扎處的近端剪一斜口，向心臟方向插入已充滿抗凝劑的動脈插管（注意管內不應有氣泡），用線將插管與動脈扎緊。緩慢放開動脈夾，記錄動脈血壓。</p><p>　　3．氣管插管：在喉下將氣管與食管分開，然后在氣管上做一“⊥”形剪口，插入“Y”形氣管套管，用棉線結扎固定。</p><p>　　4．輸尿管插管：下腹部剪毛——切開皮膚

84、，切口從恥骨聯(lián)合向上長約5cm——沿腹白線切開腹腔——下翻膀胱，暴露膀胱三角，仔細辯認輸尿管——輕輕分離一側輸尿管——結扎輸尿管近膀胱端——在結扎之上剪一斜口，把充滿生理鹽水的細塑料管向腎臟方向插入輸尿管內——結扎固定。</p><p><b>　　[觀察項目]</b></p><p>　　1．正常血壓曲線：觀察“心博波”與“呼吸波”</p><p

85、>　　正常呼吸曲線，記錄尿量（通過記錄每分鐘尿液滴數(shù)來計量）</p><p>　　2．靜脈注射去甲腎上腺素：耳緣靜脈注射1：100000去甲腎上腺素0.2~0.3ml,觀察血壓、心率、呼吸、尿量的變化。</p><p>　　3．靜脈注射乙酰膽堿：耳緣靜脈注射1：100000乙酰膽堿0.20~.3ml，觀察血壓、心率、呼吸、尿量的變化。</p><p>　　4．

86、靜脈注射垂體后葉素：耳緣靜脈注射垂體后葉素2u，觀察血壓和尿量的變化。</p><p>　　5．增大無效腔氣量：在氣管插管的通氣口側連接一長50cm的橡皮管，使無效腔增大，觀察血壓、心率、呼吸的變化。</p><p>　　6．電刺激迷走神經(jīng)：刺激完整的迷走神經(jīng)，觀察各項指標的變化；對游離的迷走神經(jīng)做雙重結扎，在兩結扎線的中間剪斷迷走神經(jīng)，以同樣的刺激參數(shù)分別刺激其中樞端和外周端，觀察各項觀

87、察指標的變化。</p><p><b>　　[注意事項]：</b></p><p>　　1．麻醉劑量要適量，一定要緩慢推注。</p><p>　　2．作氣管插管時，插管前應注意對管剪口處進行止血，并將氣管內清理干凈，現(xiàn)行插管。</p><p>　　3．換能器接口處要注意密封性。</p><p>　

88、　4．每次實驗后，應等各項指標恢復穩(wěn)定后再進行下一項實驗。</p><p>　　5．每次注射藥后應立即用一注射器注射生理鹽水0.5ml左右，以防止藥液殘留在針頭內及局部靜脈中而影響下一種藥物的效應。</p><p>　　6．本次實驗需多次靜脈給藥，為避免多次靜脈穿刺，可選用小兒頭皮注射針，將針頭用膠布或動脈固定于耳緣靜脈內，其后套上注射器。注射的部位應盡可能的從末稍開始，然后逐次向內遞進。