交叉配血唾液定型

1、實驗二 交叉配血、唾液定型,實驗?zāi)康?掌握交叉配血的原理、方法和臨床意義熟悉唾液定型的原理、方法和臨床意義,交叉配血原理,交叉配血試驗是輸血前必須做的紅細(xì)胞系統(tǒng)的配合性試驗，以確定受者或供者血液沒有可測的不相配合的抗原和抗體成分 試驗包括主側(cè)和次側(cè)配血： 主側(cè)是受血者血清與供血者紅細(xì)胞的反應(yīng) 次側(cè)是受血者紅細(xì)胞和供血者血清的反應(yīng) 只有兩側(cè)均不凝集或溶血才能輸血,方法,鹽水介質(zhì)法酶法抗人球蛋白法凝聚胺

2、介質(zhì)法凝膠法,鹽水介質(zhì)法,天然IgM類血型抗體可與對應(yīng)的紅細(xì)胞在室溫鹽水介質(zhì)中出現(xiàn)凝集反應(yīng)，通過離心觀察主次側(cè)有無凝集現(xiàn)象。,實驗步驟,1.分離患者血清，1000r/min 5min，標(biāo)記為PS2.配制2%患者紅細(xì)胞生理鹽水懸液（需洗滌），標(biāo)記為PC3.分離獻(xiàn)血員血清，標(biāo)記為DS4.配制2%獻(xiàn)血員紅細(xì)胞生理鹽水懸液（需洗滌），標(biāo)記為DC5.交叉配血：取試管兩支，標(biāo)記為主、次 主側(cè)配血管分別加PS2滴，DC1滴

3、 次側(cè)配血管分別加DS2滴，PC1滴，混勻， 1000r/min 30sec6.觀察結(jié)果：先觀察試管上層有無溶血，再斜持試管輕輕搖動，觀察管底有無凝集,注意事項,1.用于交叉配血的病人(受血者)血液標(biāo)本應(yīng)該是抽取的新鮮血，供血者的標(biāo)本是剛從血袋剪下來的原已加熱封閉兩端小管中的血液。2.用試管法作交叉配血試驗，不能用玻片法。3.用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞去除血漿，預(yù)防纖維凝塊的形成4.為確保輸血安全，應(yīng)輸同型血。5.主次

4、側(cè)均無凝集反應(yīng)表示配血相合，血液可以輸注；任何一側(cè)凝集或兩側(cè)均凝集為配血不合，禁忌輸血6.配血試管中發(fā)生溶血現(xiàn)象時表明有抗原抗體反應(yīng)并激活補(bǔ)體引起紅細(xì)胞溶血，必須引起高度重視。7.加樣時注意紅細(xì)胞與血清的比例要適當(dāng)（一般1：2為宜），比例失當(dāng)時可能導(dǎo)致假陰性反應(yīng)；反應(yīng)溫度也不能過低，以免非特異性冷抗體引起的冷凝集反應(yīng)造成假陽性結(jié)果8.本法只能檢測出IgM類完全抗體，不能檢出IgG類免疫性的不完全抗體，對于有輸血史（尤其是有輸血反應(yīng)

5、史）、妊娠、免疫性疾病史和器官移植史的病人就不宜單獨(dú)使用,臨床意義,1．進(jìn)一步驗證受血者與供血者血型鑒定是否正確，發(fā)現(xiàn)ABO血型的不規(guī)則抗體以及ABO血型以外的配血不和，以避免血型鑒定錯誤而導(dǎo)致的輸血后嚴(yán)重溶血反應(yīng)。2．若受血者一次輸血超過1 600～2 000ml時，除了做受血者與供血者之間的交叉配血外，還應(yīng)作供血者之間的交叉配血，以防止供血者相互間血型不合及不完全抗體的存在，保證輸血安全。,唾液定型原理,ABH抗原不但存在于紅細(xì)胞

6、膜表面，還可存在于血清、唾液、胃液、精液、尿液、羊水和腹水等體液中，這些可溶性的抗原物質(zhì)又被稱為“血型物質(zhì)”。凡體液中可檢出這種血型物質(zhì)者為分泌型；無血型物質(zhì)者稱為非分泌型。唾液+定量抗體 → +RBC + 無血型物質(zhì) - 有血型物質(zhì),無游離抗體,混勻，室溫5min,,,實驗步驟,1.唾

7、液收集：5-10ml（可煮沸10min滅活唾液酶，離心取上清）2.洗滌ABO型RBC，分別配成2%紅細(xì)胞生理鹽水懸液3.將抗A、抗B、抗H血清用生理鹽水分別1：16稀釋,800r/min，2min后，判斷結(jié)果抗H管凝集為非分泌型，不凝為分泌型 抗A管 抗B管A型： - +B型： + -O型： +