血型和交叉配血

1、血型和交叉配血,南華大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)教研室謝海濤,,一、ABO血型系統(tǒng),,,,,,二、ABO血型鑒定,三、Rh血型系統(tǒng),四、交叉配血,,,報(bào)告內(nèi)容,ABO血型和RH血型是紅細(xì)胞的2大血型抗原抗體系統(tǒng)，在輸血和血液遺傳學(xué)研究有重大的意義。,一、ABO血型系統(tǒng),1900年 美國免疫學(xué)家Karl landsteiner 發(fā)現(xiàn)RBC膜上A、B血型抗原，血清中有抗A、抗B抗體，將血型分為A、B、AB和O型。,（一） ABO血型系統(tǒng)抗原

2、 1. ABO血型系統(tǒng)的組成和遺傳 是存在于RBC膜上的一種糖蛋白，有多肽和糖鏈組成。A和B基因是顯性基因，O基因是隱性基因，由A,B基因調(diào)控。 2. ABO血型系統(tǒng)抗原的分布 A、B、H抗原存在于RBC膜上，也分布于WBC,PLT及其他組織細(xì)胞上。,血型物質(zhì)：組織細(xì)胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多為半抗原，主要存在于體液和分泌物中，以唾液中最為豐富。 分為分泌型和非分泌型。 血型物質(zhì)具有和

3、相應(yīng)的抗體反應(yīng)的性質(zhì)可以協(xié)助鑒定ABO血型和預(yù)測胎兒的血型。,（二） ABO血型系統(tǒng)抗體 分為天然抗體和免疫性抗體。 天然抗體主要為IGM型抗體。 免疫性抗體主要為IGG型抗體。,,（三）ABO血型系統(tǒng)亞型 A抗原主要亞型：A1和A2，中國以A1亞型為主。B亞型較少見，抗原性較弱。,,二、ABO血型鑒定,輸血安全是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。 檢測原理：血型抗原與相應(yīng)

4、的抗體在介質(zhì)中形成RBC和相應(yīng)血型抗體結(jié)合的免疫復(fù)合物，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。,正向定型：用已知的特異性血清檢查紅細(xì)胞的未知血型抗原。 反向定型：用已知的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查標(biāo)本中未知血型抗體。方法：鹽水凝集法：檢測IGM型抗體。2. 凝膠微柱法,,方法學(xué)評價(jià)：1.鹽水凝集法 分為玻片法和試管法。簡單易行。2.凝膠微柱法 重復(fù)性好，特異性靈敏性高，全自動分析儀可以減少人為誤差。缺點(diǎn)：成本高

5、，需要特殊設(shè)備。,質(zhì)量保證： 1.標(biāo)準(zhǔn)血清 ： 在有效期內(nèi)使用，效價(jià)高，凝集力強(qiáng)，嚴(yán)防污染。常用的有： A 、人血清ABO血型抗體：特異性高，凝集效價(jià)：抗A不低于1︰128，抗B不低于1︰64，親和力在15秒出現(xiàn)凝集，3分鐘明顯凝集，穩(wěn)定性高，滅活補(bǔ)體。 B、人ABO單克隆抗體：特異性，親和力，凝集效價(jià)，穩(wěn)定性高。,2. 被檢紅細(xì)胞： A 、標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染。 B 、特殊病人標(biāo)本，加做對照及正反定型，以及用

6、洗滌紅細(xì)胞做血型鑒定。3. 實(shí)驗(yàn)器材 ： 清潔干糙，應(yīng)正反定型，時間溫度離心時間均應(yīng)該嚴(yán)格控制。 觀察結(jié)果仔細(xì)，注意出現(xiàn)弱凝集現(xiàn)象，必要時在顯微鏡下觀察結(jié)果。4. 綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。核實(shí)無誤時方可以發(fā)出檢查結(jié)果。,臨床意義： 1.輸血 2. 器官移植 3. 新生兒溶血病 4. 其他,三、Rh血型系統(tǒng),1940年，Karl Landsteiner and Alexander Wien

7、er 發(fā)現(xiàn)了Rh血型系統(tǒng)，是最復(fù)雜的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)之一。具有遺傳多態(tài)性，，導(dǎo)致血清學(xué)表現(xiàn)復(fù)雜，表型頻率極不平衡。有3種命名方式。,（一） Rh血型系統(tǒng)的命名1 . Fisher-Race 命名法（CDE命名法）A、遺傳基因位于1號染色體短臂上的連鎖基因，每條有三個基因位點(diǎn)，依次排為CDE。 B、各基因位點(diǎn)由一對等位基因組成。C CDE以復(fù)合體的形式遺傳 D 可有8種基因組合和36種遺傳型。,2. ISBT命名法。3

8、. Rh血型系統(tǒng)表型及基因型。根據(jù)紅細(xì)胞上有無D抗原為Rh陽性和 Rh陰性。,（二） Rh血型系統(tǒng)抗原及抗體 1. Rh血型系統(tǒng)抗原 僅次于ABO血型系統(tǒng)的A、B抗原。與人類密切的是D、E、C、c、e。 2. Rh血型系統(tǒng)抗體 天然抗體極少，由輸血或妊娠刺激產(chǎn)生的IGG型免疫性抗體。以抗D最為常見。,（三）Rh血型鑒定 常用方法有酶介質(zhì)法，低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn)，抗人球蛋白試驗(yàn)，凝集胺試驗(yàn)及人源鹽水介質(zhì)抗

9、D試驗(yàn)。 檢測原理 1.酶介質(zhì)法 ：用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，降低紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減少排斥力，促進(jìn)Rh抗原與抗體的結(jié)合而產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集。,2.聚凝胺試驗(yàn)：聚凝胺是帶高價(jià)陽離子的季胺鹽，有利于紅細(xì)胞凝集。由Rh抗體致敏的紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集是特異性的不可逆凝集，非抗體致敏的凝集為可逆性凝集。3. 抗球蛋白試驗(yàn) （Coombs Test）：是檢測紅細(xì)胞上不完全抗體的經(jīng)典方法。利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，通過連接致敏

10、紅細(xì)胞表面的特異性Rh抗體，出現(xiàn)特異性凝集。,4.人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)：利用免疫球蛋白變性劑處理，使IGG變?yōu)镮GM類抗體，能在鹽水介質(zhì)中發(fā)生凝集現(xiàn)象，用于快速鑒定。5.低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn),方法學(xué)評價(jià),質(zhì)量保證 1.檢測前：標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染，被檢紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌。 試劑器材要在有效期內(nèi)的合格試劑，器材清潔干燥。,2.檢測中：A 、嚴(yán)格遵守操作規(guī)程 。B 、嚴(yán)格控制抗原抗體比例、介質(zhì)濃度、反應(yīng)時間溫度以及離心條件等關(guān)

11、鍵因素。C、每次均需陰性陽性和試劑對照。D、觀察結(jié)果不可用力震搖，結(jié)果可疑用顯微鏡觀察確認(rèn)。3. 檢測后：復(fù)查實(shí)驗(yàn)全過程，填寫報(bào)告并于4度保存標(biāo)本一周以上。,臨床意義1. Rh血型鑒定及交叉配血2.新生兒溶血病的診斷,四、交叉配血 交叉配血實(shí)驗(yàn)是在現(xiàn)象鑒定的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步檢測受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分。主側(cè)：受血者血清與供血者紅細(xì)胞；次側(cè)：受血者紅細(xì)胞與供血者血清。 檢測原理 常用鹽水配血

12、試驗(yàn)。,方法學(xué)評價(jià),質(zhì)量保證1.檢測前：A、建立標(biāo)本簽收制度。B、標(biāo)本新鮮，無溶血，嚴(yán)防污染，有輸血或妊娠史的應(yīng)在48小時內(nèi)留取。 C試劑器材要在有效期內(nèi)的合格試劑。D、器材清潔干燥，嚴(yán)防溶血。,2.檢測中：A、高度責(zé)任感。 B、器材標(biāo)記清楚，吸管等均專用。 C、被檢紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌，濃度與標(biāo)準(zhǔn)血清的比例恰當(dāng)。D、嚴(yán)格控制反應(yīng)時間溫度和離心條件。,E、配血試驗(yàn)陰性但有反復(fù)輸血史和妊娠史