hematoxylin ii-081128

1、共5頁第1頁蘇木精染色液（蘇木精染色液（Mayer法）法）分類號(hào)分類號(hào)7602021使用須知使用須知用途用途本試劑主要用于體外診斷（IVD）。蘇木精染色液（Mayer法）是一種改良的Mayer蘇木精，用于對(duì)切片中的細(xì)胞核染色，切片含冰凍組織、福爾馬林固定切石蠟包埋的組織或細(xì)胞制劑。要合理解釋任何染色結(jié)果的臨床意義必須同時(shí)結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察和適當(dāng)?shù)膶?duì)照。由資深的病理學(xué)家參考病人的臨床病史以及其它實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。。注意：美國聯(lián)邦法律規(guī)定

2、本器材僅限由醫(yī)生或遵醫(yī)囑銷售。摘要和說明摘要和說明蘇木精可對(duì)多種組織成分（包括細(xì)胞核、線粒體、粘蛋白、血紅蛋白、彈性纖維以及膠原）進(jìn)行染色。染料組分（氧化蘇木精）通過媒染劑硫酸鋁直接結(jié)合組織。原理和操作原理和操作一般而言，在IHC染色中，首先是特定抗體（一抗）與抗原結(jié)合，隨后二抗（連接抗體）和一抗結(jié)合，最后酶復(fù)合物和顯色底物相結(jié)合，這些反應(yīng)之間插入洗滌步驟，使抗原顯色。酶激活顯色劑使反應(yīng)產(chǎn)物在抗原位點(diǎn)顯色。隨后使用蘇木精溶液在切片上復(fù)染

3、標(biāo)本。蘇木精通過媒染劑復(fù)合物結(jié)合異染色質(zhì)中的核酸以及組蛋白將細(xì)胞核染成藍(lán)色。每個(gè)孵育步驟結(jié)束時(shí)，Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)清洗切片，使反應(yīng)停止并去除未結(jié)合的試劑。同時(shí)還對(duì)標(biāo)本進(jìn)行藍(lán)化并蓋上載玻片。使用光學(xué)顯微鏡讀取結(jié)果，此結(jié)果有助于鑒別與特定抗原有無關(guān)聯(lián)的病理生理學(xué)過程。材料和方法材料和方法提供的試劑提供的試劑1–25ml小瓶蘇木精；含有乙二醇和醋酸穩(wěn)定溶液。使用方法使用方法不需溶解、混合、稀釋或滴定。本試劑針對(duì)結(jié)合Ventana一抗

4、、檢測(cè)試劑盒和輔助試劑一同在Ventana自動(dòng)切片染色機(jī)上的使用進(jìn)行了優(yōu)化。所需的材料和試劑（未提供）所需的材料和試劑（未提供）以下列出了可能要用到，但本試劑盒中未提供的試劑和材料：1.陽性或陰性組織對(duì)照2Ventana陰性對(duì)照試劑3Ventana兔陰性對(duì)照4.一抗5.顯微鏡載片，帶正電荷6.能將溫度保持在70C5C的干燥爐7.條碼標(biāo)簽（適用于陰性對(duì)照和一抗）8.10%中性緩沖福爾馬林9.染色缸或染槽10.定時(shí)器11.二甲苯12.乙醇或

5、梯度酒精13.去離子水或蒸餾水14.BiocareMedical’sDecloakingChamber（NexESIHC自動(dòng)切片染色機(jī)）15.ESNexESIHC、BenchMarkXT自動(dòng)切片染色機(jī)16.iVIEWTMDABAECVRed(ALKPHOS)EnhancedVReddetectionkits17.EndogenousBiotinBlockingKit18.Detectionkitspecificsoftware(ESau

6、tomatedslidestaineronly)19.APKWashSolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)20.LiquidCoverslipTMsolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)21.EZPrepTMsolution(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)22.ReactionBuffer(B

7、enchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)23.LCS(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)24.CellConditioning1(CC1)CellConditioning2(CC2)CellConditioning3(CC3)(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)25.ProteaseIIII

8、II26.BluingReagent27.封固劑28.蓋玻片29.光學(xué)顯微鏡（2080X）適用于特定檢測(cè)。儲(chǔ)存和處理儲(chǔ)存和處理儲(chǔ)存于28C。不可冷凍。對(duì)于不屬于包裝插頁中列出的儲(chǔ)存條件，使用者必須加以檢驗(yàn)。為確保正確的試劑傳送和試劑盒成分的穩(wěn)定性，每次運(yùn)行后必須更換蓋子，且必須立即將分配器垂直放置在冰箱里。每個(gè)分配器都標(biāo)有有效期。如儲(chǔ)存適當(dāng)，本試劑可穩(wěn)定至標(biāo)簽上標(biāo)示的日期。一旦試劑過期，規(guī)定的儲(chǔ)存方法將不再適用。表示本品不穩(wěn)定的跡象是在

9、清洗溶液時(shí)試劑出現(xiàn)沉淀。一旦發(fā)現(xiàn)試劑不穩(wěn)定，請(qǐng)立即聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐墓?頁第3頁1.將載玻片脫蠟并經(jīng)過一系列二甲苯和梯度酒精入水和相應(yīng)的緩沖液。實(shí)施抗原修復(fù)修復(fù)程序并將載玻片轉(zhuǎn)移至APK洗滌液（1X）中。2.將一抗、相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放置到自動(dòng)切片染色機(jī)上。檢查液體瓶和廢物缸。3.在載玻片干燥的一端粘貼與試驗(yàn)方案對(duì)應(yīng)的條碼標(biāo)簽。4.將已經(jīng)過脫蠟、抗原修復(fù)、加貼標(biāo)簽的載玻片放入APK洗滌液（1X）中。避

10、免組織干燥。不需進(jìn)行抗原暴露：不需進(jìn)行抗原暴露：1.將條碼標(biāo)簽貼于載玻片一端。再經(jīng)一系列二甲苯脫蠟和梯度酒精入水，然后放入APK洗滌液（1X）。2.將一抗和相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放到自動(dòng)切片染色機(jī)上。3.從APK洗滌液（1X）中加載經(jīng)脫蠟和加貼標(biāo)簽的載玻片。避免組織變干。BenchMark或BenchMarkXT自動(dòng)切片染色機(jī)自動(dòng)切片染色機(jī)1.使用載玻片條碼標(biāo)簽，該標(biāo)簽與待執(zhí)行的試驗(yàn)方案相對(duì)應(yīng)。2.

11、將一抗、相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放置到自動(dòng)切片染色機(jī)上。檢查液體瓶和廢物缸。3.將載玻片放到自動(dòng)切片染色機(jī)上。針對(duì)所有分析儀針對(duì)所有分析儀1.開始染色。2.染色結(jié)束后，將載玻片從自動(dòng)切片染色機(jī)上拿下來。3.對(duì)于iVIEWDAB和VentanaRed試劑盒，用溫和的洗滌劑或酒精進(jìn)行清洗，以去除蓋玻片上的溶液；在脫水和清潔后，常規(guī)封片。4.對(duì)于AEC顯色，不要脫水和透明。用水溶性封固劑封片。應(yīng)在染色后的2

12、3天內(nèi)閱片，染色片于室溫（2028C）下可保存至少2年。質(zhì)控程序質(zhì)控程序陽性組織對(duì)照陽性組織對(duì)照每次染色流程必須包含陽性對(duì)照。陽性對(duì)照的目的是為了確定試劑和儀器功能的可靠性。用于對(duì)照的組織可同時(shí)包含呈陽性和陰性染色的細(xì)胞或組織成分，以便同時(shí)提供陽性和陰性對(duì)照。用于對(duì)照的組織應(yīng)為新鮮的尸檢、活檢或外科手術(shù)切除標(biāo)本，并采用與試驗(yàn)切片相同的方法盡快制備或固定。對(duì)照組織的目的是為了監(jiān)控程序的所有步驟，包括從標(biāo)本制備到染色的各個(gè)環(huán)節(jié)。使用與試驗(yàn)樣

13、本不同固定或處理方式的組織切片可對(duì)除固定和組織處理以外的所有試劑和方法步驟進(jìn)行質(zhì)控?？墒褂藐栃匀旧^弱的組織來優(yōu)化質(zhì)控和檢測(cè)輕微的試劑降解。陽性對(duì)照只能用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)步驟和試驗(yàn)試劑的正確性，而不能用來輔助評(píng)價(jià)病人樣本的診斷結(jié)果。如果陽性對(duì)照出現(xiàn)陰性結(jié)果，則實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的結(jié)果無效。陰性組織對(duì)照陰性組織對(duì)照可將用于陽性對(duì)照的同一組織用于陰性對(duì)照。由于在大多數(shù)組織中細(xì)胞類型多樣，故可同時(shí)提供內(nèi)部陰性對(duì)照位點(diǎn)，但使用者應(yīng)對(duì)此進(jìn)行檢驗(yàn)。如果陰性對(duì)照中出

14、現(xiàn)特異性染色，那么病人樣本的結(jié)果應(yīng)被視為無效。疑難解答疑難解答當(dāng)對(duì)照試驗(yàn)有任何問題，請(qǐng)立即向您當(dāng)?shù)氐腣entana辦事處報(bào)告。如果對(duì)照試驗(yàn)缺乏特異性，那么病人結(jié)果將視為無效。詳情請(qǐng)參見本說明書的“疑難解答”一節(jié)。在明確和解決問題后重復(fù)檢測(cè)病人樣本。陰性試劑對(duì)照陰性試劑對(duì)照對(duì)于免疫組化而言，為正確評(píng)判結(jié)果，每次試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)立陰性試劑對(duì)照。陰性試劑用于取代一抗來評(píng)估非特異性染色。在適當(dāng)時(shí)載玻片應(yīng)使用單克隆陰性對(duì)照或多克隆陰性來染色。如使用了其

15、他陰性試劑對(duì)照，應(yīng)使用Ventana抗體稀釋劑將其稀釋至與一抗同樣的濃度。稀釋劑本身也可作為陰性試劑對(duì)照。陰性試劑對(duì)照的孵育時(shí)間應(yīng)與一抗的孵育時(shí)間相同。當(dāng)在一組連續(xù)切片上使用多個(gè)抗體時(shí)，應(yīng)用一個(gè)陰性試劑對(duì)照即可。檢測(cè)方案正確性檢驗(yàn)檢測(cè)方案正確性檢驗(yàn)每當(dāng)初次制定檢測(cè)方案，都應(yīng)首先進(jìn)行陽性或陰性對(duì)照檢驗(yàn)，用以驗(yàn)證方法的特異性（參照本產(chǎn)品說明書中的“質(zhì)控程序”一節(jié)，以及美國病理家學(xué)院實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可體系、解剖病理檢查表和NCCLS批準(zhǔn)指南中的質(zhì)控建