石油降解菌株的篩選、鑒定及其石油降解特性的初步研究.pdf

1、隨著現(xiàn)代石油工業(yè)的發(fā)展，石油的環(huán)境污染問(wèn)題越來(lái)越突出，微生物修復(fù)技術(shù)被公認(rèn)為是治理石油污染的較好方法，研究發(fā)現(xiàn)，獲得高效、廣譜、穩(wěn)定、適應(yīng)性強(qiáng)的石油降解菌株以及配套治理工藝是利用該技術(shù)進(jìn)行石油污染治理的關(guān)鍵。 本文從大港油田長(zhǎng)期被石油污染的土壤和水體中采集樣品，對(duì)土壤中原油含量和三種主要微生物類群的數(shù)量進(jìn)行測(cè)定；以原油為唯一碳源，通過(guò)直接分離和富集培養(yǎng)分離的方法進(jìn)行石油降解菌株的篩選；通過(guò)形態(tài)觀察、生理生化試驗(yàn)、16srDNA全

2、序列分析及Biolog方法對(duì)石油降解菌株進(jìn)行初步鑒定；對(duì)影響降解菌株生長(zhǎng)和降解效率的相關(guān)因素進(jìn)行試驗(yàn)，以確定各菌株在搖瓶中的最適生長(zhǎng)和原油降解條件；完成石油降解復(fù)合菌群的組建，對(duì)影響復(fù)合系降解效率的因素進(jìn)行試驗(yàn)研究，通過(guò)室內(nèi)對(duì)模擬石油污染土壤的降解試驗(yàn)評(píng)估復(fù)合系的應(yīng)用效果。 試驗(yàn)結(jié)果如下：1、石油污染對(duì)大港油田土壤中微生物群落的影響顯著，微生物數(shù)量的變化同原油含量有一定的相關(guān)性，由于石油污染，大港油田土壤中微生物數(shù)量普遍偏低，重

3、度污染區(qū)的微生物數(shù)量隨著含油量的增加而減少。 2、從大港油田石油污染樣品中分離得到16株能以原油為唯一碳源的菌株，通過(guò)篩選得到4株原油降解率超過(guò)60％的菌株，其中OD-5和OD-16對(duì)原油的降解率分別達(dá)到77.78％和74.89％，高于很多目前已報(bào)道的菌株。經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗(yàn)、16srDNA全序列分析和Biolog反應(yīng)，將4株降解菌初步鑒定為：OD-5為Gordoniaamicalis，OD-7為Micrococcush

4、alobius，OD-15為Shewanellasp.，OD-16為Pseudomonassp.，目前對(duì)Gordoniaamicalis，Micrococcushalobius和Shewanellasp.作為石油降解菌的報(bào)道較少。這一結(jié)果為微生物降解石油提供了新的信息。 3、通過(guò)搖床試驗(yàn)得出4株石油降解菌在搖瓶中的最佳生長(zhǎng)和原油降解條件：初始pH為7～8，溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm，鹽濃度(NaCl)為1％，最適氮源為

5、NH4Cl，最適磷源為KH2PO4和K2HPO4的混合物(1∶2)。 4、通過(guò)菌株組合試驗(yàn)，獲得一個(gè)降解效果較好的復(fù)合系ODC-4，7d，對(duì)濃度為500mg/Kg的原油的降解效率達(dá)到84.36％，該復(fù)合系在搖瓶中的最適降解條件為：初始pH為8～9，溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm，鹽濃度(NaCl)為1％，最適氮源為NH4Cl，最適磷源為KH2PO4和K2HPO4的混合物(1∶2)。原油的類型影響復(fù)合系的降解效率；原油濃度低

6、于2000mg/Kg時(shí)對(duì)復(fù)合系的降解效率影響不大，濃度超過(guò)2000mg/Kg后，降解效率受到一定影響，隨著原油濃度的增加，復(fù)合系的降解效率逐漸降低，當(dāng)濃度達(dá)到10000mg/Kg時(shí)，原油的降解率為21.44％；不同的表面活性劑對(duì)復(fù)合系的降解率均有一定的促進(jìn)作用，尤其是復(fù)合型表面活性劑的效果最明顯。ODC-4在室內(nèi)降解模擬石油污染土壤，15d，土壤中原油(500mg/10g)的降解率達(dá)到41.60％，28d，降解率提高到47.02％，表現(xiàn)