天然雌激素降解菌的篩選鑒定及其降解特性研究.pdf

1、近年來環(huán)境雌激素的污染逐漸引起國內(nèi)外學者的關(guān)注，并開始對其在環(huán)境中的污染水平及其生物降解特性等進行探討。本文從廈門灣、筼筜湖及廈門某污水處理廠活性污泥中馴化、分離得到19株降解17β-雌二醇(E2)的好氧菌株，其中5株可以降解E1，一株為交替赤桿菌屬新種，為含環(huán)境激素類廢水的生物強化處理提供了新菌株材料。
　　 本文通過查閱相關(guān)文獻歸納了E2的降解途徑，考察了降解菌株對雌酮(E1)雌三醇(E3)、睪酮(T)和苯酚的降解性能，并推

2、測了T的降解途徑，比較了降解菌和已報道的E2降解菌株KC8對E2的降解效果，同時考察了KC8兩株模式菌株對E2的降解性能。主要結(jié)論如下;
　　 1.本實驗成功地從活性污泥和咸水湖中篩選出19株能降解E2的菌株。其中從咸水湖中分離得到的菌株MH-B為交替赤桿菌屬新菌種，查閱相關(guān)文獻，少有海水中分離到的雌激素降解菌，只有熊光明等從波羅的海分離到一株E2降解新菌H5(未鑒定)，所以本實驗分離到的菌株MH-B是目前報道的第一株鑒定的海水

3、雌激素降解菌。
　　 2.測定了AX-B、AHC-F、AHC等菌株的分離地點某污水廠中各工藝的3種天然雌激素含量，結(jié)果表明該污水廠中3種天然雌激素的含量較高，E1、E2、E3進水濃度分別為835.55ng/L、222.86ng/L和556.30ng/L;出水濃度分別為693.13ng/L、138.6ng/L8和141.16ng/L。查看了菌株MH-B分離環(huán)境筼筜湖和廈門灣中這3種雌激素含量，半數(shù)以上采樣點都檢測到雌激素，濃度范圍

4、E1在＜LOD-12ng/L之間，E2在＜LOD-4.0ng/L之間，E3在＜LOD-3.0ng/L之間，表明這兩處區(qū)域已經(jīng)受到天然雌激素污染，天然雌激素對該水域生物的影響值得關(guān)注。
　　 3.分析菌株MH-B、AX-B、AHC-F、AHC-A對E2的降解實驗，發(fā)現(xiàn)菌株MH-B、AX-B、AHC-F能完全降解E2及其初步降解產(chǎn)物E1，而菌株AHC-A只能將E2脫氫氧化生成E1，不能將E1進一步降解，由此把降解菌分為兩種降解模式，

5、降解模式Ⅰ;可以把E2降解為雌激素活性比較低的E1，但在研究時間內(nèi)卻無法繼續(xù)降解E1，菌株AHC-A及其它只能把E2降解成E1的菌屬于這一降解模式;降解模式Ⅱ;菌株將E2完全降解后，又可以較快地降解E2的最初代謝產(chǎn)物E1，菌株MH-B，AX-B、AHC-F及分離的另外兩株菌AH-E和AH-A屬于這一降解模式。
　　 4.在E2降解實驗中，菌株MH-B、AX-B、AHC-F均可以在8h內(nèi)將100ml、2mg/L的E2完全降解。在以

6、E1為唯一碳源的生長實驗中，菌株MH-B在6d內(nèi)對E1的降解率達到最高但不能將E1完全降解;菌株AHC-F在22d內(nèi)將E1完全降解。
　　 5.菌株MH-B生長溫度范圍為4℃-40℃，最適溫度為35℃-40℃;生長pH值范圍為4.5-10.0，最適PH值為7.5;生長鹽度范圍為0-7％，最適鹽度為1％。
　　 6.利用LC-MS分析T降解產(chǎn)物，推測T降解途徑:T經(jīng)過一系列生物催化反應(yīng)，首先生成去氫睪酮(DHT)和雄烯二酮

7、(AD)，然后，DHT和AD都轉(zhuǎn)化成1，4雄烯二酮(ADD)，之后生成9α-羥基-1，4雄烯二酮(9α-OH-ADD)，再經(jīng)過一系列的反應(yīng)，最后降解生成CO2和水。
　　 7.分析菌MH-B、AX-B、AHC-F、AHC-A對E2、E3、T、EE2和苯酚降解實驗，結(jié)論如下:菌AX-B和AHC-F可以降解E1、E2、E3、T、和苯酚，MH-B可以降解E1、E2、E3和T但不能降解苯酚，AHC-A可以將E2、T初步降解，不可以降解E