中國(guó)東南沿海五種擬菱形藻形態(tài)、遺傳多樣性與系統(tǒng)進(jìn)化研究.pdf

1、擬菱形藻(Pseudo—nitzschia)是廣泛分布于世界各地的潛在產(chǎn)毒赤潮藻。本研究首先從我國(guó)東南沿海分離并建立擬菱形藻各個(gè)種的純種株系；然后利用光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、特征描述，并進(jìn)行分類研究；再選擇核糖體SSUnrDNA、LSUnrDNA、和5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)基因?qū)ζ溥M(jìn)行分子生物學(xué)分析，包括基因序列差異性分析、遺傳多樣性分析和系統(tǒng)進(jìn)化分析。旨在對(duì)分布于我國(guó)東南

2、沿海的擬菱形藻進(jìn)行形態(tài)學(xué)分類和分子鑒定，并分析其種間、種內(nèi)、不同地理株系的地理遺傳差異性和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系，探明我國(guó)東南沿海主要擬菱形藻的種類和遺傳多樣性水平。主要結(jié)果如下： 1．分析了采白海南、香港、廣州、廈門、臺(tái)灣海峽和長(zhǎng)江口等地的12株擬菱形藻。根據(jù)其形態(tài)學(xué)特征，鑒定為5個(gè)種：尖刺擬菱形藻(P．pungens)、尖細(xì)擬菱形藻(P．cuspidata)、多紋擬菱形藻(P．multistriata)和巴西擬菱形藻(P．brazil

3、iana)、柔弱擬菱形藻(P．delicatissima)。其中除巴西擬菱形藻外，其它四種均為潛在產(chǎn)毒藻。除分析了從我國(guó)東南沿海分離的擬菱形藻外，還綜合比較了來(lái)自加拿大的6株有毒多列擬菱形藻(P．mutiseries)。 2．分析了上述12株擬菱形藻基于SSUnrDNA、LSUnrDNA和5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)序列的遺傳多樣性。結(jié)果表明：SSUnrDNA序列平均長(zhǎng)度為1745bp，含有103個(gè)變異位點(diǎn)

4、和44個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)；LSUnrDNA平均長(zhǎng)度為822bp含有50個(gè)變異位點(diǎn)和32個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)；5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)的平均長(zhǎng)度為729.3bp，有439(1209)個(gè)變異位點(diǎn)和401(1209)個(gè)簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)。總體來(lái)說(shuō)，擬菱形藻的SSUnrDNA和LSUnrDNA較為保守，ITSnrDNA變異性較大。柔弱擬菱形藻(P．delicatissima)的LSUnrDNA存在較明顯的種內(nèi)差異。其他4種擬菱形藻的S

5、SUnrDNA和LSUnrDNA的種內(nèi)差異性不大。 3．通過(guò)軟件預(yù)測(cè)ITS序列的二級(jí)結(jié)構(gòu)并計(jì)算補(bǔ)償性堿基改變(CBCs：compensatorybasechanges)。通過(guò)對(duì)擬菱形藻的ITS—1和ITS-2二級(jí)結(jié)構(gòu)的CBCs分析表明，來(lái)自長(zhǎng)江口和來(lái)自廈門胡里山的尖刺擬菱形藻可能存在生殖隔離。 4．在系統(tǒng)發(fā)育的研究中，從用鄰位相接法(NJ)、最大簡(jiǎn)約法(MP)和最小進(jìn)化法(ME)所構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹來(lái)看，多列擬菱形藻和尖刺