醫(yī)學(xué)微生物學(xué)厭氧性細(xì)菌-上海交通大學(xué)

1、第11章 厭氧性細(xì)菌,（anaerobic bacteria）,概述,必須在無氧環(huán)境下，才能生長繁殖根據(jù)能否形成芽胞，可分為厭氧芽胞梭菌屬無芽胞厭氧菌,第一節(jié) 厭氧芽胞梭菌屬,(Clostridium),概述,嚴(yán)格厭氧菌，革蘭陽性芽胞比菌體粗，菌體膨大呈梭狀，抵抗力強(qiáng)周鞭毛，無莢膜（除產(chǎn)氣莢膜梭菌外）致病菌產(chǎn)生外毒素致病，病情嚴(yán)重防治：類毒素與抗毒素,一、破傷風(fēng)梭菌,（C．tetani）,破傷風(fēng)（tetanus）的病原

2、菌,生物學(xué)性狀,形態(tài)與染色菌體細(xì)長，芽胞正圓，位于菌體頂端，使細(xì)菌呈鼓槌狀培養(yǎng)特性和生化反應(yīng)血平板上，有β溶血,生物學(xué)性狀,抵抗力芽胞抵抗力很強(qiáng)75~80℃ 10min仍保持活力在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年,致病性與免疫性,所致疾病-破傷風(fēng),致病條件,傷口需形成厭氧微環(huán)境傷口窄而深（如刺傷），有泥土或異物污染大面積創(chuàng)傷、燒傷，壞死組織多，局部組織缺血有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口無侵襲力，僅在局部繁殖，其致病

3、作用完全有賴于病菌所產(chǎn)生的外毒素,致病因子,對(duì)氧敏感的破傷風(fēng)溶血毒素(tetanolysin) 質(zhì)粒編碼的破傷風(fēng)痙攣毒素(tetanospasmin)屬神經(jīng)毒(neurotoxin)，毒性極強(qiáng)(對(duì)人致死量<1µg)蛋白質(zhì)，不耐熱,破傷風(fēng)痙攣毒素,結(jié)構(gòu)菌體：一條多肽釋出菌體：輕鏈（A鏈）-S-S-重鏈（B鏈）B鏈：神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合的單位A鏈：毒性作用,破傷風(fēng)痙攣毒素作用機(jī)制,與神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)合B鏈識(shí)別運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元

4、外胞漿膜上的受體并結(jié)合，促使毒素進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)小泡中內(nèi)在化作用小泡從外周神經(jīng)末稍沿神經(jīng)軸突逆行向上，到達(dá)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元細(xì)胞體，進(jìn)入傳入神經(jīng)末稍，最終進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng),破傷風(fēng)痙攣毒素作用機(jī)制,膜的轉(zhuǎn)位通過重鏈N端的介導(dǎo)產(chǎn)生膜的轉(zhuǎn)位使輕鏈進(jìn)入胞質(zhì)溶膠胞質(zhì)溶膠中作用靶的改變A鏈發(fā)揮毒性作用，使儲(chǔ)存抑制性神經(jīng)介質(zhì)小泡膜蛋白發(fā)生改變，阻止抑制性神經(jīng)介質(zhì)γ-氨基丁酸的釋放，使肌肉活動(dòng)的興奮與抑制失調(diào)，造成麻痹性痙攣,典型的癥狀苦笑面容角弓反張

5、其它,免疫性,破傷風(fēng)免疫屬外毒素免疫，主要是抗毒素發(fā)揮中和作用（毒素與中樞神經(jīng)組織結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合即非抗毒素所能中和）病后不會(huì)獲得牢固免疫力獲得有效抗毒素的途徑是人工免疫,微生物學(xué)檢查法,一般不進(jìn)行涂片鏡檢和分離培養(yǎng)典型的癥狀和病史即可作出診斷,防治原則,防止創(chuàng)口厭氧微環(huán)境的形成特異性預(yù)防：注射破傷風(fēng)類毒素 三聯(lián)疫苗 免疫程序：3、4、5月 3次 2、7歲加強(qiáng)

6、 2次 特殊情況 1次緊急預(yù)防：注射破傷風(fēng)抗毒素（tetanus antitoxin，TAT）特異性治療：早期足量使用抗毒素及抗生素,二、 產(chǎn)氣莢膜梭菌,(C．perfringens ),生物學(xué)性狀形態(tài)與染色,兩端平切粗大桿菌芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體無鞭毛體內(nèi)有明顯的莢膜,,培養(yǎng)特性,生長迅速，代謝活躍，45℃生長最好血瓊脂平板：雙層溶血環(huán)

7、 內(nèi)環(huán)完全溶血-θ毒素 外環(huán)不完全溶血- α毒素蛋黃瓊脂平板：Nagler反應(yīng)牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵” （stormy fermentation）,分型,分為5個(gè)毒素型對(duì)人致病的：A型,致病性致病物質(zhì),外毒素,產(chǎn)氣莢膜梭菌主要和次要毒素及其分型,致病物質(zhì),α毒素以A型產(chǎn)生量最大引起血管通透性增加伴大量溶血、組織壞死、肝臟、心功能受損在氣性壞疽的

8、形成中起主要作用β、ε、ι毒素引起壞死損傷和血管通透性增加腸毒素,所致疾病,氣性壞疽主要由A型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起致病條件與破傷風(fēng)梭菌相同潛伏期短，發(fā)展迅速，病情險(xiǎn)惡，死亡率高，以組織壞死，氣腫和全身中毒為特征 組織壞死、血管內(nèi)皮損傷，通透性上升 出血、水腫、局部壞死 分解糖產(chǎn)氣，壓迫軟組織、血管

9、 加重組織壞死（捻發(fā)音） 分解組織，病變迅速擴(kuò)散，引起全身中毒癥狀,,,,,食物中毒食入被大量細(xì)菌污染的食物（多為肉類）臨床表現(xiàn)：腹痛、腹脹、水樣腹瀉；可自愈,微生物學(xué)檢查法,直接涂片鏡檢深部創(chuàng)口取材涂片革蘭陽性大桿菌白細(xì)胞少且不典型伴有其它雜菌早期診斷能避免病人最終截肢或死亡,分離培養(yǎng)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)接種血平板或庖

10、肉培養(yǎng)基，鏡檢及生化反應(yīng)鑒定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)如懷疑食物中毒，在發(fā)病后一日內(nèi)，檢出大于105病菌/克食品或106病菌/克糞便可確立診斷,防治原則,預(yù)防及時(shí)處理傷口，破壞和消除厭氧微環(huán)境預(yù)防性的使用抗生素治療局部感染的處理抗生素α抗毒素高壓氧艙法,三、肉毒梭菌,（C．botulinum）,生物學(xué)特性,芽胞呈橢圓形，粗于菌體，位于次極端，使細(xì)胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀根據(jù)神經(jīng)毒素的抗原性分A~G 7個(gè)型，各型毒素只能被同型抗毒素中和肉

11、毒毒素不耐熱，煮沸1分鐘即可被破壞,致病性,致病物質(zhì) 肉毒毒素劇毒（對(duì)人致死量為0.1µg)功能和致病機(jī)制與破傷風(fēng)外毒素相似,作用機(jī)制,作用于外周神經(jīng)肌肉接頭處，抑制外周神經(jīng)介質(zhì)乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致弛緩性麻痹前體分子存在，可穩(wěn)定存在于外環(huán)境和胃腸道。復(fù)合物進(jìn)入小腸后，在堿性情況下解離，被吸收進(jìn)入血循環(huán),所致疾病,食物中毒進(jìn)食污染食物（多為罐頭、肉制品、豆制品）發(fā)生食物中毒---食入毒素臨床表現(xiàn)：少見胃腸道癥狀，主

12、要為神經(jīng)末梢麻痹（松馳型）乏力、頭痛→眼肌麻痹：復(fù)視、斜視、眼瞼下垂→咽部肌肉麻痹：吞咽、咀嚼困難、口齒不清→膈肌麻痹，呼吸困難→窒息死亡神志清楚病死率高,所致疾病,嬰兒肉毒病細(xì)菌進(jìn)入腸道，繁殖，產(chǎn)生毒素而致病以6個(gè)月以內(nèi)的小嬰兒居多癥狀與肉毒食物中毒類似，便閉、吸乳、啼哭無力病死率不高,微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本食物中毒患者：食物嬰兒肉毒病患者：糞便糞便、食物等標(biāo)本可先80°C加熱10分鐘，再厭氧培養(yǎng)毒素檢查

13、,防治原則,加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理和監(jiān)督，提高防范意識(shí) （低溫保存食物，高溫破壞毒素）盡早根據(jù)癥狀作出診斷，迅速注射A、B、E三型多價(jià)抗毒素，同時(shí)加強(qiáng)護(hù)理和對(duì)癥治療,四、 艱難梭菌,（ C．difficile）,概述,新生兒腸道中正常菌群因長期使用抗生素引起,致病性,產(chǎn)生A、B兩種毒素，即腸毒素和細(xì)胞毒素因長期使用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)后可引起內(nèi)源性感染或院內(nèi)交叉感染臨床表現(xiàn)：假膜性腸炎,第二節(jié) 無芽胞厭氧菌,概述,屬人體內(nèi)的正常菌群，

14、包括革蘭陽性和革蘭陰性的球菌和桿菌在某些特定狀態(tài)下，這些厭氧菌作為條件致病菌可導(dǎo)致內(nèi)源性感染,一、主要種類、性狀和在感染中的作用,與人類疾病相關(guān)的主要無芽胞厭氧菌,常見的致病菌,G-桿菌：脆弱類桿菌(B．fragilis)臨床上最常見的無芽胞厭氧菌分離株G-球菌：韋榮菌屬咽喉部主要厭氧菌,常見的致病菌,G+球菌：消化鏈球菌屬僅次于脆弱類桿菌主要寄居于陰道G+桿菌：丙酸桿菌屬：痤瘡丙酸桿菌雙歧桿菌屬真桿菌屬,二、 致

15、病性,致病條件,屬正常菌群，在成為條件致病菌后，可引起內(nèi)源性感染感染條件寄居部位改變宿主免疫力下降菌群失調(diào)厭氧微環(huán)境,感染特征,內(nèi)源性感染，可及全身，多呈慢性無特定病型，大多為化膿性感染分泌物或膿液粘稠，乳白色、粉紅色、血色或棕黑色，有惡臭，有時(shí)有氣體使用氨基糖苷類抗生素長期無效分泌物直接涂片可見細(xì)菌，但普通培養(yǎng)法無細(xì)菌生長,臨床上遇到以下情況，應(yīng)考慮有無厭氧菌感染,所致疾病,敗血癥中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染呼吸道感染口腔